抗体（免疫学检验课件）

第五章抗体概念：抗体（antibody，Ab）机体受抗原刺激后B细胞分化为浆细胞，由浆细胞分泌的一种能与抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。免疫球蛋白（immunoglobuin，Ig）具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白

所有的抗体都是免疫球蛋白；而免疫球蛋白不都是抗体。免疫球蛋白与抗体的区别：第一节抗体的结构一、基本结构经二硫键共价结合2条重链(H链）和2条轻链（L链）：四肽链结构-S-S-S-SS-SN端C端LLHH（以IgG为例）

1.重链（heavychain)：简称H链，由440～550个氨基酸组成，分子量约55KD～75KD。H链含有少量糖类，所以Ig属于糖蛋白。根据H链的抗原性不同，可将免疫球蛋白（Ig)分为五类。IgG

的H链：γ链（gamma)IgA

的H链：α链(alpha)IgM

的H链：μ链(mu)IgD的H链：δ链(delta)IgE的H链：ε链(epsilon)二、重链和轻链五类免疫球蛋白结构示意图

2.轻链（lightchain）：简称L链，由211～217个氨基酸组成，分子量约25KD。根据L链的抗原性不同，把L链分成二型：κ型，λ型。同一个Ig分子上H链同类，L链同型，把Ig分子分成五类十型。（一）可变区（variableregion，V区）位于L链靠近N端的1/2和H链的1/4，这个区段的氨基酸组成、排列顺序是可以变化的。超变区（hypervariableregion，HVR）或互补决定区（CDR）可分为CDR1，CDR2，CDR3是V区中氨基酸的组成和排列顺序变化频率更高的区域，也是抗体与抗原决定簇结合的部位。二、抗体的功能区高变区（互补决定区CDR）、抗原结合点、独特型决定簇统一在此基础上。（二）恒定区（constantregion，C区）

位于L链靠近C端的1/2和H链靠近C端的3/4区域，这一区域的氨基酸组成和排列顺序比较稳定，所以叫恒定区，H链和L链的恒定区分别称为CH和CL。重链轻链N端C端可变区恒定区铰链区二硫键（H链）（L链）(V区)(C区)抗原结合部位

一、免疫球蛋白的基本结构：抗原（三）功能区轻链VL、

CL（二个）重链IgG、IgA、IgD：VH、

CH1

、CH2

、CH3

（四个），IgM、IgE：多了一个CH4功能区。

（以IgG为例）VL、VH：

结合抗原CL、CH1：部分遗传标志CH2：结合补体、

通过胎盘CH3：结合细胞（FcR）

含有较大量的Pro，具有柔韧性，可折叠，分别形成T型和Y型;有利于Ig与不同距离的抗原决定簇结合。-S-S-S-SS-SNNCLHVHCH1CH2CH3（四）铰链区（Hinge

region）（一）连接链（joiningchain，J链)(1)化学本质：浆细胞分泌的多肽链(2)存在：IgM（五聚体）,SIgA（双体），以二硫键的形式结合在Ig的H链上。连接5个单体IgM成五聚体，2个IgA成双聚体，故J链起稳定多聚体的作用。

三、抗体的其它结构（二）分泌片（secretorypiece,SP）

1.化学本质:多肽链(70kD)2.来源：黏膜上皮细胞3.作用：

a.帮助IgA穿越黏膜

b.保护sIgA抵抗蛋白酶的水解作用J链J链分泌片Ig的其他成分木瓜蛋白酶四、抗体的水解片段（一）木瓜蛋白酶水解片段Fab段Fc段木瓜蛋白酶水解片段

IgG→2Fab+1Fc胃蛋白酶（二）胃蛋白酶水解片段F（ab’）2段pFc’段胃蛋白酶水解片段

IgG→F（ab′）2+pFc′第二节抗体分子的抗原表位指同一种属内所有个体Ig共有的抗原特异性，其抗原表位主要存在于Ig的C区（CH和CL）。一、同种型

1.类和亚类（根据H链的抗原性不同）

IgG—

γ(gamma)IgA—α(alpha)IgM—μ(mu)IgD—δ(delta)IgE—ε(epsilon)(1)类

(2)亚类

IgG：IgG1，IgG2，IgG3，IgG4

IgA：IgA1，IgA22.型和亚型(根据轻链C区抗原特异性不同分型)(1)型κ(kappa)型

λ(lambda)型(2)亚型(λ链)：

OZ(+)(或λ1)：第190位(亮氨酸)OZ(-)(或λ2)：第190位(精氨酸)Kern(+)(或λ3)：第154位(甘氨酸)Kern(-)(或λ4)：第154位(丝氨酸)

