第2章 蛋白质与核酸的化学

第二章蛋白质与核酸的化学第一节蛋白质的分子组成蛋白质的定义：是由20种氨基酸按一定的序列通过肽键缩合而成的，具有较稳定构象并具一定生物功能的生物大分子。蛋白质是细胞的重要组成部分，是功能最多的生物大分子物质，几乎在所有的生命过程中起着重要作用：1）作为生物催化剂，2）代谢调节作用，3）免疫保护作用，4）物质的转运和存储，5）运动与支持作用，6）参与细胞间信息传递。一、蛋白质的元素组成通过样品含氮量计算样蛋白质含量：100g样品中所含蛋白质克数(g%)=

每克样品中含氮克数*6.25*100主要元素：碳C、氢H、氧O、氮N大多数还含有硫；少量含：磷、铁、铜、锰、锌、碘等微量元素。特点：各种蛋白质的含N量很接近，平均约16%。二、蛋白质的基本组成单位——氨基酸氨基酸的结构通式：既含有氨基(—NH2)又含有羧基(—COOH)。H2N—C—COOHHR氨基羧基侧链，代表20种不同氨基酸指体内需要又不能自身合成，必须由食物供给的氨基酸。包括赖、色、苯丙、蛋、苏、亮、异亮及缬氨酸。假设来写一两本书甲硫(蛋)色赖缬异亮亮苯丙苏其余12种氨基酸体内可以合成，称非必须氨基酸必须氨基酸：第二节蛋白质的结构与功能根据蛋白质的结构不同层次，可将蛋白质结构分为一级、二级、三级和四级结构。一级结构为蛋白质的基本结构;二至四级为其空间结构。（一）肽键和肽肽键:一个氨基酸的α-羧基与另一个氨基酸的α-氨基脱水缩合而成的化学键(-CONH-)称为肽键。

一、蛋白质的基本结构2、肽定义：氨基酸通过肽键连接而成的化合物称为肽。多肽链：多个氨基酸通过肽键相连而成的多聚体。二肽：由两个氨基酸缩合而成。三肽：由三个氨基酸缩合而成。寡肽<10氨基酸多肽>10氨基酸氨基酸残基

肽链中的氨基酸分子因脱水缩合而稍有残缺，称为氨基酸残基。肽有两个末端，即氨基末端(N-末端或N-端)和羧基末端(C-末端或C-端)。书写时，N-末端常用H-表示，写在左侧；C-末端常用-OH表示，写在右侧。顺序编号从N-端开始到C-端。多肽链中由肽键连接的部分称为主链或骨干结构；氨基酸残基的R基团从主链的α-C伸出称为侧链

氨基末端(N-端)和羧基末端(C-端)主链(C-C-N-C)和侧链(R)3、生物活性肽

人体内存在某些具有重要生理功能的低分子多肽，称为生物活性肽。如谷胱甘肽、缩宫素、生长素、脑啡肽等。（二）蛋白质的一级结构概念：蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序。它是蛋白质的基本结构。主要化学键：肽键，也是蛋白质结构中的主键。二硫键的数目和位置也包括在蛋白质的一级结构中。蛋白质的一级结构由遗传信息所决定，一级结构被破坏，空间结构与生理功能也就发生改变。二硫键的数目和位置也包括在蛋白质的一级结构中。蛋白质的一级结构由遗传信息所决定，一级结构被破坏，空间结构与生理功能也就发生改变。二、蛋白质的空间结构蛋白质肽链通过折叠、盘曲，使分子内各原子形成一定的空间排布及相互关系，称为蛋白质的构象，即空间结构。维持蛋白质空间结构稳定的化学键主要有：氢键、盐键、疏水键、范德华力等非共价键和二硫键，统称为次级键或副键。蛋白质的空间结构包括二级、三级和四级结构。（一）蛋白质的二级结构维系二级结构的主要化学键是氢键。指多肽链主链在各个局部由于折叠、盘曲而重复出现所形成的空间结构。只涉及肽链主链，不涉及侧链。主要类型有

