第8章 淋巴细胞

第八章淋巴细胞1在人和动物血液中，存在形态各异、功能不同的多种血细胞。红细胞血小板白细胞淋巴细胞（20-30%）粒细胞单核细胞23基本概念免疫细胞:泛指所有参与免疫应答及与免疫应答活动相关的细胞，包括淋巴细胞，抗原提呈细胞，单核吞噬细胞系统等。免疫活性细胞:指能够接受抗原刺激、产生特异性的活化、增殖、分化并形成效应产物的淋巴细胞。主要指T,B细胞。4骨髓依赖性淋巴细胞（bonemarrow-dependentlymphocyte）的简称由哺乳动物骨髓或鸟类法氏囊中淋巴样前体细胞分化而来。

是体内唯一能产生抗体的细胞。B淋巴细胞占外周淋巴细胞总数的20%。第一节B淋巴细胞5

膜表面免疫球蛋白（mIg）作为B细胞的特征性表面标志，是B细胞的特异性抗原受体，可识别不同的抗原分子，使B细胞激活，分化为浆细胞，并产生不同的特异性抗体，发挥体液免疫功能。6一、B细胞的分化成熟

B淋巴细胞的成熟过程包括不成熟细胞的增殖和成熟细胞库的选择。原B细胞发育成表达膜结合蛋白IgM和IgD的细胞，然后离开骨髓，循环到外周淋巴器官，然后通过膜Ig分子识别抗原，并对外源性抗原做出应答。即B细胞分化可分为2个阶段：

a抗原非依赖期(不成熟细胞的增殖）:发生在成年动物的骨髓中，导致B细胞成熟并对抗原具有应答能力。

b抗原依赖期（成熟细胞库的选择）:发生在外周免疫器官，出现在细胞对抗原产生应答后。71、B细胞在骨髓中分化成熟

B细胞在骨髓内分化各阶段的变化主要为免疫球蛋白基因的重组和膜表面标志的表达。在其成熟的过程之中，B细胞经历了几个阶段，每个阶段都有一种特异性Ig基因的表达和其它细胞表面蛋白的表达，可作为该阶段成熟的显性标记。其在骨髓中的发育过程如下:祖B细胞（pro-B）

前B细胞(pre-B)

不成熟B细胞（immatureB)

成熟B细胞(mature)8祖B细胞：早期：D-J重排；晚期：V-D-J重排；表达Igα/Igβ；前B细胞：大前B细胞：表达pre-B受体（μ链和替代轻链）小前B细胞：轻链V-J重排，但仍不表达功能性BCR不成熟B细胞：表达完整的mIgM，但抗原并不能引起这些细胞的增殖和分化，不过如与自身抗原相遇将导致细胞死亡或功能上无反应。成熟B细胞：表达mIgM和mIgD，膜Ig有共同的V区，也有共同的抗原特性，IgM和IgD的共表达伴随着功能的获得。9MDImmatureBcells前B细胞（胞浆出现IgM重链）MPre-Bcells原B细胞Pro-BcellsMM未成熟B细胞出现IgM

成熟B细胞（出现IgM、IgD）M

DGM

DAMatureBcells102、B细胞在外周免疫器官的成熟

在外周淋巴组织中，成熟B细胞对外来抗原应答发生增殖和分化。成熟B细胞一旦被抗原或其它信号刺激就成为活化的B细胞，并发生增殖、分化，使分泌型的Ig增加、膜结合型Ig减少。此时，一些活化的B细胞进行重链类型的转变，开始表达其它类型的Ig，如γ、α、ε。同时，一些活化的B细胞不分泌抗体，而是成为持续存在的表达膜Ig的记忆细胞。记忆细胞可存活几周或几个月，在血、淋巴和淋巴器官内循环，但受到抗原刺激时，可引起次级抗体应答。1112

值得注意的是，在整个过程中，每一个B细胞克隆表达相同的V区，保持相同的抗原特异性。然而，对抗原的应答过程中，抗体的V区可发生微小的变化，抗原刺激后，抗原特异性B细胞上的膜Ig和分泌Ig平均亲和力均增加。因此，再次应答大大高于初次应答，这个过程称为亲和成熟，是蛋白质类抗原体液免疫应答的典型特征。机理：亲和成熟是由个体内抗原刺激B细胞中编码IgV区的DNA突变引起的，后面的选择过程确保存活细胞以高亲和力识别抗原。133、B细胞中枢免疫耐受形成机制1.克隆清除：

骨髓内未成熟B细胞+自身Ag→凋亡2.受体编辑不成功→

凋亡识别自身抗原的未成熟B细胞被诱导改变其特异性，这个过程称为受体编辑。3.无能：

进入外周的未成熟B细胞mIgM下调对Ag刺激不应答14机体免疫应答过程依赖于免疫系统中细胞间的相互作用，包括：直接接触和间接作用。细胞间相互识别的物质基础是细胞表面的膜分子，又称为细胞表面标记（cellsurfacemarker）。淋巴细胞的表面标记指存在于细胞表面的多种膜分子，是淋巴细胞识别抗原、与其它免疫细胞相互作用以及接受微环境刺激的分子基础，也是鉴别和分离淋巴细胞的重要依据。二、B细胞的表面标志15CR1BCR复合体CD19-CD21-CD81-CD22CD72CD40B7ICAM-1MHC分子

