菌种繁育-消毒与灭菌（食用菌生产技术课件）

消毒与灭菌基本概念物理方法目录其它方法一、二、三、1.灭菌：指采用强烈的理化因素使任何物体内、外的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。结果是无菌。2.消毒：是一种采用比较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部对人体或动、植物有害的病原菌，而对被消毒的对象基本无害的措施。消毒的结果不一定灭菌。一、基本概念3.防腐或抑菌：是利用某种理化因素完全抑制微生物的生长繁殖，但不杀死微生物群体的方法称为防腐。可以抑制微生物生长，但对人体或动物体的毒性较低的化学剂称为防腐剂。措施：低温、除氧、干燥、高渗、加防腐剂。凡用于杀死或抑制微生物的化学药品都称为化学消毒剂。用量少时称为防腐剂。灭菌、消毒、防腐几个概念在内涵上具有相似性，但是在结果上有明显差异。常用的手段主要是物理和化学的手段。一、基本概念二、物理方法1.高温致死微生物的主要原因：①引起蛋白质和核酸不可逆地变性；②破坏细胞的组成。③热溶解细胞膜上类脂质成分形成极小的孔，使细胞的内容物泄漏。（一）高温2.高温灭菌与消毒的方法概念：将物体加温，使所带杂菌因脱水而死亡。方法1灼烧法：在火焰上直接将微生物烧死。接种针、金属小工具、试管口、三角瓶口等可用此法灭菌。（1）干热法一般微生物的营养体100℃保持1小时；芽孢则需在160～170℃保持2h才能杀死。干热灭菌必须在160℃～170℃，保持2～3小时。方法2烘箱热空气法：湿热效率比干热效率高。A.在湿热条件下，菌体蛋白易凝固。（2）湿热法蛋白质含水量与其凝固温度的关系蛋白质含水量（%）蛋白质凝固温度（℃）灭菌时间（分）5056302574~80301880~90306145300160~17030B.热蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。干热与湿热的穿透力和杀菌效果灭菌法温度(℃）时间(小时)布层温度（℃）灭菌效果20层40层100层干热法130～1404857270以下不完全湿热法1053102102101.5完全C.热蒸汽在菌体表面凝结为水时放出潜热，从而可提高灭菌温度。干热与湿热空气对不同细菌的致死时间细菌种类\加热方式干热90℃90℃相对湿度分别为20%80%白喉棒杆菌24小时2小时2分钟痢疾杆菌3小时2小时2分钟伤寒杆菌3小时2小时2分钟葡萄球菌8小时2小时2分钟①煮沸消毒法：沸水30min（芽孢2-3h）。②巴斯德消毒法：大多数细菌、酵母菌的营养细胞、病毒和真菌菌丝体的致死温度为55～60℃，因而，在牛奶、饮料和酒类等食品生产中，为了不影响食品的营养和风味，多采用62～65℃30min或70℃15min的巴氏消毒法。放线菌和真菌孢子的抗热性稍强，其致死温度为70～80℃，然后快速冷却。——传统的低温维持法高温瞬时法（HTST）：液体食品71.6℃下处理15-17s。超高温巴斯德灭菌法：液体食品137-143℃下保持3-4s，急剧冷却至75℃，后均质化后冷却至20℃。③间歇灭菌法：反复几次的常压蒸汽灭菌。具体做法：将待灭菌物品置于蒸锅(蒸笼)内常压下蒸30～60分钟，以杀死其中微生物营养细胞。冷后置于一定温度(28～37℃）下培养过夜，促使第一次蒸煮中未被杀死的芽孢或孢子萌发成营养细胞，再用同样的方法处理。如此反复进行3次，可杀灭所有的营养细胞和芽孢、孢子，达到灭菌的目的。此方法既麻烦又费时，一般适用于有些不宜用高压蒸汽灭菌的物品，如某些糖、明胶及牛奶培养基等。④高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌器，灭菌对象为金属、纤维、玻璃、陶瓷、木材等制品、生理盐水、耐高温的培养基、药品及其它物品。高压蒸气灭菌条件为:1kg／cm2蒸汽压下，对应温度为121℃，维持15～30min，即可达到灭菌目的。对体积大、热传导性差的物品，处理时间可相对长些。2.辐射灭菌强可见光：光氧化

紫外线灭菌：210nm-313nm，253.7nm

γ射线：一次可处理较多的物品尤其是密封的、不耐热的物品，且不会留下污染物。但对设备的要求高，适用范围有限。超声波：引起细胞破碎，且溶液温度升高。（三）过滤除菌法深层过滤器（非固定孔过滤器）：其组成是毡毛、棉花、石棉和玻璃纤维。机理主要是惯性碰撞、扩散和吸附。绝对过滤器（固定孔过滤器）：过滤介质呈膜状。机理是拦截，也包括惯性碰撞、扩散和吸附。用法：（1）培养基的过滤除菌：其过滤介质是：醋酸纤维素、硝酸纤维素、聚丙烯腈、聚丙烯、聚偏氟乙烯等膜材料，也有石棉板、烧结陶瓷和烧结金属等深层过滤材料。实验室常用滤器的孔径是0.45μm和0.22μm的，0.04μm的少用。还可组合。（2）空气过滤除菌：过滤法。4.渗透压5.干燥三、其他方法消毒剂是指用于杀灭传播媒介上病原微生物，使其达到无害化要求，将病原微生物消灭于人体之外，切断传染病的传播途径，达到控制传染病的目的。（一）表面消毒剂在Fleming(1929)和Waksman(1944)相继发现了青霉素和链霉素之后，迄今已报道的抗生素已逾千种，但由于对动物的毒性或副作用等原因，真正