-螺旋、-折叠、-转角、无规则卷曲1、-螺旋定义：多肽链的主链围绕中心轴作有规律的盘曲，成螺旋状上升的结构为

-螺旋。走向为顺时针方向，称为右手螺旋。维持螺旋结构稳定的是氢键。每圈螺旋由3.6个氨基酸残基构成，一个螺旋的高度为0.54nm。2、-折叠3、-转角、无规则卷曲多肽链主链走向呈折纸状，成锯齿状结构。依靠氢键维持结构稳定。（a）平行式（b）反平行式都以氢键维持结构稳定。（二）蛋白质分子的三级结构定义：整条肽链所有原子在三维空间的排布位置。三级结构的稳定主要依靠侧链基团相互作用生成的各种次级键。主要次级键：疏水作用、离子键（盐键）、氢键、范德华力、二硫键等。一条肽链的蛋白质具备三级结构后即具有生物学功能。（三）蛋白质的四级结构由两条或两条以上具有三级结构的多肽链聚合而成、有特定三维结构的蛋白质构象。每条具有独立三级结构的多肽链又称为亚基。各亚基之间的结合力：疏水作用、氢键、离子键、范德华力。亚基单独存在没有活性。只有聚合在一起的四级结构，才具有蛋白质的生物学活性。蛋白质的结构层次复习1、蛋白质的定义，组成蛋白质的四种主要元素。2、蛋白质的平均含氮量是多少。3、蛋白质的基本组成单位是什么，写出其通式。4、必需氨基酸的概念，具体是哪几种。5、肽键、肽、氨基酸残基、主链、侧链的概念。6、蛋白质一级结构的概念，维持一级结构的主要化学键。7、蛋白质二级结构的概念，维持二级结构的主要化学键。8、二级结构的主要形式。9、蛋白质三级、四级结构的概念，维持其结构的主要化学键。是由20种氨基酸按一定的序列通过肽键缩合而成的，具有较稳定构象并具一定生物功能的生物大分子。主要元素：碳、氢、氧、氮。16%指体内需要又不能自身合成，必须由食物供给的氨基酸。包括赖、色、苯丙、蛋、苏、亮、异亮及缬氨酸。蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，是基本结构。主要化学键：肽键。指多肽链主链在各个局部由于折叠、盘曲而重复出现所形成的空间结构。主要化学键：氢键。主要类型有

-螺旋、-折叠、-转角、无规则卷曲第三节蛋白质的理化性质和分类一、蛋白质的理化性质1、两性电离和等电点2、亲水胶体性质3、蛋白质的沉淀4、蛋白质的变性5、紫外吸收性质及呈色反应（一）两性电离和等电点蛋白质分子中既含有呈碱性的氨基，能发生碱式电离又含有呈酸性的羧基，能发生酸式电离——故蛋白质能发生两性电离

等电点：蛋白质在某一pH溶液时，解离成正、负离子的趋势相等，所带正、负电荷数相等，称为兼性离子。此时溶液的pH称为该蛋白质的等电点，用pI表示。溶液pH＝pI时，蛋白质所带正负电荷相等；

pH＞pI时，蛋白质带净负电荷；

pH＜pI时，蛋白质带净正电荷。人体血浆中蛋白质的等电点大多数接近pH5.0，所以血浆中蛋白质在pH=7.4的环境下以阴离子形式存在。电泳：溶液中带点粒子在电场中向电性相反的电极移动的现象称为电泳蛋白质分子在一定pH的溶液中可带净的负电荷或正电荷，故可在电场中发生移动。不同蛋白质分子所带电荷量不同，且分子大小也不同，故在电场中的移动速度也不同，据此可互相分离。二、蛋白质的胶体性质蛋白质分子的颗粒直径已达1~100nm，处于胶体颗粒的范围。（亲水胶体）蛋白质具有胶体溶液的性质：布朗运动、丁达尔效应、不能透过半透膜、具有吸附力等。1、蛋白质具有胶体溶液的性质二、蛋白质的胶体性质2、稳定蛋白质亲水溶胶的两个重要因素：水化膜----通过氢键与水结合表面电荷----在非等电点状态下，双电层，带同性电荷蛋白质分子互相排斥。

蛋白质不能透过半透膜，细胞膜是半透膜，所以正常尿液不含蛋白质。透析：是利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。可用于纯化蛋白质。（三）蛋白质的沉淀概念：蛋白质从溶液中析出的现象称为沉淀。常用的沉淀方法①盐析法；②有机溶剂沉淀法；③某些酸类沉淀法；④重金属盐沉淀法。1、盐析向蛋白质溶液中加入一定浓度的中性盐（硫酸铵、硫酸钠和氯化钠等），可破坏蛋白质表面的水化膜并中和电荷，从而使蛋白质从溶液中析出的现象称为盐析。作用机制:

中和电荷的同时破坏水化膜;常用的中性盐：硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等。盐析时，pH在蛋白质的等电点处效果最好。盐析沉淀蛋白质通常不会引起蛋白质的变性，用于蛋白质的分离。蛋白质颗粒的表面电荷和水化膜+++++++带正电荷的蛋白质－－－－－－－－带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质++++++++带正电荷的蛋白质－－－－－－－－带负电荷的蛋白质不稳定的蛋白质颗粒酸碱酸碱脱水作用脱水作用脱水作用沉淀2、有机溶剂沉淀法用有机溶剂：酒精、甲醇、丙酮，破坏蛋白质表面的水化膜。3、某些酸类沉淀法黄酰水杨酸、三氯醋酸、浓硝酸、苦味酸、磷钨酸、鞣酸等，与蛋白质的正离子结合成不溶性的盐而沉淀。此法应调整pH小于该蛋白质的等电点。往往引起蛋白质的变性。应用：临床上可用这些酸类检查尿蛋白等。4、重金属盐沉淀法此法常引起蛋白质变性。应用：抢救重金属中毒的病人。（四）蛋白质的变性1、概念：在某些物理或化学因素作用下，蛋白质空间结构破坏，导致理化性质改变和生物活性降低以致丧失的现象称为蛋白质的变性作用①物理因素：高温、高压、紫外线、X射线、超声破及强烈震荡等。②化学因素：强酸、强碱、重金属盐、有机溶剂等。2、引起变性的因素变性的本质：破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。蛋白质变性后的性质改变：溶解度降低、粘度增加、结晶能力消失、生物活性丧失及易受蛋白酶水解。复性：若蛋白质变性程度较轻，去除变性因素后，蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能，称为复性。变性的蛋白质易于沉淀，有时蛋白质发生沉淀，但并不变性。蛋白质的凝固作用：蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚固的凝块，此凝块不易再溶于强酸和强碱中。（五）紫外吸收和呈色反应紫外吸收：酪氨酸和色氨酸对紫外线有吸收作用。最大吸收峰在280nm波长处，利用此特性，可测定蛋白质的含量。呈色反应：

①双缩脲反应：在碱性溶液中与铜离子作用生成紫红色络合物。②与酚试剂反应生成蓝色化合物。③在酸性溶液中可与染料“考马斯亮蓝”产生颜色反应，由棕红色变为蓝色。二、蛋白质的分类（一）按分子形状分类1、球状蛋白分子形状接近球状或椭圆状，分子的长短轴之比小于10，多为可溶性蛋白。2、纤维状蛋白分子形状类似细棒或纤维状，分子的长短轴之比大于10，一般不溶于水，多为结构蛋白，主要起支撑和保护作用，更新较慢。（二）按组成分类1、单纯蛋白质：其水解产物仅为氨基酸，没有其他产物。2、结合蛋白质：由蛋白质与非蛋白部分组成。⑴核蛋白：辅基为核酸。⑵糖蛋白：辅基为糖类，如唾液中的黏蛋白就是由粘蛋白就是由粘多糖和蛋白质组成。⑶脂蛋白：辅基为脂类，是各种生物膜的主要成分，如血浆脂蛋白，与脂类的消化、吸收和动员利用有关。（三）按溶解度分类可溶性蛋白质、醇溶性蛋白质、不溶性蛋白质（四）按功能分类酶蛋白（生物催化剂）调节蛋白（代谢调节—激素）运输蛋白结构蛋白受体（参与细胞间信息传递）防御蛋白（免疫保护）第四节核酸的化学目的与要求：掌握：①核酸的分子组成；②核酸的分子结构。了解：①某些重要的核苷酸。重点与难点重点：化学组成；两类核酸分子组成异同；核酸的一级结构及其主要化学键；

DNA右手双螺旋结构要点及碱基配对规律；

mRNA、tRNA的结构特点；难点：DNA的空间结构

核酸：是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子，携带和传递遗传信息。分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两类。一、核酸的分子组成碱基：戊糖：磷酸：嘌呤碱、嘧啶碱核糖、脱氧核糖（一）核酸的基本成分

元素组成：C、H、O、N、P（9~10%）1、戊糖：

D-核糖(RNA)、D-2-脱氧核糖(DNA)。2、含氮碱嘌呤碱：腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）嘧啶碱：胞嘧啶（C）、尿嘧啶（U）、胸腺嘧啶（T）

DNA中的碱基（A、G、C、T），

RNA中的碱基（A、G、C、U）。（二）组成核酸的基本单位——核苷酸1、核苷：

含氮碱与戊糖通过糖苷键形成的化合物称为核苷。其中，戊糖的第一位碳原子分别于嘌呤碱的N-9和嘧啶碱的N-1相连接，形成核糖核苷或脱氧核糖核。2、核苷酸：

核苷中戊糖的C-5’上的羟基与磷酸通过磷酸酯键连接生成核苷酸，称为5’-核苷酸。组成RNA的核苷酸主要有：AMP、GMP、CMP、UMP

组成DNA的核苷酸主要有：dAMP、dGMP、dCMP、dTMP

5´-磷酸核苷酸的基本结构OO（N=A、G、C、U、T）HH(O)H1´2´N