丝裂原受体LFA-1FcRB淋巴细胞161.组成mIg功能：特异性识别抗原意义：B细胞的主要标志，成熟B细胞主要表达mIgM和mIgDIgαIgβ结构特点：各含一个ITAM结构功能传导BCR同抗原结合产生的活化信号(信号传导分子)参与mIg合成后的转运和表达1、B细胞抗原受体（BCR）17BCR是B细胞表面的重要标记，存在于所有成熟B细胞。182、Fc受体（FcR）大多数B细胞表面具有IgG的FcR，能与IgG的Fc段结合，介导多种生物学效应。抗体(A)致敏的红细胞（E）可与B细胞结合，称为EA花环。193、补体受体（CR）CR是B细胞分化成熟的标志大多数B细胞表面有能与C3b和C3d结合的受体，分别称为C3b受体、C3d受体

。发现先后命名为CR1（CD35）CR2（CD21）CR3（CD11b/CD18）CR4(CD11c/CD18)

20补体受体介导生物学作用CR1抑制补体活化消除免疫复合物，促进吞噬作用、免疫调节作用CR2促进B细胞活化、增殖和产生抗体、EBV受体CR3细胞粘附作用，促进吞噬21抗体（A）致敏的红细胞（E）与补体（C）结合后，可与B细胞形成EAC花环。224、丝裂原受体B细胞表面存在有丝分裂原受体，可以用美洲商陆（PWM）或脂多糖（LPS）等有丝分裂原刺激B细胞使之增殖分化，称为B淋巴细胞转化试验，可用于对B淋巴细胞的功能测定。5、细胞因子受体IL-1R、IL-2R、IL-4R、IL-6R等23

CD分子主要作用

CD19B细胞的特有标志，调节B细胞活化

CD20B细胞的特有标志，调节B细胞活化

CD21EBV受体；参与B细胞活化信号转导CD79a/CD79b与BCR组成复合物，转导信号

CD80(B7)与CD28结合，诱导T细胞活化

CD40与CD40L结合，介导T-B相互作用，与B细胞活化增殖分化有关6、B细胞表面的其他CD分子2425

（三）B细胞亚群1、根据CD5的表达与否分为：B-1和B-2细胞B-1细胞：产生于个体发育早期；表达CD5与mIgM；主要存在于肠道固有膜；以低亲和力与多种抗原表位结合，产生低亲和力IgM，与自身免疫病有关。B-1细胞功能：抗微生物感染清除变性的自身抗原诱导自身免疫病26B-2细胞为体内主要的B细胞功能产生抗体提呈抗原分泌细胞因子27B-1细胞与B-2细胞的异同性质B-1B-2初次产生时间胎儿期出生后更新方式自我更新由骨髓产生自发性Ig的产生高低特异性多反应性单特异性,尤其在免疫后分泌的Ig同种型IgM>IgGIgG>IgM体细胞突变低/无高对碳水化合物Ag应答是可能对蛋白质Ag应答可能是28初始B细胞（naïveBcell）寿命短效应B细胞（浆细胞）（plasmacell）寿命短，生存数日，称为短寿性浆细胞记忆性B细胞（memoryBcell）寿命长，可生存数月至数年2、根据B细胞活化的不同阶段分为：29B细胞形态初始B细胞浆细胞30四、B细胞的功能产生抗体介导体液免疫应答

——中和作用（中和毒素、中和病毒等）调理作用激活补体（经典途径）

ADCC31提呈可溶性抗原

摄取可溶性抗原并将其提呈给T细胞分泌细胞因子

激活的B细胞可产生细胞因子，参与免疫调节、炎症和造血等32一、T细胞的分化发育发育过程：胸腺细胞（来自骨髓的淋巴样干细胞）

被膜下区

皮质区

髓质移行成熟1、细胞表面分子的变化DN细胞(CD4-

CD8-）被膜下区和皮质边缘区；DP细胞（CD4+CD8+）深皮质区；SP细胞(CD4+或CD8+)皮髓交界处及髓质区。第二节Ｔ淋巴细胞33

1）双阴性胸腺细胞（double-negativethymocytes,DN):既不表达CD4又不表达CD8的胸腺细胞：在这一阶段表达TCRβ链，其与不稳定蛋白前Tα和CD3等这些分子在细胞表面形成前T细胞受体复合物，它是DNT细胞增殖和进一步成熟的基础。2）双阳性胸腺细胞（double-positivethymocytes,DP）:既表达CD4又表达CD8的胸腺细胞。在这一阶段，TCRα基因的表达使得TCRαβ形成，并与CD3等蛋白结合表达在细胞表面形成完整的TCR复合物，其可使DP细胞对抗原应答，并经历阳性选择和阴性选择。3）单阳性胸腺细胞（single-positivethymocytes,SP）:成功完成选择过程的细胞分化发育为仅表达CD4或CD8的细胞。即具有免疫功能的成熟T细胞，然后迁出胸腺，移居于外周淋巴器官。34T细胞的分化发育过程与膜表面分子的表达352、实现T细胞分化的条件

