2015年微藻多糖项目中期进展

微藻多糖的高效绿色制备、表征和活性测定技术开发微藻多糖活性评价浙江大学孙崇德微藻多糖抗氧化、抗肿瘤、增强免疫力活性评价一、项目进展DT多糖和GT多糖体外抗氧化能力评价DT多糖和GT多糖体外诱导巨噬细胞活化能力评价DT多糖和GT多糖体外抑制肿瘤细胞增殖能力评价微藻多糖增强免疫力功能评价二、小结三、下一步计划1.DT多糖和GT多糖体外抗氧化能力评价图1

DT和GT多糖抗氧化活性检测结果A.DPPH自由基清除能力；B.铁离子还原能力（FRAP）；C.氧自由基吸收能力（ORAC）；D.ABTS自由基清除能力；E.OH自由基清除能力不同字母表示在p<0.05水平差异显著DT多糖的体外抗氧化活性强于GT多糖2.DT多糖和GT多糖体外诱导巨噬细胞活化能力评价图2

DT和GT多糖对RAW264.7细胞NO释放的诱导作用不同字母表示在p<0.05水平差异显著图3

polymyxin

B对DT和GT多糖诱导

RAW264.7细胞NO释放作用的影响**表示与Control组相比具有显著差异（p<0.01）；##表示与不加polymyxinB组（0

μg/mL）相比具有显著差异（p<0.01）DT多糖体外活化巨噬细胞能力强于GT多糖图3

DT和GT多糖对RAW264.7细胞因子的诱导作用不同字母表示在p

<

0.05水平差异显著2.DT多糖和GT多糖体外诱导巨噬细胞活化能力评价DT多糖体外诱导巨噬细胞活化相关因子TNFα、IL6和IL10的释放图4

DT和GT多糖对RAW264.7细胞Toll-like受体信号通路基因表达的影响不同字母表示在p<0.05水平差异显著2.DT多糖和GT多糖体外诱导巨噬细胞活化能力评价DT多糖体外诱导巨噬细胞活化相关基因（Toll-like受体信号通路）的表达3.DT多糖和GT多糖体外抑制肿瘤细胞增殖能力评价图5

DT和GT多糖对胃癌SGC7901细胞的生长抑制作用不同字母表示在p<0.05水平差异显著图6

DT和GT多糖对肝癌HepG2细胞的生长抑制作用不同字母表示在p<0.05水平差异显著DT和GT多糖对胃癌细胞SGC7901的增殖没有直接抑制作用

DT多糖在100

μg/mL浓度能显著抑制HepG2细胞的增殖4.

微藻多糖的增强免疫力功能评价模型：环磷酰胺免疫抑制BALB/c小鼠，全雄组别小鼠个数处理方式阴性对照Normal10只灌胃生理盐水连续2周+第3周腹腔注射生理盐水50

mg/kg连续2

d，同时继续灌胃生理盐水7天模型对照Model10只灌胃生理盐水连续2周+第3周腹腔注射环磷酰胺50

mg/kg连续2

d，同时继续灌胃生理盐水7天阳性对照L10010只灌胃香菇多糖100

mg/kg连续2周+第3周腹腔注射环磷酰胺50

mg/kg连续2

d，同时继续灌胃香菇多糖7天GT多糖低剂量GT-5010只灌胃微藻多糖50

mg/kg连续2周+第3周腹腔注射环磷酰胺50

mg/kg连续2

d，同时继续灌胃微藻多糖7天GT多糖中剂量GT-10010只灌胃微藻多糖100

mg/kg连续2周+第3周腹腔注射环磷酰胺50

mg/kg连续2

d，同时继续灌胃微藻多糖7天GT多糖高剂量GT-20010只灌胃微藻多糖200

mg/kg连续2周+第3周腹腔注射环磷酰胺50

mg/kg连续2

d，同时继续灌胃微藻多糖7天低糖藻粉中剂量DZ-10010只灌胃微藻1

g/kg连续2周+第3周腹腔注射环磷酰胺50mg/kg连续2

d，同时继续灌胃微藻7天高糖藻粉中剂量GZ-10010只灌胃微藻200

mg/kg连续2周+第3周腹腔注射环磷酰胺50mg/kg连续2

d，同时继续灌胃微藻7天表1螺旋藻多糖对BALB/c小鼠免疫器官重量指数的影响组别脾脏指数 胸腺指数Normal0.0031±0.0002ab

0.0012±0.0002cdModel0.0028±0.0003a

0.0006±0.0002aL1000.0026±0.0004a

0.0010±0.0003bcGT-500.0040±0.0003c

0.0011±0.0003cGT-1000.0030±0.0004ab

0.0014±0.0003dGT-2000.0030±0.0005ab

0.0009±0.0003abcDZ-1000.0030±0.0004ab

0.0007±0.0002abGZ-1000.0035±0.0004b

0.0010±0.0002bc不同字母表示在p<0.05水平差异显著（n>3）4.

微藻多糖的增强免疫力功能评价GT多糖能提高免疫抑制小鼠的脾脏和胸腺指数低糖和高糖藻粉能提高免疫抑制小鼠的脾脏和胸腺指数不同字母表示在p<0.05水平差异显著（n>3）表2

螺旋藻多糖对BALB/c小鼠外周血白血病和淋巴细胞数量的影响组别白细胞数（WBC，×109/L）淋巴细胞百分比（%）Normal4.18±0.72a75.50±6.78aModel5.54±1.65abc75.20±13.23aL1006.94±1.71c73.83±9.76aGT-505.94±0.80abc81.92±2.37aGT-1004.86±1.07ab77.24±3.18aGT-2004.16±1.62a81.86±3.68aDZ-1005.63±1.43abc75.93±3.41aGZ-1006.19±0.94bc81.30±6.86a4.

微藻多糖的增强免疫力功能评价GT多糖、低糖和高糖藻粉能轻微提高免疫抑制小鼠的淋巴细胞百分比，但效果不显著图1螺旋藻多糖和藻粉对BALB/c小鼠淋巴细胞转化能力的影响不同字母表示在p<0.05水平差异显著（n>3）；4.

微藻多糖的增强免疫力功能评价GT多糖、低糖和高糖藻粉能提高免疫抑制小鼠的淋巴细胞转化能力，其中GT

200

mg/kg/d剂量效果最显著图2螺旋藻多糖和藻粉对BALB/c小鼠NK细胞活性的影响不同字母表示在p<0.05水平差异显著（n>3）；4.

微藻多糖的增强免疫力功能评价GT多糖、低糖和高糖藻粉均能显著提高免疫抑制小鼠的NK细胞活性图3

螺旋藻多糖和藻粉对BALB/c小鼠碳廓清能力的影响不同字母表示在p<0.05水平差异显著（n>3）4.

微藻多糖的增强免疫力功能评价GT多糖、低糖和高糖藻粉能提高免疫抑制小鼠的单核-巨噬细胞能力，其中GT

10