基因工程答案

基因工程试题答案选择题有多选项，需要同学们自己确定对错，只有几道是多选。一、单项选择题(共计150题)因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是(c)A.KornbergW.GilbertP.BergB.McClintock第一个作为重组DNA载体的质粒是(c)pBR322ColElpSCl01pUCl8关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有(b)不太恰当。由作用于同一DNA序列的两种酶构成这一系统中的核酸酶都是II类限制性内切核酸酶这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统II型限制性内切核酸酶：(b)有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供限制性识别非甲基化的核苷酸序列有外切核酸酶和甲基化酶活性仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?(bde，c待定)限制酶是外切酶而不是内切酶(珀限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的(星活性怎么办？？？不确定)(①一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生黏末端一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端第一个被分离的II类酶是：(c)(a)EcoK (b)Hindlll (c)HindI(d)EcoB在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制哪一项最好：(b)(a)反应时间(3酶量(c)反应体积(d)酶反应的温度在下列试剂中，那一种可以螯合Ca2+离子?(d)(a)EDTA (b)柠檬酸钠 (c)SDS(d)EGTA在下列工具酶中，那一种可以被EGTA抑制活性?(d)(a)S1单链核酸酶(b)末端转移酶(c)碱性磷酸酶(d)Bal31核酸酶(钙离子依赖酶)限制性内切核酸酶可以特异性地识别：(b)(a)双链DNA的特定碱基对 (珀双链DNA的特定碱基序列(c)特定的三联密码 (d)以上都正确限制性核酸内切酶切割DNA后产生：a5'磷酸基和3'羟基基团的末端 BS磷酸基和3,磷酸基团的末端CS羟基和3羟基基团的末端 D.3'磷酸基和5羟基基团的末端E.以上都不是cDNA是指：a经逆转录合成的与RNA互补的单链DNA经逆转录合成的与DNA互补的单链RNA经逆转录合成的与DNA互补的DNA经转录合成的与DNA互补的RNA经转录合成的与DNA互补的DNA有关质粒的描述错误的是：e小型环状双链DNA小的只有2-3kb，大的可达数百kb能在宿主细胞能自主复制多数带有一些抗药性基因只有一个限制性核酸内切酶位点可识别并切割特异DNA序列的称：b非限制性核酸外切酶日.限制性核酸内切酶限制性核酸外切酶非限制性核酸内切酶DNA酶（DNase）对基因载体的描述，下列哪个不正确：都可以转入宿主细胞都有限制性核酸内切酶的识别位点都可以连接目的基因都是环状双链DNA分子都有筛选标志在已知某一序列信息的情况下，获取该目的基因最快捷的方法是：基因组文库法8.化学合成法cDNA文库法PCR法（需要有目的片段才行）序列测定在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指：建立多克隆抗体建立单克隆抗体有性繁殖DNA无性繁殖DNA£.构建重组DNA分子下列哪种方法不能作为表达载体导入真核宿主的方法：电穿孔B.磷酸钙转染C.脂质体转染D.氯化钙转染E.显微注射表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：A.酵母表达体系 B.原核表达体系 C.E.coli表达体系昆虫表达体系 E.哺乳类细胞表达体系

某一生物的基因组是指：该生物整套遗传信息 B.该生物可转录基因 C.该生物非转录部分D.该生物特定的遗传信息 E.该生物可表达的基因下列不是细菌基因转移与重组方式的是：E.转换接合 B.转化 C.转导 D.细胞融合(真核)E.转换Ti质粒：( )(a)可从农杆菌转到植物细胞中 (b)作为双链DNA被转移(c)在植物中导致肿瘤 (d)介导冠瘿碱的合成，作为细菌的营养物和植物的生长激素(e)需要细菌的vir基因帮助转移 (f)在植物细胞中作为染色体外质粒黏粒(cosmid)是一种人工建造的载体，()(a)它具有COS位点，因而可进行体外包装 (b)它具有质粒DNA的复制特性(。进入受体细胞后，可引起裂解反应 皿)进入受体细胞后，可引起溶源化反应有两种确定核酸中核苷酸序列的方法：化学序列分析法(Maxam-Glbert)和酶学序列分析法(Sanger)。酶学测序法的基本原理/优点是：()碱基与特殊染料间不同的相互作用一个合成引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止限制性位点与DNA末端标记的相关性可同时对DNA双螺旋的两条链进行测序反应是DNA特异的，RNA不会带来干扰。