研究表明，胸腺基质细胞和细胞因子对T细胞的成熟起重要作用：1）胸腺上皮细胞、骨髓来源的巨噬细胞（Mφ)和树状突细胞(dendriticcell，DC）为胸腺细胞的增殖和成熟提供必要的刺激。上皮细胞存在于皮质和髓质，DC存在于皮－髓交界处或髓质内，Mφ主要存在于髓质内，因此，胸腺细胞发生转移时必然与这些细胞相互作用。非淋巴胸腺细胞产生的MHCⅠ和MHCⅡ对T细胞成熟非常重要，如胸腺皮质上皮细胞、Mφ和DC高水平表达MHCⅡ类分子，髓质上皮细胞和DC细胞表达MHCⅠ类分子和MHCⅡ类分子，而髓质Mφ表达高水平MHCⅠ类分子。成熟胸腺细胞必须与MHC分子相互作用，T细胞才能在胸腺中进行选择。2）胸腺基质细胞及其分化的细胞因子（如IL－7)也可对未成熟T细胞起增殖作用。36MHCⅠMHCⅡMHCⅠ和MHCⅡ373、胸腺中的T细胞如何选择？

未成熟T细胞库经过选择过程确保只有有用的细胞才能完成整个成熟过程。双阳性胸腺细胞需要经过阳性选择和阴性选择才能发育成为成熟的CD4+或CD8+单阳性T细胞。

381)阳性选择（Positiveselection，PS）定义：发生在深皮质区，主要发生在DP细胞与胸腺上皮细胞之间。胸腺内DPT细胞与胸腺上皮细胞表达的自身肽-MHCI或MHCII类分子以适当亲和力结合。其中与MHCI类分子结合的DPCD8分子表达升高，而CD4分子表达下降；与MHCII类分子结合的DPCD4分子表达升高，而CD8分子表达下降，选择性发育分化为CD4

或CD8

的SP细胞。而未能与胸腺上皮细胞表达的自身肽-MHCI或MHCII类分子结合的或亲和力过高的DPT细胞则发生凋亡。结果：阳性选择确定了MHCⅠ类或Ⅱ类分子限制性T细胞亚群。意义：使DP细胞分化为SP细胞并获得MHC限制性的识别能力。39２)阴性选择（negativeselection，NS)

位置：发生在皮质与髓质交界处，主要发生于sP细胞与胸腺内MΦ、DC或髓质上皮细胞间的相互作用。定义：SPT细胞与DC和MΦ表面的自身抗原肽-MHCⅡ或Ⅰ类分子复合物结合，导致自身反应性T细胞克隆清除或形成克隆不应答状态。只有那些未能与DC、MΦ表达的自身肽-MHC-I或MHC-II类分子结合的SPT细胞才能发育分化为成熟的T细胞，此过程称为阴性选择。结果：获得自身耐受性。经过阴性选择，排除了自身反应性T细胞克隆，只有识别非己抗原与自身MHC分子复合物的T细胞克隆才能存活下来,所以成熟的T细胞库表现为自身MHC限制性和自身耐受性两种特征。

4041TCR

CD35CD28CD4CD8

IL-2CD71CD58（LAF-3）CD2orFcmR

FcgR二、T细胞表面标志T细胞42

1、TCR-CD3复合物

由TCR、CD3分子以非共价键结合（1）TCR的结构和功能T细胞抗原受体(TCR）：T细胞特有的抗原受体，是T细胞表面特异性识别抗原的结构。

两类：TCRαβ：由α链和β链组成；TCRγδ：由γ链和δ链组成。功能：特异性结合MHC-抗原肽复合物，经CD3转导对T细胞的活化信号。43（2）CD3分子由γ、δ、ε、ζ（zeta）和η（eta）五种肽链组成，均含Ig样功能区和ITAM。功能：(1)参与T细胞发育过程中的TCR的膜表面表达；(2)介导TCR与抗原接触后产生的活化信号的传递；(3)成熟T细胞表面的表面标志，用于成熟T细胞的检测。44

CD4和CD8分子是T细胞重要的表面标志在TCR识别肽－MHCⅡ/MHCⅠ分子的时候，CD4/CD8分子分别与MHCⅡ/MHCⅠ类分子的CD4/CD8结合位点结合，故称为TCR的协同受体。外周血：CD4＋T细胞约占65%，CD8＋T细胞约占35%。2、CD4分子和CD8分子45（1）CD4分子功能：协同受体：A.CD4分子和TCR结合于同一MHCⅡ