DNA的重组与转座培训课程

一节DNA重组

同源重组特异位点重组二节DNA转座转座子的概念转座子的分类转座过程发生和机制转座子转座的特征真核生物的转座因子第六章DNA的重组与转座

重组和突变是产生遗传变异的两大主要因素，但二者的分子机制截然不同：重组是已经存在的遗传信息发生重排，而突变是改变基因组中的碱基。但二者在分子机制上又是相互影响的。

一概念

DNA分子内或分子间发生遗传信息的重新组合称为DNA的重组(遗传重组或基因重排)。

第一节DNA的重组

二DNA重组的意义对生物进化起着关键作用。能迅速增加群体的遗传多样性(diversity)，使有利突变与不利突变分开，通过优化组合积累有意义的遗传信息；提供修复机制；调节基因表达等。三奇重崖组赶主刘要白类郑型1点同偿源纸重砌组2果特均异蚀位荡点毛重贞组3吨异纯常货重传组其屿共额同旗点携是秘双奸股涝D扇N码A奋间例的纯物止质便交顾换获，获但夏发宣生劫的品情靠况丈不窗同。1杂同价源值重宪组◎倡发括生咱在扁同贼源缝序怖列食间挨的荐重搂组昏称惠为避同形源牺重禽组(岗h巡寿o午m炒o采l醒o死g轨o禾u韵s沿r惰e习c凤o设m宪b率i谋n悬a博t草i春o垄n酸)百，又傲称幕基纠本免重闷组闲。是荐最粱基有本织的公D名N断A叛重趋组害方惹式固，上通削过垄链竿的卫断射裂张和酷再运连艺接音，糠在堆两锹个竟D韵N仅A指分隶子继同歉源鸣序突列跨间烦进掀行揭单控链侨或渔双饼链射片输段衡的柱交艘换熔。◎纠H仍o唇l蔑l贱i元d反a涂y诸重催组贸模惨型R社o港b纵i符n妈H久o贴l腿l瓣i索d离a惕y于魔1貌9郑6替4偷年急提拣出颈了臭重敌组膛的填杂待合违D联N征A革模错型熔，欲又害称闯H狭o警l蓬l鼠i岸d电a沙y拨模恩型片。剩该嚼模耀型烫对盯重霜组袋过巧程妨的脸解缘瑞释秘如炮下止：同盈源贿的哭非糟姐列妹将染搞色独单品体娃联优会炼；同斧源况非稿姐尚妹理染搂色快单楚体惰D奴N扣A员中过两谨个方形向相还同目的还单星链放，辞在唱D小N厨A节内屡切没酶刺的旨作泽用迫下赠，蚕在房诚相返同臣位赔置产同屯时偶切座开饭；切绪开乘的厦单奸链猎交宗换据重标接罗;形朴成叹交逮联艺桥闸结显构享；交朝联它桥如沿对配舌对幻玉D庙N遗A外分拌子析“师移至动妥”至。宴两边个嘴亲备本忧D澡N遵A浸分域子月间北造茅成蜡一旅大公段劣异贩源辈双德链银D乖N鼻A（爱H尖o贩l射l周i第d岂a娇y铸结诊构滔）绕健交金联雀桥咏旋师转勉1衬8挠0精度钓；形限成泄H牲o架l采l播i丛d赖a洪y炼异壮构头体旗；通州过横两盏种犁方宁式锻之辞一架切视断逮D滚N喉A逃单助链赴，赛若腰左挡右招切揉，但则其形甘成从非饶重慎组译体区，鬼若汗上定下请切档则寇形燥成朱重委组乏体纯。片波段医重夸组邻体拼躲接呆重盛组跌体无种论磁H伪o荣l智l度i动d天a鸽y士结不构筋断畏裂吵是悔否险导烈致饼旁袖侧阅遗此传异标汪记帅的会重奏组翠，伟他阁们美都分含堡有乒一喘个钞异灵源陕双迁链申D欲N档A葬区竞。◎画异碎源常双先链倡与序基赵因石转雷变异注源尽双尸链吊D烧N损A：由墙不狡同端亲贼本括双灿链告分赛子佣中思的矩互奶补日单路链摆产魔生充碱患基低配亩对偷的扛双韵链夹D松N浆A设，瞒在略遗事传以重每组粱中殿产闷生律。基锦因理转牲变衬：迁一部个摔基芒因矩转傻变波为搁它拉的拉等歼位郊基孩因遥的悠遗绸传樱学甜现蝇象练。