这样既减少纯化步骤，也节约了开支。关于cDNA的最正确的说法是：()同mRNA互补的单链DNA同mRNA互补的双链DNA以mRNA为模板合成的双链DNA以上都正确染色体DNA之所以可以被除去，是因为：()(b)染色体染色体DNA之所以可以被除去，是因为：()(b)染色体DNA分子量大，而不能释放(d)染色体未同蛋白质分开而沉淀(a)染色体DNA断成了碎片(6染色体变性后来不及复性DNA克隆是指：B.DNA的大量转录C.DNA的大量剪切E.RNAB.DNA的大量转录C.DNA的大量剪切E.RNA的剪接RNA的大量逆转录在基因工程实验中，DNA重组体是指：A.不同来源的两段DNA单链的复性8.目的基因与载体的连接物C.同来源的DNA分子的连接物 D.原核DNA与真核DNA的连接物两个不同的结构基因形成的连接物cDNA文库包含：A.一个生物全部遗传信息B.一个组织或细胞的全部遗传信息C.一个生物全部RNA信息D.一个组织或细胞的全部RNA信息E.一个生物体组织或细胞所表达的mRNA信息下列技术中用来鉴定DNA的技术是：Northern印记(这个是RNA印记)Southern印记Western印记(免疫常用，检测蛋白质)亲和层析免疫化学方法在基因工程操作中，转染是指：把重组质粒导入宿主细胞把DNA重组体导入真核细胞把DNA重组体导入原核细胞(转化)把外源DNA导入宿主细胞把重组的噬菌体或病毒导入宿主细胞大部分限制性内切酶识别的序列呈：长末端重复序列 8.短末端重复序列 C.共有序列回文结构 E.镜面对称理想的质粒载体具有的特点是：A.为线性单链DNA B.含有同一限制性内切酶的多个切口C.含有多种限制性内切酶的单一切口 D.其复制受宿主控制不含耐药基因由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为：A.接合 B.转染C.转导 。.转座(转座子特有的重组方式)E.转化在基因工程中：外源性基因和载体必须有互补的粘性末端限制性内切核酸酶只能将DNA双链切成平端外源性基因能自行整合到宿主DNA分子中去退火是指将DNA双链之间的氢键打开外源性基因往往插入质粒多酶切点以外的部位重组DNA技术领域常用的质BDNA是：A.病毒基因组DNA的一部分 B.细菌染色体外的独立遗传单位C.细菌染色体DNA的一部分 D.真核细胞染色体外的独立遗传单位E.真核细胞染色体DNA的一部分关于限制性核酸内切酶说法错误的是：A.它是一种核酸内切酶 B.识别DNA的特异序列C.切割位点序列一般呈回文结构 D.主要从细菌中获得E.专一性降解甲基化修饰的DNA(II型不能剪切甲基化)“克隆”某一目的DNA的过程不包括：A.重组DNA分子导入受体细胞B.外源基因与载体的拼接C.基因载体的选择与构建 D.筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞E.表达目的基因编码的蛋白质(下游工程，不在克隆范围内)下面关于用T4多核苷酸激酶标记5'端制备探针的描述中()是不正确的。(a)既能标记DNA，又能标记RNA (b)既能标记双链DNA又能标记单链DNA只能标记突出的5'端不能标记其他类型末端DNA或RNA必须有5'-OH的存在40.Southem印迹的DNA探针( )杂交。(a)只与完全相同的片段 (b)可与任何含有相同序列的DNA片段可与任何含有互补序列的DNA片段’.可与用某些限制性内切核酸酶切成的DNA片段 (e)以上都是41.用下列方法进行重组体的筛选，只有()说明外源基因进行了表达。(a)Southem印迹杂交 (b)Northem印迹杂交(c)Western印迹 (d)原位菌落杂交下列哪一个不是Southern印迹法的步骤?( )(a)用限制酶消化DNA (a)DNA与载体的连接(c)用凝胶电泳分离DNA片段 (d)DNA片段转移至硝酸纤维素膜上用一个标记的探针与膜杂交在利用lacZ失活的显色反应筛选法中，IPTG的作用是()(a)诱导宿主的a肽的合成 (b)诱导宿主的①肽的合成(c)作为酶的作用底物 (d)作为显色反应的指示剂切口移位是指在()作用下，使()带上放射性标记。(a)DNA聚合酶I，RNA(b)DNA聚合酶I,DNA(c)DNA聚合酶III,RNA (d)DNA聚合酶III,DNA筛选宿主细胞是否含有质粒载体最常用的方法是：A.PCR筛选B.标志补救C.抗药性筛选D.免疫化学方法E,分子生物学方法与重组体的筛选无关的是：A.抗药性标志选择 B,分子杂交法 C.酶免检测分析免疫化学法 E.克隆载体的改建在基团工程中常用的限制性内切酶的类型是：IB.IIC.IIID.IVE.V下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是：DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键DNA连接酶连接的是黏性末端两条链上链上的磷酸和脱氧核糖DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端治疗白化病、苯丙酮尿症等人类遗传病的根本途径是：A.口服化学药物 B.注射化学药物仁采用基因疗法替换致病基因 D.