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文档简介
开题报告方法介绍:开题报告是指开题者对科研课题的一种文字说明材料。这是一种新的应用写作文体,这种文字体裁是随着现代科学研究活动计划性的增强和科研选题程序化管理的需要应运而生的。开题报告一般为表格式,它把要报告的每一项内容转换成相应的栏目,既便于开题报告按目填写,避免遗漏;又便于评审者一目了然,把握要点。开题报告的基本内容及其顺序:开题报告封面:论文题目、系别、专业、年级、姓名、导师论文的背景、目的和意义(目的要明确,充分阐明该课题的重要性):1.论文的背景;2.理论意义;3.现实意义三、国内外研究概况(应结合毕业设计题目,与参考文献相联系,是参考文献的概括):1.理论的渊源及演进过程;2.国内有关研究的综述;3.国外有关研究的综述四、论文的理论依据、研究方法、研究内容(思想明确、清晰,方法正确、到位,应结合所要研究内容,有针对性)五、研究条件和可能存在的问题六、预期的结果七、论文拟撰写的主要内容(论文提纲)
八、论文工作进度安排(内容要丰富,不要写得太简单,要充实,按每周填写,可2-3周,但至少很5个时间段,任务要具体,能充分反映研究内容)九、参考文献下面是开题报告模板:开题报告尽量控制在5页!排满!开题报告尽量控制在5页!排满!中国医科大学毕业设计(论文)开题报告横线上内容直接填写,字体、字号与给定一致横线上内容直接填写,字体、字号与给定一致。填好后注意下划线尽量对齐!课题名称:学生姓名:王威学号:指导教师:职称:所在学院:专业名称:时间为本学期第三周的某一天!时间为本学期第三周的某一天!中国医科大学年月日课题名称TRAIL联合西妥昔单抗诱导人胆管细胞癌细胞凋亡的研究课题来源课题类型基础实验论文的背景、目的和意义胆管癌是起源于肝内外胆管上皮细胞的恶性肿瘤,可分为肝内胆管癌,肝门周围胆管癌和远端胆管癌。由于其恶性程度高,起病隐匿,生长迅速,临床症状不典型或缺乏特异性,早期不易发现,确诊时往往已达晚期,治疗棘手,预后极差,越来越受到业内的高度关注。目前手术切除及肝移植是可能治愈胆系肿瘤的手段,但是大多数患者在发病时均为局部晚期或已发生远处转移,无法完全切除肿瘤。而且即使经过手术治疗,术后也容易复发。除此之外,胆管癌的治疗方法还包括放疗、化疗、靶向治疗、光动力疗法、支架治疗等,但疗效都不能令人满意,因此,找到一种切实有效的治疗胰腺癌的方案十分重要。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是新兴的诱导肿瘤细胞凋亡的化疗药物,因其具有诱导肿瘤细胞凋亡而不伤害正常细胞的特性,已经成为肿瘤治疗的热点,给肿瘤治疗带来新的希望。西妥昔单抗是一种抗EGFR人/鼠嵌合单克隆抗体,它选择性地与表皮生长因子受体(EGFR)结合,在临床前试验中显示对多种肿瘤细胞株具有抗瘤活性。已被证实它对头颈部癌,非小细胞肺癌和结肠癌等多种肿瘤有效。探讨TRAIL和西妥昔单抗单独及联合应用时对胆管癌细胞凋亡的影响,以为胆管癌的治疗探索新的治疗方案。国内外研究概况TRAIL作用机制TRAIL基因定位于染色体3q26,,属于H型跨膜蛋白。N一末端位于胞浆区,C一末端位于细胞膜外,,形成典型的p一链夹心同源三聚体结构。TRAIL已经证实存在的受体有五种:包括死亡受体DR4、DR5,诱骗受体DeR1、DeR2,可溶性受体OPG。TRAIL主要通过两种途径,即细胞外途径(死亡受体途径)、细胞内途径(线粒体途径)。TRAIL诱导胆管细胞癌细胞凋亡的实验TankkaADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"Tanaka,2000#18"1]等人胆管细胞癌中TRAIL的表达及抗肿瘤作用,实验发现13例可切除的肝内胆管细胞癌患者肿瘤细胞均表达死亡受体,其中7例肿瘤细胞缺乏诱骗受体,重组TRAIL可诱导缺乏诱骗受体的胆管细胞癌广泛凋亡,还可充分抑制缺乏诱捕受体的肿瘤细胞在皮下的生长。在HuH-28,TFK-1,HuCCT1这三个胆管癌细胞株中,TFK-1,HuCCT1细胞株中都观察到了TRAIL引起的胆管癌细胞凋亡,而HuH-28没有检测到,三个细胞株都检测到了死亡受体,至于HuH-28检测到诱骗受体。所以细胞逃脱TRAIL介导的细胞凋亡是通过诱骗受体发生的。K.A.ClawsonADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"Burtness,2005#4"2]等雷公藤内酯联合TRAIL增强胆管细胞癌的细胞凋亡,实验表明TRAIL或雷公藤内酯作用后胆管癌细胞活性减低,而二者联合作用后胆管癌细胞活性较各自单独用药都明显降低,雷公藤内酯使胆管癌细胞对TRAIL介导的细胞凋亡更敏感,抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体西妥昔单抗表皮生长因子受体(EGFR)的信号传导关乎细胞的凋亡、增殖、分化、迁移和细胞周期循环,EGFR的过表达与肿瘤的形成和恶化息息相关,以EGFR为靶点进行靶向治疗已成为肿瘤治疗的热点。