基书因胸转蛮变暖的袖实奏质奋：重铃组砖过文程孤中左留串下渔的嚷局乌部析异肉源妨双兼链仆区想，捷在暖细持胞符内爱的盏修续复唤系桐统段识米别油下锯不仆同欠的术酶述切压/浩不络酶补切凡产弄生屠的爱结磁果毒。评不叛同阅的耕切降除卡会祸产薪生名不守同泽的裕结肺果强。×◎细毯菌陈的烘基消因庄转储移讯与窃重择组盗机察制细火菌众接奶合梯：指暂通老过祸细久菌灶细族胞崖的艰直虹接扣接矛触术，五遗抱传巧信夕息熊从似供仅体臭单塞向微转晌移低到绣受校体宴的怪过匠程梯。致证育西因疮子硬：虑能晌够旦促律使冷染爱色盾体现基险因返转凤移夏的便接跳合寨质描粒茄称泥为婚致疲育皱因撑子聚。洋简箱称接性救因议子暑或疫F雀因侮子贵。转鼓化(过t虑r志a牢n谨s府f抄o突r息m潜a古t腐i课o脸n翻)：指购细麻菌株品劲系膨吸凶收女了首外蒙源部D敞N惜A事(雪转拒化德因镰子皮)倍而滩发议生首遗认传额性拨状吨改声变蜘的阻现胃象盏。具范有挣摄构取肢环梦境燃中壤游歌离顷D辆N找A奶分奏子续能批力饲的裕细横菌植称稍为习感趁受该态阶细熟胞拐(放c喂o触m恢p城e趁t滨e雀n丢t顽c阳e北l善l喘)巨。有随些剃细翅菌宫在尺自涨然药条抗件滑下虑就生可鄙成艺为社感等受凯态膝；在加实被验绩室趣也喊可逼用泥高啦浓伞度靠C击a芬2萝+神诱菜导仿细庙菌寇成漠为践感料受辅态魂。×转贤导辉作酒用拦:当嚼病鸦毒谱从蔽被技感遵染尺的舱供苹体文细员胞雁释伙放把出盈来﹑惰再孩次便感贼染猎另巴一泡细专胞剪时浅,济发兴生修在锈供研体暴细攻胞谎和难受馋体挥细稳胞腰之胡间暮的顿D阅N筐A龟转浇移匀及铲基钞因闪重敏组拔.整旷合细陕菌铸的浸融院合(骂t急r形a淋n拢s程d潜u绘c弹t棋i衫o亭n置)：蕉细录菌沫细连胞炸膜兵融届合静导掌致欧的归基祥因云转坚移手和浪重捉组咸叫程细字胞哨融袄合虑。×◎同蓄源火重植组裁的慢酶决学享机笑制D堆N家A尾分双子条之宗间革的客交杰换理仅历涉苦及字D亚N针A咽分界子粪重倒组预机姜制桌和鲜限怜制策区狗域野的前这杰一厉部抱分激，迷而液不交是饲整炭个圈染调色琴体缩慧。有宁三仅种斥情案况监:由朵断殊裂菌分钉子们产尖生融的梦单康链极与软非味姊忙妹垂染狮色戚单券体摇的阶双育链层相依互喊作跃用核；单暑链最侵避入被双限链异沟源敌双搏链娘结握构逆的垃形嘴成。以阀上税每东一彼步畏都裂需捎要抖酶现的炊催眨化C容h兴i扭位孩点晨和群R匠e携c先B妇C乖D黎核亲酸姥酶(反外短切浆酶够)C靠h氧i位附点果：它淹由萝于情单钢个砍碱趁基否对思的榴改荡变徐产订生胖了校刺楚激歼重卖组授的秀位白点莫。呢这糊一仇位层点滔是改由械8衣个挤碱自基本组挺成定的报非浅对胶称冒序因列须：5察′哪G抖C疮T愉G域G弊T汽G格G毛3葡′3凑′莲C栋G辣A仰C圾C津A斩C石C饰5逝′●由协断汁裂倒分艳子差产恭生项的培单臣链愁与帅非跃姊办妹猜染执色牵单府体确的光双希链氏相为互毯作恋用C蜻h悄i序幻玉列超天料然丸存扯在闯于谨大狮肠印杆文菌扁的腿D歼N红A董中盐,米每伴5亿-勇1粮0势k室b渐长顺的捆序投列婆出者现朋一动次德.C霉h鲜i位茧点眠是r菌e锻c报B白C战D编蚕码坦的R观e啄c唇B扫C葱D舅核纽奉酸抬酶的盒靶姐序携列R极e削c像B颈C来D征酶是安一丸种迹强域的房诚核苗酸虹酶弃，痕可毙降寻解急D种N剥A醋，具泳有努解粱旋答酶此活怖性咽，律在棒S献S额B族存残在崭时携它祸可涂以控解思开渡双质链搂；具旁有饿A勉T挑Pa众se繁活踏性键。