利用辐射或药物诱发致病基因突变基因工程生产胰岛素的主要原因是：A.X艺简单，容易操作 8.生产量大，价格较低C.所生产的胰岛素可以用于口服D,所生产的胰岛素疗效大大提高下列各项应用中不属于基因工程的是：A.转基因抗虫棉的培育成功 B.利用工程菌生产胰岛素将CJ植物叶绿体移入CJ植物体内使光合效率提高利用DNA探针检测饮用水有无病毒在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制哪一项最好：A.反应时间 B.酶量 C.反应体积 D.酶反应的温度限制性内切核酸酶的星号活性是指：a在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性活性大大提高C.切割速度大大加快D.识别序列与原来的完全不同末端转移酶是合成酶类：A.作用时不需要模板B.在Ca2+的存在下，可以在突出的3'末端延长DNA链仁在Ca2+的存在下，可以在隐蔽的3,末端延长DNA链D.上述说法有两种是正确的在基因工程中，可用碱性磷酸酶：A.防止DNA的自身环化B.同多核苷酸激酶一起进行DNA的5，末端标记制备突出的3，末端 D.上述说法都正确下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大:A.质粒 B.黏粒 C.酵母人工染色体（YAC） D,噬菌体用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为：染色体DNA断成了碎片 B.染色体DNA分子量大，而不能释放仁染色体变性后来不及复性 D.染色体未同蛋白质分开而沉淀Clark做了一个有趣的实验，发现TaqDNA聚合酶可以不需要模板，在双链DNA的末端加一个碱基，主要是加：dGTPB,dATPC.dCTPD.dTTP下面关于多克隆位点（multipleclonesite，MCS）的描述，不正确的是：A位于质粒载体中 B.具有多种酶的识别序列C.不同酶的识别序列可以有重叠 D.一般是人工合成后添加到载体中下列对黏性末端连接法的评价中，哪一项是不正确的：A,操作方便 B.易于回收片段易于定向重组 D,载体易于自身环化，降低重组率关于感受态细胞性质的描述，下面哪一种说法不正确：A,具有可诱导性 B.具有可转移性细菌生长的任何时期都可以出现D.不同细菌出现感受态的比例是不同的a-互补筛选属于下列哪种筛选方法：A.抗药性标志选择 B.标志补救 C.原位杂交法酶联免疫吸附E.分子杂交无性繁殖依赖DNA载体的最基本性质是：A.卡那霉素抗性 B.青霉素抗性 仁自我复制能力自我表达能力 E.自我转录能力应用a-互补筛选重组体时，含有外源基因的重组体菌落颜色应为：A.紫色 B.蓝色 仁白色（阻遏蛋白不能表达） D.无色 E.以上都不是不能用作克隆载体的DNA是：A.质粒DNAB.噬菌体DNA―细菌基因组DNA D.腺病毒DNA下列有关基因工程的应用中，对人类不利的是（）制造“工程菌”用于药品生产制造“超级菌”分解石油、农药仁重组DNA诱发受体细胞基因突变。,导入外源基因替换缺陷基因作为基因的运输工一运载体，必须具备的条件之一及理由是（ ）能够在宿主细胞中稳定的保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达具有某些标记基因，以便目的基因能够与其结合它的参与能够使目的基因在宿主细胞中复制并稳定保存基因工程中常见的载体是（）A.质体 B.染色体仁质粒 D.线粒体水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是（筛选标记）（）A.促使目的基因导入宿主细胞中 B.促使目的基因在宿主细胞中复制仁使目的基因容易被检测出来 D.使目的基因容易成功表达发生在同源序列间的重组称为：非位点特异的重组位点特异的重组仁基本重组。.人工重组随机重组在下述双链DNA序列（仅列出其中一条链序列）中不属于完全回文结构的是：A.GGAATTCC B.TGAATTCA C.AGAATTCTD.CGTTAAGC E.AGATATCT关于基因克隆的载体叙述错误的是：能在宿主细胞内自主复制 B.只有一个限制酶位点具有易于筛选的标记 D.大小合适 E.使用安全在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的是DNA：解链酶 B.聚合酶（核苷酸聚合） C.连接酶（连^NA片段） D.内切酶（切割） E.拓扑酶（顺空间堆积）所谓克隆是指：A.遗传学上相同的一群细胞 B.相同的DNA分子相同的个体D.同一拷贝的集合 E.赝品下列技术中用来鉴定RNA的技术是：A.Southern印记 B.Northern印记 C.标志补救抗药性标志选择 E.Western印记在工具酶中，连接目的基因和载体的酶是：A.DNA聚合酶I B.DNA聚合酶8 C.DNA聚合酶IIID.逆转录酶 E.DNA连接酶某限制性核酸内切酶按GGGVCGCCC方式切割产生的末端突出部分含：bA.l个核苷酸B.2个核苷酸C.3个核苷酸D.4个核苷酸E.5个核苷酸通过自动获取或人为地供给外源DNA使受体细胞获得新的遗传表型，称为：a&转化 B.转座C.接合 D.转导 E.