实验七 植物总RNA的提取_第1页
实验七 植物总RNA的提取_第2页
实验七 植物总RNA的提取_第3页
实验七 植物总RNA的提取_第4页
实验七 植物总RNA的提取_第5页
已阅读5页，还剩7页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验七植物总RNA的提取

一、实验目的

1.

总RNA提取的原理

2.通过本实验学习用试剂盒从动物鱼肝脏组织中提取总RNA的方法。

二、实验原理RNA是一类极易降解的分子。要获得完整的RNA必须在提取过程最大限度地抑制内源性及外源性RNA酶对RNA的降解作用。通过高强度的变性剂使RNA酶失活，使RNA从细胞中释放出来时不被降解。细胞裂解后，通过氯仿除去蛋白质和细胞碎片等杂质，从而得到纯化的总RNA。三、实验仪器、材料与试剂

仪器1.200℃以上烘箱2.低温离心机3.恒温水浴锅4.微量移液器材料1.新鲜动物组织2.氯仿3.异丙醇4.乙醇5.焦碳酸二乙酯（DEPC）6.EP管等（50ml离心管）7.陶瓷研钵、研棒8.一次性手套、（剪刀）等试剂Trizol试剂四、实验步骤称取100mg动物肝脏（1g新鲜植物材料），液氮研磨成粉末移入1.5mLEP管（50ml离心管）中。加入1mL

Trizol

（10mlTrizol）试剂，充分混匀。样品体积不能超过Trizol体积的1/10。室温（15-30℃）放置5min

（4℃离心，12000g，10min；上清移入新管；18℃放置5min以使核酸复合物分开）。4.加入200μl

（2ml）氯仿，迅速摇动15秒以混匀。15-30℃放置2-3min。4℃（2-8℃

）离心，12000g，15min(10min)。上清移入新管。加入0.5mL（1倍体积）异丙醇，15-30℃

（18℃）放置10min。4℃（2-8℃

）离心，12000g，10min。至少1mL75%酒精洗涤沉淀1次：2-8℃，7500g，5min。简单空气干燥一下，约5-10minRNA溶于10-15μLDEPC

水中：Tip吹吸数

人人文库> 全部分类> 专业文献 > 医学资料

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论