圾在聚重秧组古中拖的秧作款用以是抖提本供刺带萄有陪游卸离屿端插的加单叠链阳区饿。当紫R拉e绕c涂B顷C瞧D箩结画合查在旨D迎N宵AC葡h凯i位并点裕右册侧邀的哨短严裂孕端折时长，盼它省沿照着状D秤N程A末移袜动润，仪使息D幻玉N晨A倾解伴旋延。绢当锐到助达C睛h僻i位丙点3偷′扔端填4色-孔6无p塞b时怕它浊停荒顿佳下伪来致，热并食切亩开形单霞链军D堪N蹈A彼,逃产越生膝具惧有3盾′裹端闯的郑游累离获单物链备.粪引蓬发芦异饥源果双企链嗽的蔽形汤成肺.C亲h屈i位剑点尽的执识骗别彻导费致栋R钟e贱c蹲B揭C在D者核柔酸掘酶叔失绸去嗽的鸡活其性竞，牺但锤继鸽续军发裙挥洁其就解参旋血酶喷的沸作愈用宋。R壤c宅e携A疯蛋的白有年两鄙个课主罗要番功液能宏：诱鸟发善S灶O质S竭反浑应筛；促查进及D悬N能A机单情链扔的国同添化星,速即债单州链轻与绞同坟源斤双碰链保发馆生猾链亿的薯交腐换惯。R勺e关c降A油能失使抄单枝链然D催N崇A雾取楚代畜双旗链谅分会子铃中傲同蜜源帅的席链注，辛一渐般满要营具赌备军三倦个杜条技件追：犁①怀其末中寺一奇个竟D库N背A追分蠢子持必尾须诵要挪有婚一贸个委单圆链拢区西域米；目②但其晃中滨一堵个胞D饲N泥A吓分弄子悄必俊须秆要岁有明一愚个眉游舒离输的恨3趴′捡末座端劈燕；糕③防此荡单腐链良区街域卫和摘3叮′拐末准端比必厚须抓和案另杠一愁个巴D忠N敞A葡分喇子产有尿互沫补病区。●唯单程链穴侵恰入闲双魄链R欲e士c省A原蛋郊白物与阶H踪蝶o究l朝l旧i摩d其a窝y狮中兽间用体边的拿形至成R径e判c恢A铁蛋殖白讽与石单墓链芒D歪N聋A绒结骄合宋；复并合嗽物碍与美同摩源四双培链备D犯N利A描结汽合钉；入妙侵搞单侍链往与牧双命链辜中润互躁补脸链稳配五对茅，食同捆源拼链日被怎转翅换锁出寸来R娇u秃v辫A和R垫u西v虫B蛋呆白镰可弱促决进庸异顾源窑双禾链良结驴构送的减形羞成绸。廉R计u益v恼A很可福识暴别胸H勤o己l研l僻i滤d青a国y嗽连悟接面的咬结寇构歇,短形耕成驶一买个上四愧面霸构付象性,遭促废进俗分跑支赵点同移教动悲；郊R每u占v秩B灰是悟一悠种插解萍旋政酶凑，季它海可刊发别动腾迁傻移四反秒应扮。构R俗u扔v影C突将H去o僻l费l唱i闻d练a听y才中垃间盗体某切炒开乌,摩由D捆N看A铸聚幕合咸酶将和臣连赛接擦酶王修拥复绢合坦成辜.●异知源显双炸链竿结挠构劫的芒形汉成R抛u痛v畜蛋膜白票和平H采o桶l御l附i局d剥a归y谊中宾间进体具的田拆党分大肠杆菌中涉及产生重组DNA的重组基因基因功能RecBCD系统具有核酸酶，解旋酶和ATPase活性。在Chi位点产生单链3ˊ游离未端RecB,RecC,RecDRecBCD是ATP依赖的外切酶和解旋酶(外切酶V)，它与双链断口结合，解开DNA并导入裂口，其倾向性位点称为chi(参见重组热点)。RecBCD酶产生RecA可以作用的底物RceA(1)具有蛋白酶活性;(2)在单链DNA和ATP存在的条件下RecA能启动DNA单链和与之互补的双链分子进行碱基配对。RceG具有解旋酶活性，可解离Hollidy连接RuvAB系统具有解离Hollidy连接的活性RuvA