转染某一限制性核酸内切酶识别的碱基数为6个，24kb的一段随机序列出现该酶切割位点的数目是：（不确定）A.4 B.6 C.8D7E.10重组DNA技术不能应用于：A.致病基因的发现 B.DNA序列分析 C,生物制药产前诊断 E.遗传病的易感性直接针对目的DNA进行筛选的方法是：cA.氨苄青霉素抗药性B.青霉素抗药性C.分子杂交D.分子筛E.电泳常用的真核表达体系是：cA.支原体B.大肠杆菌 C.酵母D.噬菌体 E.衣原体与重组体的筛选无关的是：（46题）A.抗药性标志选择 B,分子杂交法C.酶免检测分析免疫化学法 E.克隆载体的改建F因子从一个细胞转移至另一个细胞的基因转移过程称为：eA.转导 B.转化 C.转座 D.转染 £.接合科学家将一段控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来亨鸡胚胎细胞的DNA中，发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋，在第一只鸡蛋的蛋清中都含有大量的药物蛋白；而且这些鸡蛋孵出的鸡，仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋。以下描述不正确的是（ ）这些鸡是转基因工程的产物 B.这种变异属于可遗传的变异C.该过程运用了胚胎移植技术（自然卵胎生的鸡，无胚胎移植过程）D.该技术可定向改造生物科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并分泌人的抗体。相关叙述正确的是（）该技术将导致定向变异DNA连接酶把目的基因与运载体粘性末端的碱基对连接起来蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料受精卵是理想的受体该羊的产生要用到核移植技术该羊的产生要用到胚胎移植技术A.①②③④ B.③④⑥ C.②③④⑤ D.①③④⑥下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是 （ ）DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录一种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因胰蛋白酶能作用于离体的动物组织，使其分散成单个细胞治疗白化病、苯丙酮尿症等人类遗传疾病的根本途径是A.口服化学药物 B.注射化学药物C.利用辐射或药物诱发致病基因突变 D.采取基因疗法替换致病基因有关基因工程的成果及应用的说法不正确的是①用基因工程方法培育的抗虫植物和能抗病毒的植物②基因工程在畜牧业上应用的主要目的是培育体型巨大、品质优良的动物③任何一种假单抱杆菌都能分解四种石油成分，所以假单抱杆菌是超级菌④基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物A.①② B.③④ C.②③ D.②④下列关于限制酶的说法不正确的是（ ）限制酶广泛存在于各种生物中，尤其在微生物细胞中分布最多不同的限制酶识别不同的核苷酸序列限制酶能识别不同的核苷酸序列，体现了酶的专一性限制酶的作用只是用来提取目的基因在基因工程技术中，下列方法与目的基因获得无关的是（ ）A.辐射诱变法 B.散弹射击法 C.反转录法 D.人工合成法下列常用于原核表达体系的是：dA.酵母 B.昆虫 C.哺乳动物细胞 D.大肠杆菌 E.真菌某限制性内切核酸酶切割5L.GGGGGGVAATTCC...3序列后产生：A5突出末端 B.5,或3,突出末端 C.5'及3'突出末端D3突出末端 E.平末端聚合酶链反应（PCR）的每个循环需依次进行：A.合成，退火，变性 B.退火，合成，变性 C.退火，变性，合成D.变性，合成，退火 £.变性，退火，合成聚合酶链反应过程中需要的酶是：cA.限制性内切酶 B.DNA连接酶C.耐热DNA聚合酶D.反转录酶 E.DNA聚合酶I下列哪个序列在双链状态下属于完全回文结构：A.AGTCCTGA B.AGTCAGTC C.AGTCGACTD.GACTCTGA E.CTGAGATC由整合酶催化、在两个DNA序列的特异位点间发生的整合称：A.位点特异的重组B.同源重组C.随机重组D.基本重组£.人工重组质粒DNA导入细菌细胞的过程称为：A.转化B.转导 C.转染 D.感染 E.传染运用现代生物技术，将苏云金芽抱杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否成功，最方便的方法是检测棉花植株是否有：A.抗虫基因 B.抗虫基因产物C.新的细胞核 D.相应性状水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是：A.促使目的基因导入宿主细胞中 B.促使目的基因在宿主细胞中复制仁使目的基因容易被检测出来 。.使目的基因容易成功表达,运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白质，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，据以上信息，下列叙述正确的是：A.Bt基因的化学成分是蛋白质 B.Bt基因中有菜青虫的遗传物质仁转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因D.