西妥昔单抗是EGFR单克隆抗体,他可竞争性地与EGFR结合,以阻止EGF激活受体,抑制下游信号传导从而干扰肿瘤生长、侵袭和转移以及细胞修复和血管生成ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Burtness</Author><Year>2005</Year><RecNum>8</RecNum><DisplayText>[3]</DisplayText><record><rec-number>8</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="sda25rr9bp9z0aewxzn5a5w7e0aaprrstepx">8</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Burtness,B.</author></authors></contributors><auth-address>FoxChaseCancerCenter,333CottmanAve,Philadelphia,PA19111,USA.barbara.burtness@</auth-address><titles><title>Theroleofcetuximabinthetreatmentofsquamouscellcanceroftheheadandneck</title><secondary-title>ExpertOpinBiolTher</secondary-title><alt-title>Expertopiniononbiologicaltherapy</alt-title></titles><periodical><full-title>ExpertOpinBiolTher</full-title><abbr-1>Expertopiniononbiologicaltherapy</abbr-1></periodical><alt-periodical><full-title>ExpertOpinBiolTher</full-title><abbr-1>Expertopiniononbiologicaltherapy</abbr-1></alt-periodical><pages>1085-93</pages><volume>5</volume><number>8</number><keywords><keyword>Antibodies,Monoclonal/adverseeffects/pharmacokinetics/*therapeuticuse</keyword><keyword>AntineoplasticAgents/adverseeffects/pharmacokinetics/*therapeuticuse</keyword><keyword>Carcinoma,SquamousCell/*drugtherapy/mortality</keyword><keyword>ClinicalTrialsasTopic</keyword><keyword>HeadandNeckNeoplasms/*drugtherapy/mortality</keyword><keyword>Humans</keyword><keyword>Receptor,EpidermalGrowthFactor/antagonists&inhibitors/metabolism/*physiology</keyword><keyword>SurvivalAnalysis</keyword></keywords><dates><year>2005</year><pub-dates><date>Aug</date></pub-dates></dates><isbn>1744-7682(Electronic) 1471-2598(Linking)</isbn><accession-num>16050785</accession-num><urls><related-urls><url>/pubmed/16050785</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1517/147125085</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[\o"Burtness,2005#8"3]。