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文档简介

原生质体融合技术的研究进展主要内容概述一前景及展望四原生质体融合的步骤和方法二微生物原生质体融合的应用三一、概述原生质体：细胞内由原生质组成的各种结构统称为原生质体，包括细胞膜、细胞质(包括各种细胞器、细胞骨架系统及胞基质)和细胞核等部分,原生质体是由原生质特化而来。植物细胞即细胞壁内的原生质部分；动物细胞就是原生质体。一、概述原生质体融合(protoplastfusion)是20世纪70年代发展起来的基因重组技术。原生质体融合：也称细胞杂交、细胞融合或体细胞杂交，是指细胞通过介导和培养，在离体条件下用人工方法将不同种的细胞通过无性方式融合成一个核或多核的杂合细胞的过程。与常规杂交相比，原生质体融合具有的优势：杂交频率较高霉菌与放线菌的融合频率为10-3～10-1，细菌与酵母的融合频率亦达到10-3～10-6受接合型或致育性的限制较小任何一株都可能起受体或供体，有利于不同种属间微生物的杂交重组体种类较多遗传物质的传递更为完整可获得性状优良的重组体可提高育种效率可采用产量性状较高的菌株作为融合亲株不足之处：原生质体融合后DNA交换和重组随机发生，增加重组体分离筛选的难度。二、原生质体融合的步骤和方法原生质体融合步骤1、亲本及遗传标记的选择根据融合的目的选择适宜的直接亲本。现在一般认为亲本应采用具有较大遗传差异的近亲菌株，重组后的新个体具有更大的杂种优势。作为原生质体融合的二亲本都应该有一定的遗传标记，便于重组体的检出。常用的遗传标记有：带隐性性状的营养缺陷、抗性标记、热致死、孢子颜色和菌落形态等作为标记。实际应用时究竟采用哪各遗传标记，可以根据试验目的确定。2、原生质体制备制备流程原生质体制备的影响因素3、原生质体的再生原生质体再生的影响因素培养基稳定剂酶解浓度和时间再生方式原生

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