同一种属内不同个体的Ig分子抗原性不同，在同种异体间免疫可诱导免疫反应。这种抗原决定簇主要位于CH和CL。由个体遗传基因所决定的，故称为遗传标记。1.IgG1、IgG2、IgG3的遗传标记称Gm,分别称G1m,G2m,G3m。

2.IgA2的遗传标记称Am,分别称A2m1、A2m2。

3.κ链的遗传标记称Km,分别称Km1、Km2、Km2二、同种异型

同一个体不同B细胞克隆（抗体形成细胞克隆）所产生的Ig分子，其V区的抗原特异性也不同。独特型抗原决定簇存在Ig的V区，不同特异性的抗体其独特型也不同除血清中的Ig外，淋巴细胞（T、B细胞）表面的抗原受体也具有独特型决定簇。三、独特型

病毒毒素结合毒素结合病毒使毒素失去毒性结合细菌阻止病毒感染细胞抑制细菌吸附第三节抗体分子的生物学作用一、特异性识别抗原二、通过经典途径激活补体Ab（IgM、IgG）+Ag→C1q→补体经典途径IgG4、IgA和IgE的凝聚物→

补体旁路途径

(1)介导Ⅰ型超敏反应；(2)调理作用（opsonization）：IgG+抗原(颗粒性)→FcγR（单核、巨噬细胞及中性粒细胞）→促吞噬细胞吞噬；(3)ADCC：IgG+抗原(靶细胞)→FcγR（NK细胞→

杀伤靶细胞。

三、结合Fc受体单核吞噬细胞抗原吞噬细胞的调理作用Fc受体单核吞噬细胞抗原吞噬细胞的调理作用G表面抗原ADCCADCC效应FNK细胞Fc受体IgGADCC效应ADCC效应NK细胞FADCC效应ADCC效应四、结合细菌蛋白五、穿过胎盘和黏膜人IgGFc段+葡萄菌A蛋白（SPA)；人IgGFc段+链球菌(A、C和G群)G蛋白；而其Fab段活性不变(1)IgA介导的黏膜免疫作用(2)IgG通过胎盘特性：人类的IgG有四种亚型：IgG1、IgG2、IgG3、IgG41.血清中含量最多，占Ig总量的75%；

2.唯一能通过胎盘的抗体（在新生儿抗感染中起重要作用）；第四节抗体分子的特性和功能一、IgG

3.出生后3个月开始合成，3～5岁达成人水平

(8.0mg/ml～17mg/ml)；4.半衰期长，约23天。抗感染的主要抗体功能：抗菌抗体抗病毒抗体抗毒素抗体二、IgＭ

1.五聚体，分子量最大，又称巨球蛋白；

2.人类发育过程中最早合成的Ig；

3.体液免疫应答最先产生的Ig：感染早期免疫；

4.半衰期5天—血清中特异性IgM水平增高提示有近期感染；

5.IgM不能通过胎盘→脐带血或新生儿血清中IgM；水平升高表明胎儿有宫内感染

6.B细胞膜IgM（mIgM）→体液免疫应答；

特性：1.分两型血清型：占血清Ig10%~20%分泌型（SIgA）：主要分布于唾液、乳汁等分泌液中2.婴儿可从母乳中获得SIgA3.出生后4～6个月合成，青少年时期达成年人水平。功能：SIgA是黏膜局部抗感染的重要抗体。三、IgＡ1.由1个单体构成，血清中含量极少；2.作为B细胞上的表面标志。IgD是B细胞的重要表面标志B细胞的分化过程中首先出现SmIgM，后来出现SmIgD它的出现标志着B细胞成熟了。四、IgＤ特性：1.血清中含量极微；2.具亲细胞性（亲细胞抗体）功能：与I型超敏反应有关。C4五、IgＥIgGIgMIgA/SIgAIgDIgE存在形式单体五聚体单体/二聚体单体单体相对分子质量(×1000)146970160/385184188血清中总Ig百分含量70~755~1015~20＜10.002半衰期235633出现时间出生后三个月出生前出生后四个月晚晚五类抗体的特性比较第五节单克隆抗体定义：