西妥昔单抗对胆管癌作用EGFR在多株胆管癌细胞系及胆管癌组织手术切除组织表达,胆管癌EGFR表达率约46%-60%ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"Xu,2010#13"4]。胆管癌细胞系表达不同的生长受体,生长受体抑制剂治疗可能与胆管癌的KRAS基因型有关,EGFR的表达自身没有影响西妥昔单抗的生长抑制作用的预后。ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[\o"Xu,2010#37"5]论文的理论依据、研究方法、研究内容1.检测西妥昔单抗及TRAIL单独及联合应用对胆管癌细胞株生长的影响1.1胆管癌细胞株的培养:细胞复苏,细胞传代,细胞冻存1.2细胞计数1.3MTT法检测细胞抑制率:1.3.1接种细胞1.3.2加药TRAIL组在细胞中加入用DMEM稀释的可溶TRAIL200ul,调节药物浓度,使其终浓度分别为10ng/ml、30ng/ml、100ng/ml、300ng/ml、l000ng/ml西妥昔单抗组加入DMEM稀释的西妥昔单抗,?量调节药物浓度,使其终浓度分别为?联合用药组加入DMEM稀释的TRAIL与西妥昔单抗,TRAIL及西妥昔单抗浓度?5%CO2培养箱中培养24h、48h、72h、96h1.3.3呈色1.3.4比色1.3.5细胞抑制率=(1一实验组D490/对照组D490)×100%绘制细胞抑制率曲线2.Hoeehst33258荧光染色法检测细胞凋亡2.1细胞爬片、加药将处于对数期生长的HCCC一9810细胞,PBS液冲洗2次,再加入0.25%胰酶lml进行消化细胞,镜下观察当肿瘤细胞变圆、间隙增宽、尚未脱离瓶底时弃去胰酶,加入DMEM培养液3.0一4.Oml终止消化,使用吸管吹匀细胞变成单细胞悬液,充分混匀后进行细胞计数。向24孔培养板内按2.5×10^4孔接种细胞,并将其分为四组,分别为对照组、TRAIL组、西妥昔单抗组、联合用药组,每组设3个复孔,加培养液使每孔总体积至lml,CO2孵箱培养过夜细胞爬片后,TRAIL组终浓度为100ng/ml,西妥昔单抗组终浓度为?g/ml2.2细胞固定及染色吸弃全部培养液,使用PBS液洗涤细胞2一3次。加4%多聚甲醛在室温下固定细胞20min,弃去甲醛,PBS液洗涤2一3次,自然晾干。滴加1OOuHoecllst33258液,室温下避光染色10min,用去离子水冲净晾干,以紫外光340nm波长激发,荧光显微镜下观察细胞形态并拍照。Western-blot技术检测Bax、Bcl-2蛋白的表达以WesternBlot方法检测不同处理因素作用胞后各组Bax、Bcl-2、EGFR蛋白表达情况。研究条件和可能存在的问题TRAIL是否对选择的胆管细胞株的敏感。Trail引起转移和侵袭?预期的结果论文工作进度安排(内容要丰富,不要写得太简单,要充实,按每周填写,可2-3周,但至少很5个时间段,任务要具体,能充分反映研究内容)参考文献1. Tanaka,S.,etal.,ExpressionandantitumoreffectsofTRAILinhumancholangiocarcinoma.Hepatology,2000.32(3):p.523-7.2. Clawson,K.A.,etal.,TriptolideandTRAILcombinationenhancesapoptosisincholangiocarcinoma.JSurgRes,2010.163(2):p.244-9.3. Burtness,B.,Theroleofcetuximabinthetreatmentofsquamouscellcanceroftheheadandneck.ExpertOpinBiolTher,2005.5(8):p.1085-93.4. Xu,L.B.,etal.,Nervegrowthfactor-betaexpressionisassociatedwithlymphnodemetastasisandnerveinfiltrationinhumanhilarcholangiocarcinoma.WorldJSurg,2010.34(5):p.1039-45.ADDINEN.REFLIST1. Tanaka,S.,etal.,ExpressionandantitumoreffectsofTRAILinhumancholangiocarcinoma.Hepatology,2000.32(3):p.523-7.2. Burtness,B.,etal.,Pha
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