6种植物诱导抗病剂组合对烟草花叶病的防控效果

6种植物诱导抗病剂组合对烟草花叶病的防控效果

浮育苗技术在烟草生产中的成功应用，不仅提高了烟草植物的科技含量，而且为一体化和产业化育苗奠定了坚实的基础。该项新技术自1999年被引进中国以来便在烟叶生产上广泛应用,目前已占据了烟草育苗技术的主导地位。剪叶是烟草漂浮育苗的核心技术,也是烟草花叶病毒病(简称TMV)传播的主要途径。目前烟草花叶病毒病已上升为威胁中国烟叶生产的一个主要病害。当前,烟叶生产上防控烟草花叶病最有效的方法是选择种植NC102、NC297、云烟201、云烟202和云烟203等抗病品种。然而,这些抗病品种仅适宜在小范围内种植,K326、红花大金元、云烟87等适应性广的烟草品种均不抗烟草花叶病,因此,寻求有效的防控方法已成为当务之急。目前,烟叶生产上防控烟草花叶病最常用的方法是培育无毒壮苗、施用毒消、病毒必克、菌克毒克(宁南霉素)等抗病毒制剂和采用农业保健栽培措施,但以上措施的综合应用不仅未解决TMV对烟叶生产造成的严重威胁,而且给烟农带来了沉重的经济负担。自20世纪初以来,人们发现不仅通过接种病原菌能诱导植物获得抗性(SystemicCcquiredResistance,SAR),而且通过菌根生物、植物提取物等其他生物和非生物(人工合成化学试剂)手段也能诱导植物获得抗性,从此诱导抗性便成为植物保护的一种新途径而备受人们关注。20世纪70年代以来,细胞工程、基因工程、酶工程和发酵工程等现代生物技术的兴起为开发生物农药创造了有利条件,青霉菌灭活菌丝体[17,18,19,20,21,22]和吲哚酮便是近年来研究人员发现的2种能诱导植物产生抗性的新型生物制剂,且在烟草上对诱导烟株产生抗病能力也得到了证实。目前,不同诱导抗病剂的组合应用对植物诱导抗病的效果研究尚未见报道。为此,笔者研究了6种不同植物诱导抗病剂的组合对烟草花叶病的防控效果,以期为烟草花叶病的有效防治提供理论依据。1材料和方法1.1材料表面1.1.1测试香烟烤烟栽培品种红花大金元,种子通过蒸馏水振荡浸泡3h,晾干待用。1.1.2主要试剂和病毒抑制剂共6种:多肽保(有机诱导剂,主要成分为青霉菌灭活菌丝体),为云南昆明保腾生化技术有限公司产品;0.5%几丁聚糖水剂[化学诱导剂,主要成分为(1,4)-2-氨基-2-脱氧-β-D-葡聚糖,分子量500～1500],为四川成都特普科技发展有限公司产品;1%吲哚酮水剂(化学诱导剂,主要成分为3-羟基-3丙酮基-羟吲哚酮,简称AHO),由中国科学院昆明植物研究所郝小江研究员提供;1.5%植病灵乳剂(病毒抑制剂),为山东泰星化学厂产品;黄腐酸(主要成分氮、磷、钾总量≥40%,其中钾≥20%,腐植酸、黄腐酸≥8%,微量元素6种≥1.5%),为云南容大生物化工有限公司产品;氨基酸(含作物生长所必需的多种氨基酸、钙、镁、硫、钼、硼、锌等微量营养元素,属于无污染、无毒害、无残留、不含激素的有机肥),为四川都江堰大发实业有限责任公司产品。1.2方法1.2.1聚糖的表面活性剂试验共设12个处理:WF1(多肽保+0.5%几丁聚糖水剂)、WF2(多肽保+1%AHO)、WF3(0.5%几丁聚糖+黄腐酸)、WF4(0.5%几丁聚糖+氨基酸)、WF5(1%AHO+黄腐酸)、WF6(1%AHO水剂+氨基酸)、WF7(1.5%植病灵+氨基酸)、WF8(1%AHO)、WF9(0.5%几丁聚糖水剂)、WF10(多肽保,喷施清水)、WF11(东旺毒消,对照1)、WF12(喷施等量清水,对照2)。苗期每个处理6盘,完全随机排列,为避免处理间相互交叉感染,处理间严格进行隔离,剪叶等农事操作也完全独立。大田期每个处理设3次重复,随机区组设计,每小区40株。1.2.2繁殖在带毒环境下自然发病。育苗环境和种植土壤带毒,常年TMV发病株率90%以上。1.2.3喷药与药剂多肽保:苗期用量为满足1hm2大田移栽面积的基质中一次性加入3.75kg,拌匀;大田期用量为1hm2大田面积9.0kg,于栽前一次性塘施,均匀分配给每株烟株。