可识别Holliday连接的结构RuvB

是一种ATPase，它可发动迁移反应RuvC具有内切酶活性，可特异识别Hollidy分枝，它在体外可切这个连接体，解离重组中间体2惧特碑异画位父点剥重工组概背念讨：荐指念发路生缸在炕一涛个阀特习定拘的厦短事D挥N烧A佣序续列锡内茶由朗特执异辣的状酶假和毫辅枯助淹因侦子寸识夫别某和绑作症用运的教重疼组踏。λ溉噬流菌而体堆D佩N喷A舌进短入杜大诊肠草杆桨菌殿后混存料在怜溶赴源(板C缺Ⅰ羽占龙优姿势结)和让裂猴解(编C门r丈o腐占跑优器势呢)两存条植途言经固，亡二湿者粗都秤要戏求熔早把期戏基僚因文的巴表跃达妹。噬立菌办体败的伤附文着寨位匀点训:a烤t扇tP细闷菌宫的垒附及着抛位僻点惜：a滑t荣tBλ啦噬辨菌批体搞整崖合慈酶金：泪I好n绝tλ裁噬白菌纷体暴编睛码勉蛋夺白泻：乓X丹i耕s细杨菌晚的号宿找主他整鬼合搁因熔子锈：左I茶H拨F◎王λ胖噬租菌缴体杯D滔N虚A北的愤整哄合刚与裤切驳除◎臣细尺菌策的硬特绞异慌位厕点偶重柳组鼠全伤范寒朝沙类门架氏碗菌垮H天1逼鞭段毛僻蛋灵白贞和桥H办2阀鞭调毛蓄蛋腾白梢抗痰原原表此达续的盆互歉变浮，密称康为上鞭嫁毛道相匪转喜变刘，周这难种哄转蜓变陆是径由H妥片监段唤倒收位决剖定平的拉，费此不倒忙位霜是星由缴于障特隶异隶重消组筹位扬点h届i晃x发羊生揉重上组盏后予引践起语的酿。特蝇异驼重垦组夜位辆点h州i刘x发青生老重号组障后工，镰引趁起拆H磁片野段但倒奔位柏，各使忠H尼2质鞭板毛揭蛋抄白鲁不嚼表抗达塑，欣H海1希表启达肠。◎座基彩本板概割念转舞座位子（斑t理r姑a猪n励s口p唤o爽s徒o烟n巨)亭:是忆在宝基旁因订组伐中拨可处移东动朋的奖一止段测Ｄ的Ｎ孕Ａ迅序须列叙。转样座格：乡丰转她座炒子由敞基丑因开组团的嫂一胆个贞位趴置灵转会移雪到秒另赶一火个语位蝴置扛的爪过想程绳叫捕转耗座遇。转袍座蔬过鞭程世有印5差大切特淋点跪：细转榜移拔、要不窝独绿立穷、课与验转寒座蜓基骗因罢共钉存皆、丙随勇机、引盈起指基独因隆产忧物古改惑变掩。3茶转评座群子址重泽组(专异蚕常情重饰组晕)◎艘转赴座玩子王的让分则类插央入惭序戚列I惕S复架合询转井座龄子1搞同冷源锈重域组2泊特微异柴位番点化重洞组3截异剖常喂重岗组插土入劫序雪列(I跪S)I崭S违是汁基蜓因往组集中理可扑移贿动商遗碑传压因粘子职家赏族抽中供的居成阿员顺之厉一茄，常它差可赖以垒整蝇合楼到楚宿食主躬非用同偷源需位垒点谈上盲，属若腾I很S腔插仗入维到坛某夕基狸因楚内庆，逝通底常拍这竖个妥基棒因低就所会须失莲活竭。图23-18

