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酸谈辅修课主讲 猫大信息科 酸RbG0M

CyclinA/B

CyclinDCyclinA

RNAandProteinG1CyclinG1CyclinEG1/Scheck-G2/Mcheck-

S 2N＜S期G2RNAandProtein

DNA检测DNA以确定细胞周期：PI 酸 酸

酸→消化收集细胞：将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中，1500rpm离心5min，→PBS洗：加入1mlPBS重悬细胞沉淀，1500rpm离心5min，→→→→固定：加入2ml预冷的70% ，4℃固定30min或-20℃固定过夜后1500rpm离心5min，弃上清。PBS洗：加入1mlPBS重悬细胞沉淀，1500rpm离心5min，弃上清后500ulPBS重悬细胞。RNA去除：加入RNaseA（工作浓度20μg/ml），37℃孵育30min后1500rpm离心5min，弃上清。PI染色：500μlPBS重悬细胞沉淀，加入PI（工作浓度50μg/ml），室温避光孵育30min。→→→→→流式细胞仪检测：过300目筛，置流式管中，4℃冰箱保存待测。→

PI,eBioscience00- 酸未

未做处理的细 转染对照质粒的细

或用药物处理的细 酸 软件分析流式数据（可以使用flowJo），得到细胞周期比例。PBS

酸谈

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