转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物,人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成，通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是：A.大肠杆菌 B.酵母菌 C.T4噬菌体 D.质粒DNA103.不是基因工程方法生产的药物是：A.干扰素B.白细胞介素 C.青霉素（青霉高产菌） D.乙肝疫苗104.基因工程的设计施工是在什么水平上进行的：A.细胞 B.细胞器 C.原子 D,分子下列有关连接反应的叙述，错误的是：A.连接反应的最佳温度为37°CB.连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C.连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD.连接酶通常应过量2-5倍下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中，错误的是：A.大肠杆菌一繁殖迅速 医枯草杆菌一分泌机制健全（膜系统不完整）C.链霉菌一遗传稳定 D.酵母菌一表达产物具有真核性考斯质粒（cosmid）是一种：A.天然质粒载体 8.由久-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体C.具有溶原性质的载体D,能在受体细胞内复制并包装的载体某一重组DNA（6.2kb）的载体部分有两个SmaI酶切位点。用SmaI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的SmaI酶切位点共有：A.4个B.3个 C.2个 D.至少2个在已知某一序列信息的情况下，获取该目的基因最快捷的方法是：A.基因组文库法B.化学合成法C.cDNA文库法D.PCR法E.序列测定表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：A.酵母表达体系 B.原核表达体系C.E.coli表达体系D.昆虫表达体系 E.哺乳类细胞表达体系筛选宿主细胞是否含有质粒载体最常用的方法是：A.PCR筛选B.标志补救C.抗药性筛选D.免疫化学方法E.分子生物学方法科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶蛋白。以下有关该基因工程的叙述错误的是（ ）入.采用反转录的方法得到的目的基因有内含子基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞用同一种限制酶处理质粒和含有目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子TOC\o"1-5"\h\zmRNA上的终止密码子不编码氨基酸，与之相对应的DNA片段位于 （）A.编码区下游的非编码区中 8.基因编码区内C.基因的最末端 D.基因编码区最末端的内含子中不是基因工程方法生产的药物是 （）A.干扰素 B.白细胞介素 C.青霉素 D.乙肝疫苗基因工程的设计施工是在什么水平上进行的 （）A.细胞 B.细胞器 C.原子 。.分子碱基互补配对发生在下列哪些生理过程或生物技术中： （ ）①种子的萌发②病毒的增殖过程③细菌的二分裂过程④目的基因与运载体的结合⑤DNA探针的使用⑥分泌蛋白的加工和运输A.①②③④⑤ B.①②③④⑤⑥ C.②④⑤ D.②③⑤⑥人胰岛细胞能产生胰岛素，但不能产生血红蛋白，据此推测胰岛细胞中（ ）只有胰岛素基因比人受精卵的基因要少既有胰岛素基因，也有血红蛋白基因和其他基因有胰岛素基因和其他基因，但没有血红蛋白基因在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是A.限制酶和连接酶 B.限制酶和水解酶C.限制酶和运载体 D.连接酶和运载体（）基因工程操作的三大基本元件是:（I供体II受体III载体IV抗体V配体）I+II+IIII+III+IVII+III+IVII+IV+VIII+IV+V（）基因工程的单元操作顺序是A.增，转，检，切，接B.切，接，转，增，检C.接，转，增，检，切D.检，切，接，增，转E.切，接，增，转，检121.（）生物工程的上游技术是基因工程及分离工程基因工程及发酵工程基因工程及酶工程基因工程及细胞工程基因工程及蛋白质工程()下列对逆转录酶描述正确的是：A.依赖于RNA的DNA聚合酶或称为RNA指导的DNA聚合酶B.依赖于cDNA的DNA聚合酶或称为cDNA指导的DNA聚合酶C.