由一个B细胞杂交瘤细胞系产生的只识别抗原分子上一种抗原决定簇的抗体。一、单克隆抗体技术的基本原理骨髓瘤细胞—无限增殖；小鼠脾B细胞—合成、分泌特异性抗体。二、单克隆抗体制备的基本方法抗原非分泌性小鼠骨髓瘤细胞脾细胞在PFG作用下细胞融合转移到HAT培养基骨髓瘤细胞被HAT杀死，脾细胞逐渐死亡，融合细胞存活杂交瘤细胞的筛选和克隆建株筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞单克隆抗体的制备示意图广泛用于生命科学的各个领域。如：作为诊断试剂用于许多血清学检测，用于治疗肿瘤，自身免疫性疾病，抑制同种异体移植排斥反应。

三、单克隆抗体医学上的应用第六节基因工程抗体

又称重组抗体,是指利用重组DNA及蛋白质工程技术对编码抗体的基因按不同需要进行加工改造和重新装配，经转染适当的受体细胞所表达的抗体分子。已被广泛应用于疾病的临床诊断、预防和治疗及基础理论研究等领域。

一、人源化抗体

以基因克隆及DNA重组技术改造鼠源性单克隆抗体，使其大部分氨基酸序列被人源序列所取代，这样既保留了亲本鼠克隆抗体的亲合力和特异性，又降低了鼠单克隆抗体的异源性。如：人-鼠嵌合抗体二、全人源化抗体最理想的抗体分子,不含任何鼠源成分。此种抗体不仅完全避免了HAMA的产生，且特异性、亲和力不受影响，毒副作用小，已成为治疗性抗体药物发展的必然趋势。三、小分子抗体由抗体分子中抗原结合部位片段组建而成的抗体称为小分子抗体。（一）单区抗体

；（二）单链抗体

；（三）二硫键稳定抗体；（四）Fab片段

；四、特殊基因工程抗体（一）双特异性抗体；（二）催化抗体；（三）抗体融合蛋白；小结掌握抗体与免疫球蛋白的区别。掌握抗体的结构与特性免疫检验质量控制包括定量实验、半定量实验和定性实验三个方面。掌握五类抗体的功能。解释各类抗体的功能。解释抗体在人体免疫中所起的作用。习题1产妇初乳中含量最多的Ig是

A．slgAB．IgM

C．IgGD．IgAE．IgE2抗体主要存在于血清琼脂电泳的

A。α球蛋白区

B．α球蛋白区

Cγ球蛋白区

D巨球蛋白区

E．白蛋白区3天然ABO血型抗体属于

A．IgGD．IgAC．IgMD．IgDE．IgE4下列说法正确的是

A免疫球蛋白就是抗体

B．免疫球蛋白不是抗体

C免疫球蛋白与抗体无关

D抗体不——定是免疫球蛋白

E．免疫球蛋白不一定是抗体，抗体都是免疫球蛋白5在机体早期免疫防御中发挥重要作用的Ig是

A．IgMB．IgAC．IgDD．IgGE．1gE6关于免疫球蛋白的生物学功能，下列错误的是

A与抗原特异性结合

B激活补体

C形成攻膜复合体

D．介导ADCCE亲细胞作用7关于IgM的特性，下列正确的是

A是分子量最小的IgB有铰链区

C主要在血液中发挥抗感染作用

D在血内含量高、半衰期长

E．激活补体的能力比IgG弱8．血清内五类免疫球蛋白的含量由少到多的顺序是

AIgD、IgG、IgM、ISE、IgAB．IgA、IgG、IgD、IgE、IgMC．IgG、IgA、IgM、IgD、IgEDISE、IgD、IgM、IgA、IgGE．IgM、IgG、IgA、IgE、IgD9膜表面免疫球蛋白(Smlg)指的是A、T细胞抗原受体B、B细胞抗原受体C、T细胞表面受体D、B细胞补体受体E、免疫活性细胞的抗原受体10免疫球蛋白肽链与抗原结合的功能区是A、CL、CH1B、CH2C、CH3D、CH3、

E、VH、VL11．木瓜蛋白酶可将IgG水解成何片段A、F(ab’)2B、FCC、FabD、FC及FabE、PEC’11能与肥大细胞和嗜碱性粒细胞结合的Ig，是

A．IgMB．IgGC．IgAD．IgDE．IgE12能通过胎盘，又能与葡萄球菌A蛋白结合的免疫球蛋白是A.IgAB．IgGCIgMD.lgEE.IgD13新生儿脐血中哪类Ig水平增高表示有宫内感染AIgGBIgMCIgADIgEEIgD14主要在粘膜局部抗感染的Ig是AIgGBIgECIgDDSIgAEIgM15．人类IgG开始合成的时间是

A胚胎15周B新生儿期C出生后3个月D出生后4-6个月E胚胎末期16．免疫接种后首先产生的抗体是AIgMBIgGCIgADIgDE