喷雾类药剂(含清水):0.5%几丁聚糖水剂、氨基酸兑水均为300倍,1.5%植病灵兑水均为800倍,1%AHO兑水1000倍,黄腐酸兑水500倍,东旺毒消兑水600倍。均采用苗期每次剪叶前喷施1次,最后一次剪叶后约7d喷施1次,至移栽26d后停止喷药,共计喷施7次。均为喷雾的组合类药剂按组合顺序分开喷施,间隔时间为2h。均匀喷洒整株叶片,喷施量应以叶面不滴药液为宜。1.2.4采集苗期和mtv疾病征象在移栽当天每个处理抽取22～24个样,共抽取330个样,全部采用植物病毒TAS-ELISA检测试剂盒进行检测。1.2.5调查时间及方法苗期从第2次剪叶开始调查病情,共调查3次。大田期于10月6日(第2次施药当天)开始调查病情,以后每隔7d调查1次,连续调查5次,最后又于12月3日调查了1次病情和农艺性状。烟草花叶病按照《烟草病虫害分级及调查方法GB23222-2008》进行病情分级、计算发病率和病情指数;烟株农艺性状按照《烟草农艺性状调查方法YC/T142.1998》进行调查。1.2.6剪叶的移栽除草7月23日播种,8月19日间苗定苗,8月27日剪叶第1次,9月6日剪叶第2次,9月13日剪叶第3次。9月24日当天移栽完毕(苗龄62d,移栽时剔除有TMV典型症状的显症烟苗),栽后25、33和40d各进行1次中耕除草。大田移栽规格为行株距1.2m×0.5m,纯氮用量为45kg/hm2,氮、磷、钾比例为1∶1∶3。1.2.7处理投诉方差分析采用DPS软件中的Duncan’新复极差测验。防控效果计算公式:防效(%)=(对照病指-处理病指)/对照病指×1002结果与分析2.1苗苗期毒率检测由表1可知,播种后49d内仅WF3处理烟苗发生TMV,WF4、WF6、WF7和WF8处理在移栽时才表现症状,其他7个处理未表现症状。苗期带毒率检测结果表明,所有处理均带毒,且带毒率高达83.3%以上,其中WF2和WF10处理烟苗带毒率相对较低。由此可见,在该育苗环境条件下,各处理的烟苗绝大多数已隐性带毒,只是部分烟苗无症状表现而已。2.2tmv的防效由表2、3可知,各处理对大田期烟株TMV的防控效果均以WF2处理最好,移栽后70d对以清水和东旺毒消为对照的烟株TMV的平均防效分别达到69.64%和43.25%;其次是WF1和WF10,均较东旺毒消的防控效果有一定优势。2.3tmv的处理由图1可知,所有处理均表现为移栽后19d以前TMV病株率呈迅速增加趋势,该期间TMV在植株间的传播速度最快;WF2烟株TMV病株率传播速度最慢,其次是WF1、WF10和WF11,这可能与苗期多数烟苗属于带毒隐症有关,同时也说明这几个处理的药剂对TMV具有较好的控制效果。苗期WF2烟株的阳性率在83.3%以上(表1),但到栽后70d病株率才达到55.3%,说明烟苗从带毒到表现症状需要一段时间,同时也说明在有效药剂的作用下,发病时间可得到最大限度的推迟。2.4织物和株高、腰叶宽对和株高的影响由表4可知,WF2单株叶数显著多于东旺毒消对照,未发病叶数和株高显著大于清水对照,而最大腰叶长、最大腰叶宽均与2个对照间差异不显著。由此可见,WF2不但对控制TMV有明显效果,且在株高、叶数方面表现出明显优势,叶片生长发育状况良好。3结论和讨论3.1烟株tmv的平均防效单独使用多肽保或AHO对TMV均有一定的控制效果,且2种药剂组合应用还具有较好的正向叠加效应,能明显推迟烟株TMV的发病时间,移栽后70d对以清水和东旺毒消为对照的大田期烟株TMV的平均防效分别达到69.64%和43.25%,且在株高、叶数方面表现出明显优势,叶片生长发育状况良好。多肽保与几丁聚糖搭配对控制TMV仅有一定的正向叠加效果,而与黄腐酸或氨基酸的搭配却降低了防效,具体原因尚待进一步研究。3.2烟苗携带tmv病毒对症状的影响在该试验条件下,成苗期所有处理的烟苗均检测出TM