大豆分离蛋白

壳聚一大豆分离蛋白复凝聚反应的研究一、 实验目的：1、 PH对壳聚糖、大豆分离蛋白溶解性的研究；2、PH、温度、时间、壳聚糖、大豆分离蛋白配比和离子强度等对壳聚糖 大豆分离蛋白复凝聚反应的影响。二、 实验原理：利用紫外可见分光光度计法测吸光度。复凝聚法是指以两种带相反电荷的壁材物质做包埋物，芯材分散于其中后，通过改变体系的pH值、温度或水溶液浓度，使两壁材相互作用形成一种复合物,导致溶解度下降而凝聚析出形成微胶囊。壳聚糖是甲壳素的脱乙酰产物，多糖链的侧链由于含有大量的氨基和羟基可以发生多种化学反应，比如烷基化、酰基化反应等等，同时，氨基在溶液中亦可以正离子化，形成聚阳离子。大豆分离蛋白是一类重要的球状蛋白，等电点为4.5。因此，当壳聚糖和蛋白质在溶液中混合时，他们之间可发生静电相互作用，在特定环境中发生自组装行为形成复合粒子。本论文以壳聚糖和大豆分离蛋白为原料，研究了它们在溶液中的自组装行为，并制备了它们的复合物。三、 仪器与药品：仪器：水浴锅、PH试纸、分析天平、紫外可见分光光度计、电子天平；药品：壳聚糖、大豆分离蛋白、1mol/L氢氧化钠溶液、1mol/L盐酸溶液、饱和氯化钠溶液。四、 实验步骤：分别制备1%壳聚糖和1%大豆分离蛋白溶液备用pH对壳聚糖、大豆分离蛋白溶解性的影响⑴.取12支相同试管，加入等量蒸馏水，利用盐酸及氢氧化钠溶液调pH分别为3至8,pH以0.5为梯度设置试管；向各支试管中分别加入5g壳聚糖，充分震荡，静置，在最大吸收波长处测量吸光度，观察壳聚糖在各个试管中的溶解度性。表1溶解性和pH值的关系试管123456789101112pH值33.544.555.566.577.58空白溶解性吸光度

(2),取12支相同试管，加入等量蒸馏水，利用盐酸及氢氧化钠溶液调pH分别为3至8,pH以0.5为梯度设置试管；向各支试管中分别加入5g大豆分离蛋白，充分震荡，静置，在不同波长处测量吸光度，观察壳聚糖在各个试管中的溶解度性表2溶解性和pH值的关系试管123456789101112pH值33.544.555.566.577.58空白溶解性吸光度pH、温度、时间、壳聚糖/大豆分离蛋白配比和离子强度对壳聚糖一大豆分离蛋白复凝聚反应的影响。pH取11支相同试管，向各支试管中分别加入5ml1%壳聚糖和1%大豆分离蛋白，利用盐酸及氢氧化钠溶液调pH分别为3至8,pH以0.5为梯度设置试管；充分震荡，静置，随后利用紫外分光光度计测量各试管在600nm处的吸光度。表1复凝聚反应和pH值的关系试管1234567891011空白pH值33.544.555.566.577.58吸光度温度取5支试管，加入等量蒸馏水，在最佳pH、壳聚糖和大豆分离蛋白的配比为1:4时，在25、35、45、55、65的温度下水浴10min，观察溶液在600nm处的吸光度，以得出其浊度。表2复凝聚反应与温度之间的关系试管123456温度/°c2535455565室温吸光度

时间取6支试管，加入等量蒸馏水在最佳pH、壳聚糖和大豆分离蛋白的配比为1：4和最佳温度的处理下，水浴10、20、30、40、50、60分钟后测量各支试管在600nm处的吸光度，以得出其浊度。表3复凝聚反应与时间之间的关系试管1234567时间/min1020304050600吸光度④壳聚糖和大豆分离蛋白配比取6支试管，在最佳pH、温度和处理时间下，分别向各支试管中加入配比为1：1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6（1=2ml）的壳聚糖和大豆分离蛋白及等量蒸馏水，观察其在600nm处的吸光度，以得出其浊度。表4复凝聚反应与配比之间的关系试管123456配比（1=2ml）1:11:21:31:41:51:6吸光度⑤离子强度取6支试管，在最佳pH、配比、温度和处理时间下，向各个试管中加入等量壳聚糖一大豆分离蛋白，1ml蒸馏水，然后在各支试管中分别加入0、0.003、0.005、0.01、0.05、