API细菌鉴定系统

API微生物鉴定系统——全球金标准细菌鉴定的重要性- 疾病的评估- 找出食物变质的原因，从而制定预防的步骤- 确保用药治疗洽当- 环境控制-流行病学的基础常规鉴定所遇的困难- 分类学复杂及进化- 涉及很多生化项目- 工业微生物容易出现变异- 结果处理及计算麻烦所引用的分类学方法国际认可

-InternationalJournalofSystematicBacteriology

资料库＝整个系统的心脏API系统API系统美国FDA的细菌鉴定标准欧洲药典的细菌鉴定标准国标- 标准化，简易化- 在制造过程中，进行质控- FDA标准- 用户可用ATCC菌种进行质控- 系统化- 操作简易- 快速报告- 30多年的经验，拥有菌种资料＞25000，鉴定系统的发源生化测试＞750- ＞1500多篇使用文献API的优点API鉴定原理生理生化鉴定：根据微生物对各种生理条件（温度、pH、氧气、渗透压）、生化指标（唯一碳氮源、抗生素、酶、盐碱性）代谢反应进行分析，并将结果转化成软件可以识别的数据，进行聚类分析，与已知的参比菌株数据库进行比较，最终对未知菌进行鉴定的一种技术。API微生物鉴定系统以微生物生化理论为基础,借助微生物信息编码技术,为微生物检验提供了简易、方便、快捷、科学的鉴定程序。微生物鉴定完整的鉴定谱球菌杆菌接触酶革兰氏氧化酶

革兰氏杆菌球菌 庞大资料库15种试条>600种细菌可被鉴定研究用试条：

乳酸杆菌，芽胞菌，弯曲菌

API鉴定范围API试剂类别API20E/RapiD20E革兰氏阴性杆菌鉴定API20NE非发酵菌鉴定APISTAPH葡萄球菌及微球菌APISTREP链球菌鉴定API20CAUX酵母菌API20A厌氧菌APILISTERIA李斯特菌APICAMPY弯曲菌属APICORYNE棒状杆菌APICH芽胞杆菌/乳酸杆菌API系统- 构成: 试条由特別选择的生化反应小管

API试条有多种类 各有相应的数据库 所有生化结果以同时间一并阅读API套件API试剂盒及其配套试剂培养盒 保持潮湿环境石腊油(容量:125ml)

覆盖在指定小孔上悬浮液(容量:5ml)

用於调菌液附加试条 加进指定的生化孔内API试条 每个小孔载有风乾的底物PSIpettes接种管 挑菌落，混匀及接种安培架操作步骤1(API20E)分离单个菌落挑单个可疑菌落尽量避免使用高度选择性培养基调制菌液悬浮液(容量:5ml)操作步骤2(API20E)将菌液接种到小管或小管及小杯(CIT,VP和GEL)将试条放进培养盒内将5ml无菌水放进培养盒里利用石腊油覆盖指定的生化孔(有划线的孔)

ADH

ODC

H2S

URE把培养盖盖上操作步骤3(API20E)把试条放进孵育箱内，利用指定温度及时间

API20E:35-37oC，18-24小时按操作说明书规定，将附加试剂加进适当小孔内api20E试剂18-24小时後API试剂条24小时出结果阅读结果利用编码手册或APILABPLUS软件进出分析根据说明书上，或彩图的指示，记录结果於报告单上。全Windows操作界面，多种语言。API结果原理：- 生化结果组合跟资料库內的典型条目(Taxa)作出比较- 经计算後，鉴定百比率（%Id）＝机会率，指示出不同菌类的比较T值（Tindex）=指示出在同一个菌类的相似程度API结果跟据T值及%Id的组合，作出评语：(i) 极好的鉴定结果 %Id>99.9及T>0.75(ii) 很好的鉴定结果 %Id>99.0及T>0.50(iii) 好的鉴定结果

%Id>90.0及T>0.25(iv) 可以接受的鉴定结果

%Id>80.0及T>0(v) 可疑的生化谱

不断更新的数据库：-分类学的进化-新的菌种发现-生化反应的演进-鉴定菌种需要的改变API与日俱进定向试验- 在细菌学里最普遍的染色方法革兰氏染色液步骤G(

)G(

)-染色前，所有细胞是透明的-结晶紫着色後用碘增加染料与菌体结合-乙醇从G()菌体洗脱结晶紫-用番红液复染，革兰氏阴性菌呈粉红色，革兰氏阳性菌呈兰紫色革兰氏染色原理:检查细菌细胞壁的渗透性单层厚钛聚糖细胞壁不紧密外壁层(透乙醇)+

薄内壁层钛聚糖革兰氏阳性 革兰氏阴性

革兰氏染色液2(ColorGram2)-特性稳定化的碘液

PVP(聚氯乙烯吡咯烷酮)可以防止因碘挥发而变质，同时也增强了媒染效果。

更容易分别G()及G(-)菌高质量的结晶紫和番红，无沉淀。接触酶试验接触酶试验用于分辨葡萄球菌及链球菌葡萄球菌革兰氏阳性球菌链球菌接触酶接触酶-+接触酶H2O2H2O+O2接触酶试验传统方法:=接触酶(+)+=接触酶(+)+原理:不得用于血平板的菌落上(红血菌反应)试管法玻片法H2O2O2菌落接触酶显色剂玻片法试管法IDColorCatalase接触酶试剂容许於平板(包括血平板)上作直接检测组成:-增稠剂:高粘度集中所产生的气泡,防止试剂扩散-Evans兰:兰色使结果更容易阅读-玻片法-直接在平板上测试IDCOLORCATALASE接触酶试剂玻片