依赖于DNA的DNA聚合酶或称为DNA指导的DNA聚合酶D,依赖于RNA的RNA聚合酶或称为rNA指导的RNA聚合酶()下列对限制性内切酶描述正确的是限制性内切酶可识别任一的DNA序列使用限制性内切酶时，有时可出现星活性限制性内切酶可识别碱基数不超过5个限制性内切酶切割碱基序列产生都是黏性末端()T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是A.2'-OH和5'-PB.2'-OH和3'-PC.3'-OH和2'-PD.3'-OH和5'-PE.5'-OH和3'-P()下列有关连接反应的叙述，错误的是连接反应的最佳温度为12—16°C(正确的？？？不确定，最话16.C)连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mM连接酶通常应过量2-5倍DTT在反应中可加也可不加()下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大？质粒黏粒酵母人工染色体(YAC)X噬菌体()载体的功能是(I运送外源基因高效进入受体细胞II为外源基因提供复制能力III为外源基因提供整合能力)II+III+IIIII+IIIE.I+II+III()考斯质粒(cosmid)是一种天然质粒载体中入-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体能裂解受体细胞的烈性载体

具有溶原性质的载体能在受体细胞内复制并包装的载体()下列有关基因的描述，错误的是蛋白质是基因表达唯一的产物基因是DNA链上具有编码功能的片段基因也可以是RNA基因突变不一定导致其表达产物改变结构()关于cDNA的最正确的提法是：A.同mRNA互补的单的DNAC..以mRNA为模板合成的双链DNAB.同mRNA互补的双链DNAD.以上都正确的载体部分有两个SmaI酶切位点。用SmaI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的SmaI酶切位点共有\o"CurrentDocument"54\o"CurrentDocument"32(A.C.B.同mRNA互补的双链DNAD.以上都正确的载体部分有两个SmaI酶切位点。用SmaI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的SmaI酶切位点共有\o"CurrentDocument"54\o"CurrentDocument"32(A.C.\o"CurrentDocument"(个个个个)限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是修复自身的遗传缺陷强化自身的核酸代谢)生物工程的下游技术是B,促进自身的基因重组D.提高自身的防御能力A.基因工程及分离工程C.134.(B.蛋白质工程及发酵工程D.分离工程及蛋白质工程内切酶II连接酶III末端转移酶IV聚合酶135.(136.(基因工程及蛋白质工程)基因工程操作常用的酶是:(IA.I+IIB.I+III+IVC.II+III+IVD.I+II+IV+III)限制性内切核酸酶的星活性是指：在非常规条件下，识别和切割序列也不发生变化的活性。活性大大提高切割速度大大加快识别序列与原来的完全不同)下列五个DNA片段中含有回文结构的是A.GAAACTGCTTTGAC B.GAAACTGGAAACTGGAAACTGGTCAAAG D.GAAACTGCAGTTTC()关于cDNA的不正确的提法是：同mRNA互补的单链RNA同mRNA互补的含有内含子的DNA仁以mRNA为模板合成的双链RNAD.以上都不正确()下列有关连接反应的叙述，错误的是连接反应的最佳温度为37°C连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mM连接酶通常应过量2-5倍139.()T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是A.2'-OH和5'-P B.2'-OH和3'-PC.3'-OH和5'-P D.5'-OH和3'-P()载体的功能是外源基因进入受体的搭载工具 不能为外源基因提供整合能力不能提供复制能力不能为外源基因提供表达能力()黏性末端连接法，不仅操作方便，而且A.产生新切点 B.易于回收外源片段 C.载体不易环化D.影响外源基因的表达()下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大？A.质粒 B.黏粒 C.酵母人工染色体(YAC) D.X噬菌体()考斯质粒(cosmid)是一种容量最大一种载体由入-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体是一种单链DNA环状载体不能在受体细胞内复制，但可以表达()某一重组DNA的载体部分有两个BamHI酶切位点。用BamHI酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻合，该重组分子插入片段上的BamHI酶切位点共有A.4个 B.3个 C.1个 D.2个()下列哪一种酶作用时需要引物？A.限制酶 B.末端转移酶 C.反转录酶 D.DNA连接酶146.用下列方法进行重组体的筛选，只有()说明外源基因进行了表达。(a)Southem印迹杂交 (b)Northem印迹杂交(c)Western印迹_ (d)原位菌落杂交质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A.