光谱分析技术-紫外可见分光光度计使用（药检仪器课件）

朗伯比尔定律朗伯比尔定律学习目标光的吸收程度与浓度厚度关系朗伯比尔定律A=-lgT=Kcl朗伯比尔定律A=-lgT=Kcl吸光度朗伯比尔定律A=-lgT=Kcl透光率朗伯比尔定律A=-lgT=Kcl吸收系数朗伯比尔定律A=-lgT=Kcl溶液浓度朗伯比尔定律A=-lgT=Kcl液层厚度图片来源于网络布格

PierreBouguer朗伯JohannHeinrichLambert比尔AugustBeer吸收系数A=KclK=A/cl吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸光度吸收系数摩尔吸收系数ε在一定λ下c=1mol/Ll=1cm吸光度K=A/cl吸收系数在一定λ下c=1g/100mll=1cm吸光度百分吸收系数比吸收系数K=A/cl=f（λ，溶剂，温度，组分性质）吸收系数=f（λ，溶剂，温度，组分性质）吸收系数↑吸收系数物质对光吸收能力↑定量测定灵敏度↑↑吸收系数λ1λ2λ3E1E3E2物质对光吸收能力↑定量测定灵敏度↑A=Kclc=A/Kl单色光λ1A1λ2A2λ3A3稀溶液朗伯比尔定律1本讲小结成立前提2A=Kcl常用百分吸收系数选择λmax测定A入射光是单色光

溶液是稀溶液思考题卡比马唑供试品含量测定：取供试品溶液，照紫外-可见分光光度法检测波长：在292nmA=0.448C7H10N2O2S的吸收系数（）=557计算供试品溶液浓度谢谢观看吸收系数紫外可见分光光度法基本原理与概念硫酸铜溶液高锰酸钾溶液物质对光的吸收原理学习目标紫外可见分光光度法基本原理与概念光的吸收光的吸收重铬酸钾溶液三氯化铁溶液化合物对紫外可见光吸收图片来源于网络化合物对紫外可见光吸收π→π*n→σ*n→π*σπnσ*π*σ→σ*化合物对紫外可见光吸收π→π*n→σ*n→π*σπnσ*π*饱和烃类σ→σ*150nm化合物对紫外可见光吸收π→π*n→σ*n→π*σπnσ*π*不饱和键共轭结构未成对电子基本概念1：吸收峰2：谷3：肩峰4：末端吸收吸收光谱图不同浓度高锰酸钾溶液紫外吸收曲线基本概念①5mg/ml②10mg/ml③15mg/ml④20mg/ml⑤25mg/ml⑥30mg/ml⑦35mg/ml⑧40mg/ml④①③⑥⑤⑧⑦②不同浓度高锰酸钾溶液紫外吸收曲线基本概念不同浓度高锰酸钾溶液紫外吸收曲线基本概念基本概念吸收光谱图定性定量氟胞嘧啶片【鉴别】供试品溶液λmax=286nmλmin=245nm【含量测定】取供试品与对照品溶液λ=286nm测定A计算其含量紫外吸收原理1不饱和共轭结构本讲小结紫外基本概念2吸收曲线最大/最小吸收波长思考题谢谢观看紫外可见分光光度计操作规范紫外可见分光光度法灵敏度高准确度高操作简单重现性好紫外可见分光光度计规范操作学习目标吸收池使用1本讲小结操作要点2润洗比色皿3次仪器预热稳定后使用正确选择光谱、光度值功能清洁无污染手拿粗糙面液体高度4/5无气泡配对使用清洁无污染粗糙面液体4/5高度

不得有气泡思考题影响测定结果的不规范操作谢谢观看国家药品质量标准紫外可见分光光度计组成比尔AugustBeer朗伯比尔定律A=-lgT=Kcl1854年第一台比色计杜包斯克Duboscq奈斯勒Nessler美国国家标准局1918年第一台紫外可见分光光度计紫外可见分光光度计组成学习目标紫外可见分光光度计工作原理仪器组成光源单色器吸收池检测器数据处理及记录系统仪器组成-光源提供入射光发射连续光谱光强度足够稳定性好使用寿命长仪器组成-光源氘灯波长范围200-350nm钨灯波长范围350-1000nm仪器组成-单色器入射狭缝准直镜色散原件物镜出射狭缝光栅仪器组成-单色器入射狭缝准直镜色散原件物镜出射狭缝棱镜仪器组成-吸收池吸收池比色皿仪器组成-吸收池玻璃可见光区石英紫外+可见光区吸收池比色皿仪器组成-吸收池不同规格吸收池配对使用仪器组成-吸收池指纹、油污、沉积物清洗吸收池仪器组成-检测器光电池光电管光电倍增管：应用最广泛但价格较高仪器组成-检测器光电池光电管光电倍增管：应用最广泛但价格较高仪器组成-数据处理及记录系统工作原理扫描速度更快

杂散光低

重复性高

获得结果快速仪器组成1本讲小结重要组成部