质粒上有IS，那么经变性和复性后，在电镜下可以观察到茎环结构的存在(引自Griffithsetal1999)I橡S蝴因汇子笔特查点只馋含贫有秆与传转惯座扶有趟关砍的贴酶则基情因匠，完不情含签抗令药秒性侄及充其炭它辛基巷因决，滩两乘端裂有职1畏5垫-掠2清5阁b婆p辱反瓶向搂重桥复幅序些列泪(狮I欲R庆)撑。类周插签入毛序晚列（紧I封S谜-美l讨i薪k袋e她e件l册e续m灯e厘n弟t摔s刮）是允指杆I裂S冻1养0聚R每，飞I饶R包5拉0尼R崖和杜I僵S昼9焦0预3运，序它滩们庸的剖结粪构和拐I保S拦相速似嘱，捐但东不有独修立篮存沿在煤。烛而舟是衔作幕为结复荣合优转具座苍子两棵臂改的逗组下件鉴。表IS的结构和功能

DR(bp)IR(bp)中心区域(bp)靶的选择拷贝数插入序列:

IS1923768随机5～8IS25411327热点5(在F因子上为一)IS411~13181428AAN20TTT1或2IS54161195热点？类插入序列:

IS10R9221329NGCTNAGCN

IS50R991531热点

IS9039181057随机

A量T迟G住C混AT迫A慎C沙G盯T9蹦8则7主6食5药4可3岔2晕11虏2捎3训4局5悔6省7缘瑞8阁99抵8返7悉6挡5导4还3斜2丑11口2济3当4线5绍6降7鼓8端9987654321123456789987654321123456789ATGCATACGTATGCATACGT反占向危重有复扰区靶拔序猎列桐顺亡式绪重稀复雷区转快座积子转晶座帜子哗在谁靶少位鼻置铲插热入喊前强后常的建结作构复茂合堆型脾转拦座因子咽(努T患n暑)这备类精转刑座择子技中芹除斗了侨转章座春酶无基肃因猫外肆，随还哈有棍药愉物甜抗秀性派基苦因扑，扁结云构走较偿大爪而色复歼杂拣，户故觉称华为摔复裁合绢转捉座钩子逗。挪有乱Ⅰ找和致Ⅱ邮两嫩种弦类士型镰。Ⅰ个型雷：挪两拢末练端冠有食相凳同炎的系I芽S戒序硬列黎，票或弊正竖向鸦，菌或异反生向叼。Ⅱ裂型勺：税末版端悄有镜3蜘8创b追p标的肢反旨向弃重举复怖序私列抚。

图两种不同的转座子含有不同的IR区域和不同的抗性基因。(a)Tn9含有一个短的IR区。因两个IS1元件以相同的方向排列，每个元件都有一个IR序列(b)Tn10含有一个长的IR区。两个IS成分方向相反(引自Griffithsetal1999)转座因子

长度(bp)遗传标记

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IS10L反向Tn55700KanRIS50R

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