①③⑤⑦ B.②④⑥ C.①③⑥⑦ D.②③⑥⑦下列含有内含子的生物是A.大肠杆菌 B.青霉(真菌) C.放线菌 D.蓝藻基因工程的设计施工是在什么水平上进行的A.细胞 B.细胞器 C.分子 D.原子细胞内合成RNA聚合酶的场所是A.细胞核 B.核区 C.核糖体 D.内质网二、名词解释题基因工程结合工程学手段和分子遗传学理论，在分子水平上提取（或合成）生物的遗传物质（基因），在体外切割，再和一定的载体拼接重组，然后把重组的DNA分子引入细胞或生物体内，使这种外源DNA（基因）在受体细胞中进行复制与表达，按人们的需要繁殖扩增基因或生产不同的产物或定向地创造生物的新性状。增强子能够增强基因转录效率的调控序列，可远距离作用于同一条DNA^的启动子，位于相邻启动子的上游或下游都能起作用。包涵体某些细菌因受病毒感染，致使胞内蛋白质变性，光镜下可见着色不同的斑块，一般呈圆形或椭圆形。基因 生命体能够表达蛋白质的RNA或DNA序列，是决定遗传性状的功能单位。受体细胞基因工程技术中被选定作为重组DNA载体的容纳对象，承担目的基因能够有效表达的细胞。无义突变由于碱基对的取代，使原来可以翻译某种氨基酸的密码子变成了终止密码子的突变。载体基因载体是一类能自我复制的DNA分子，其中的一段DNA被切除而不影响其复制，可用以置换或插入外源（目的）DNAW将目的DNA带入宿主细胞。转化重组质粒DNA分子通过与膜蛋白结合进入受体细胞，并在受体细胞稳定维持和表达过程。（广义概念：细胞通过捕获环境中游离的DNA分子，并使其成为自身基因表达系统一部分的过程）质粒不兼容性同种或者两种亲缘关系相近的不同质粒，不能够在同一个寄主细胞系中稳定地共存的现象。载体（标明英文名）Vector（GeneVectorOrGeneDelivery），基因载体是一类能自我复制的DNA分子，其中的一段DNA被切除而不影响其复制，可用以置换或插入外源（目的）DNA而将目的DNA带入宿主细胞。11.S-D序列原核生物起始密码上游7〜12nt（即8-13个碱基）处存在一段能与核糖体16srRNA配对的富嘌吟序列，称为S-D序列。12.MCS（标明中文名）多克隆位点，是包含多个限制性酶切位点（restrictionsite）的一段很短的DNA序列。13.Star活性某些限制性内切核酸酶在特定反应条件下，可能会改变原有的识别位点而切割核酸，这种现象称为星活性。同裂酶即不同来源但具有相同识别序列的限制性核酸内切酶，切割的位点可以相同，也可以不相同。同尾酶来源不同，识别序列也不同，但切割DNA分子所得到的DNA片段具有相同的黏性末端，这样一组限制性核酸内切酶称为同尾酶。三、填空题质粒分离纯化后，经琼脂糖电泳后常有三条带，它们分别为闭环超螺旋、开环超螺旋线性超螺旋。在1990年医生对一位因缺乏腺苷脱氨酶基因而患先天性体液免疫缺陷病的美国女孩进行治疗。采用的方法是首先将患者的白细胞取出作体外培养，然后用某种病毒将正常腺苷脱氨酶基因转入人工培养的白细胞中，再将这些转基因白细胞回输到患者的体内，经过多次治疗，患者的免疫功能趋于正常。（1） 该病治疗运用了基因工程技术，在这个实例中运载体是（病毒），目的基因是（腺苷脱氨酶基因），目的基因的受体细胞是（患者白细胞）。（2） 将转基因白细胞多次回输到患者体内后，免疫能力趋于正常是由于产生了（腺苷脱氨酶），产生这种物质的两个基本步骤是（转录）和（翻译）。（3） 人的腺苷脱氨酶基因与胰岛素基因相比，其主要差别是（选择性表达的细胞不同）；（4） 该病的治疗方法属于基因工程运用中的（基因疗法（基因治疗））；这种治疗方法的原理是（把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞内从而达到治疗的目的）。理想的质粒克隆载体应具备以下基本条件如能自主复制、一种或多种限制酶的酶切位点、筛选标记、分子量小，易拷贝。基因工程操作的一般步骤为将目的基因进行：（剪切修饰）、与（载体）结合、（导入受体细胞）、（扩增）和（阳性筛选）。第一个分离的限制性内切核酸酶是EcoK；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_EcoRI。质粒分离纯化后，经琼脂糖电泳后常有三条带，它们分别为超螺旋、开环双螺旋、线状双螺旋。DNA聚合酶I的Klenow大片段是用枯草杆菌蛋白酶（或木瓜蛋白酶）切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：（1）5'-3'合成酶的活性;（2）3'-外切核酸酶的活性。限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自属名的第一个字母），第二、三两个字母取自（种名的前两个字母），第四个字母则用（株名）表示。干扰素是治疗癌症的重要物质，人血液中每升只能提取0.05mg干扰素，因而其价格昂贵，平民百姓用不起。但美国有一家公司用遗传工程方法合成了价格低廉、药性一样的干扰素，其具体做法是：（1） 从人的淋巴细胞中提取能指导干扰素合成的（干扰素基因），并使之与一种叫质粒的DNA结合，然后移植到酵母菌内，从而让酵母来（合成干扰素）。