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文档简介
9.观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂在高等植物体内,有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的,因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体的存在状态,就可以判断这些细胞分别处于有丝分裂的哪个时期。染色体容易被碱性染料(如甲紫溶液,旧称龙胆紫溶液)着色。目的要求1.制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片。2.观察植物细胞有丝分裂的过程,认识有丝分裂的不同时期,比较细胞周期中不同时期的时间长短。3.绘制植物细胞有丝分裂简图。材料用具洋葱(可用葱、蒜代表)显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,剪刀,镊子,滴管。质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的甲紫溶液(将甲紫溶解在质量分数为2%的醋酸溶液中配制而成)或醋酸洋红液,质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精,洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片。方法步骤一、洋葱根尖的培养在上实验课之前的3~4d,取洋葱一个,放在广口瓶上。瓶内装满清水,让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方培养。待根长约5cm时,取生长健壮的根尖制成临时装片观察。二、装片的制作制片流程为:解离一漂洗一染色一制片。过程方法时间目的解离上午10时至下午2时(洋葱根尖分生区有较多的细胞处于分裂期,这会因洋葱品种、室温等的差异而有所不同),剪取洋葱根尖2~3mm,立即放入盛有盐酸和酒精混合液(1:1)的玻璃皿中,在室温下解离。3-5min用药液使组织中的细胞相互分离开来。漂洗待根尖软化后,用镊子取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗。约10min洗去药液,防止解离过度。染色把根尖放入盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的甲紫溶液(或醋酸洋红液)的玻璃皿中染色。3-5min甲紫溶液或醋酸洋红液能使染色体着色。制片用镊子将这段根尖取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子尖把根尖弄碎,盖上盖玻片。然后,用拇指轻轻地按压盖玻片。使细胞分散开来,有利于观察。三、洋葱根尖细胞有丝分裂的观察1.把制成的装片先放在低倍镜下观察,扫视整个装片,找到分生区细胞:细胞呈正方形,排列紧密。再换成高倍镜仔细观察,首先找出分裂中期的细胞,然后再找前期、后期和末期的细胞,注意观察各时期细胞内染色体形态和分布的特点。最后观察分裂间期的细胞。2.如果自制装片的效果不太理想,可以观察洋葱根尖有丝分裂固定装片。3.调节显微镜的放大倍数,使你能够在视野中同时看到约50个细胞,仔细统计视野中处于各时期的细胞数,记录在记录表“样本1”中。把视野移动到分生区一个新的区域再统计,然后记录在记录表“样本2”中。对数据进行整理,填入表中。细胞周期样本1样本2总数每一时期的细胞数/计数细胞的总数分裂间期分裂期前期中期后期末期计数细胞的总数四、绘图绘出植物细胞有丝分裂中期简图。五、有条件的学校可以观察马蛔虫受精卵的有丝分裂固定装片。结论根据观察结果,用自己的语言描述细胞周期各个时期的特点。间期:G1期(DNA合成前期):染色体蛋白质和DNA解旋酶的合成S期(DNA合成期):进行DNA的复制,DNA加倍。G2期(DNA合成后期):主要是细胞分裂期有关酶与纺锤丝蛋白质的合成。前期:核膜、核仁消失;染色质螺旋缠绕,缩短变粗成为染色体。每条染色体包括两条并列的姐妹染色单体,两条染色单体由同一个着丝点连接。从细胞两级发出纺锤丝,形成一个梭形的纺锤体;染色体排列无序。中期:每条染色体的着丝点都排列在赤道板上;染色体的形态比较稳定数目比较清晰,且排列有序,便于观察。后期:着丝点一分为二,姐妹染色单体分开,成为两条子染色体。并分别向两极移动;染色单体消失,染色体数目加倍(细胞两极各有一套染色体,形态、数目完全相同,与亲代染色体也相同。)末期:核膜、核仁重现,形成两个新的细胞核;染色体变成染色质,纺锤体消失;在赤道板位置出现细胞板,并逐渐扩展,形成新的细胞壁。讨论:1.在你的观察结果中,处于哪一时期的细胞最多?为什么?提示:处于分裂间期的细胞最多,因为细胞周期的大部分时间处于分裂间期。2.如何比较细胞周期中不同时期的时间长短?你可以数一数视野中5个不同时期的细胞数目。统计全班的结果,求每个时期细胞数目的平均值。(提示:洋葱根尖细胞染色体数目为8对,一个细胞周期大约需要12h。)提示:某时期的细胞数占计数细胞总数的比例越大,该时期的细胞时间越长。3.取材时为什么只能剪2mm~3mm,而不能过长?提示:若剪得过长会包括伸长区,伸长区不进行细胞分裂,增加了寻找观察细胞的难度。4.解离洋葱根尖时,时间过长或过短对实验的影响有哪些?提示:解离时间过短,细胞不易分离开;解离时间过长,根尖细胞会遭到破坏,无法进行染色和制片。5.实验操作中漂洗和染色的顺序能不能互换?并说明原因。提示:不能,漂洗的目的是洗去根尖组织细胞中的盐酸,利于碱性染料的着色,若二者顺序颠倒,解离液中的盐酸会影响染色效果。6.在制片时两次用到载玻片,作用分别是什么?提示:一次是放置根尖;另外一次是在盖玻片上加一片载玻片看,目的是使细胞均匀分散,防止盖玻片移动,同时,避免压碎盖玻片。7.在显微镜下持续观察一个根尖
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