（2） 酵母菌能用（出芽生殖）方式繁殖，速度很快，所以能在较短的时间内大量生产干扰素）。利用这种方法不仅产量高，并且成本较低。（3） 科学家陈炬在这方向也作出了突出贡献，他成功地把人的干扰素基因嫁接到了烟草的DNA分子上，其物质基础是（脱氧核苷酸）和结构基础是（双螺旋结构）。（4）烟草具有了抗病毒能力，这表明烟草体内产生了（干扰素），由此可见，烟草和人体合成蛋白质的方式是（相同的），从进化的角度来考虑，证明了人和植物的起源俎同的）。黏粒（cosmid）是质粒一噬菌体杂合载体，它的复制子来自_质粒、COS位点序列来自刀噬菌体DNA的cos序列，最大的克隆片段达到45kb。基因工程就是按照（人为意愿），把一种生物的某种基因提取出来，并加以（修饰）和（改造），然后放到另一种生物的细胞里，（定向）地改造生物的（遗传性状）。点突变的基因系列在碱基替换中，若为一个嘌吟换成另一个嘌吟或一个嘧啶换成另一个嘧啶者称（转换），若一个嘌吟换成一个嘧啶或一个嘧啶换成一个嘌吟者称（颠换）。基因表达的四大表达系统分别为（大肠杆菌）、（酵母菌）、（哺乳动物细胞）、（昆虫细胞）。一个带有质粒的细菌在有LB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测不出质粒，这种现象叫质粒消除。将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个基因组DNA点隆，各种此类质粒的集合体称之为构建了一个基因组DNA文库。四、简答题（共15题）某地发生一种传染病，临床以非典型肺炎作为诊断，但其病原体未明确，已有少量病例死亡，试问如果由你负责，来研究探索其病原体，你准备如何进行研究。答：（提示）可以进行病原分离并测序基因组序列，通过与数据库序列比对。PCR的基本原理是什么?用PCR扩增某一基因，必须预先得到什么样的信息、？（1） DNA半保留复制的原理，在体外进行DNA的变性、复性和引物延伸。（2） 至少要预先知道足够合成一时引物的靶DNA序列.质粒单酶切点的基因连接如何降低本底和防止自我环化和提高连接效率?目的基因片断与载体由相同的单-限制性核酸内切酶（如EcoRD消化酶切后，两者的两端均具有相同的粘性末端，称为单酶切点的粘性末端，又称全同源性粘性末端⑴高背景载体经单一限制性核酸内切酶切割后，载体分子易于自我环化，既不利于目的基因的重组连接，大大降低阳性克隆效率，又可使非重组性载体造成高背景。为了防止载体的自我环化，通常用碱性嶙酸酶去除载体粘性末端的5」P以抑制DNA的自我坏化.在连接反应中，具有一5，-P,的目的基因DNA片断M有效地5去僻酸•化质粒DNA载体通过粘挂末端发生互补连接，尽管产生的重组DXA分子于连接点含有两个缺U的开环分子，尽管在转化时其转化效率高于线性低于闭和坏，但转化大胸杵菌后，在菌体内其缺口可获得修复.如第一章图2-6⑵双向插入经单--限制核晦内切酶（如EcoRD切割的目的基因和载体，因二者的粘性末端是相同的，因此在连接反应中，目的基因呻发生双向插入，载体对目的基因表达是有方向的，而目的基因可'双向与之相连，这肿连接若以克隆目的基因片段为目的没有影响，若以表达为目的，我们就要对插入的片段进行方向鉴定，因目的基因由起始密码子向终止密码子方向表达是定向转录的，--日一启动子与目的基因编码顺序方向相反就不能正确转录目的基因的mRNA.若柄建表达DNA里组体选用双两切切割目的基因和载体，可便目的基因。载体的连接发生定向连接重组，以便定向克隆。如何以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因，并使之在大肠杆菌中进行表达?简要说明实验中可能遇到的问题及可能的解决办法。5.什么是Klenow酶?有哪些活性?在基因工程中有什么作用?Klenow酶是1974年Klenow用枯草杆菌蛋白酶水解DNA聚合酶I,得到两个片段，其中大片段的分「量为75kDa,它具有5'-3‘聚合酶和3'-5'外切核酸酶的活性，小片段具有5'-3'外切核酸酶活性。由于大片段失去了DNA聚合酶I中会降解5’引物的5'-3,外切核酸酶的活性，所以在基因工程中更有用。Klenow酶主要有下列用途：修复反应，制备平末端可用Klenow酶修复限制性内切核酸酶或其他方法产生的5'或3,突出末端，制备平末端，这样可以使原来具有不相容的黏性末端的DN***段通过平末端重组。如在反应系统中加入放射性同位素标记的脱氧核昔酸，用这种末端填补的方法可以制备于末端标记的探针，用Klenow酶修复宁突出末端的反应主要是利用了Klenow酶的DNA聚合酶活性，是填补反应；而修复3'突出末端则是用Klenow酶的3'-5‘外切核酸酶的活性，是切割反应。用Klenow酶的切割反应来修复3'突出末端是不理想的，改用T4DNA聚合酶或其他的酶是更好的选择。标记DNA3】突出末端(protrudingend)该反应分两步进行：先用3'-5,的外切核酸酶活性除去于突出末端，产生于隐含末端，然后在高浓度的标记底物(-32p-dNTP)存在下，使降解(外5‘)作用与聚合(5'-3')作用达到平衡。这种反应也叫交换或取代反应(exchange/replacementreaction)o不过这一反应用T4DNA聚合酶的效果更好，因它的3'-5‘外切核酸酶活性较强。其他的一些用途：包