糖苷酶及抑制剂的深入

1糖苷酶及其抑制剂的研究摘要：糖苷酶是生命体正常运转的关键性酶，糖苷酶抑制剂可抑制糖苷酶的活性，阻断碳水化合物的分解，因此对一些糖代谢紊乱性疾病如糖尿病、肥胖病等有临床应用价值。本文研究了糖苷酶中的β－半乳糖苷酶、β－葡萄糖苷酶以及蔗糖酶的抑制剂。重点研究了β－半乳糖苷酶的分子结构和活性基团，并从结构出发筛选其抑制剂，发现此酶的抑制剂种类较少且抑制活性较低。本实验采用混合交叉筛选法筛选了多种金属离子和氨基酸对β－半乳糖苷酶的抑制作用，同时也筛选了天然产物和合成化合物。关键词：糖苷酶β－半乳糖苷酶β－葡萄糖苷酶蔗糖酶抑制剂的筛选混合交叉法兆1、驳前言阳糖苷荐酶和远糖基偿转移羡酶不沉仅参辰与了渔体内昂碳水水化合蔽物的券消化躁，而臭且是桐糖脂师、糖怖蛋白贞生物献合成失中寡况糖链挥的修席剪酶匹，它虏对糖季蛋白止中寡衬糖链理的形江成极顺为重扩要；贤糖链尘的组评成与竿结构谱是糖变蛋白饿特异伟生物猪功能伍的识予别部透位，壁因此迈糖苷怎酶活宰性对吼糖蛋假白生吓物合配成有歌关键坛作用让，而选后者撒又涉岂及到加免疫厘反响指、神颜经细慎胞的诞分化涝、肿慈瘤的宫转移钢以及弟病毒渡和细楼菌的垒感染馅.葱因此即,贫糖苷慢酶不恶仅是决生命牵体正渣常运蚁转的念关键档性酶贿,同屿时又开是许韵多疾脏病的莫相关苹酶.销与醋病毒败感染精、癌历症及穿一系干列新阵陈代自谢紊贼乱性抱疾病师如糖准尿病附、肥惯胖病率有关漏。由它于糖商苷酶左重要冻的生踩物学打意义就，糖舍苷酶爆抑制拼剂的该研究嫂也引双起了吃人们税的极妹大兴是趣。类糖苷挡酶抑芽制剂沸即是顽可抑帖制糖赏苷酶厌的活先性，莫阻断愁碳水海化合训物的过分解脑，抑桐制淀辟粉、奥麦芽美糖、恒蔗糖泡转变旋成单枪糖；蹲影毙响糖酬脂、混糖蛋尺白生稿物合称成中跳寡糖镰链的悼修剪务；所胡以糖勿苷酶扔抑制克剂不纽但对吹一些汗糖代循谢紊饿乱性觉疾病渐如糖产尿病辣、肥阔胖病咸等有运临床樱应用吓价值屑[1摧]蛛，而糕且可选作为评抗A凉ID罩S病秧毒磨[2醉]厦、抗吉鼠白脂血病温毒仇[3蝴]仔的潜掌在治勤疗试艘剂。惧本论桥文重甘点研史究了炕糖苷串酶中枪的邻β理－半份乳糖盛苷酶船β服－半功乳糖啊苷酶己〔施β预－g条al园ac另to午si驶da堪se匆〕又穗称里β他－D拿－半骗乳糖番苷水昂解酶授，〔遮β兰－D李－g刊al垂ac贼to靠si常d-陪-毒e踩ga改la扁ct踢o-王hy纷dr能ol为as虑e牛,E祸C.蜘3.湿2.逐1英.2朴3〕弹,商歇品名子为乳哲糖酶甘〔L那么ac谅ta妥se奇〕，禾它广暮泛存菌在于热豆类卵及其纸他各三种动个植物督体内木和微犯生物却中。混它能丝够催议化戏β酿－半餐乳糖太苷化醉合物况中的讲β屿－半祸乳糖骡苷键罩发生龟水解匙，还掀具有驱转半懒乳糖刻苷的插作用辆。由邪于它询具有跟糖苷醒键结盐构特击异性略，可戏作为云乳糖兽降解四和双右糖合脊成催虫化剂您[4体,5的]而，并甘有水气解生凶物体芬内储枝存的捕多糖屋和半屡乳糖依残基略.引技起血韵型转趋化等灯生理君功能斧[6皂,7阔]树而受社到人必们广句泛关覆注，抱成为衫生物哪化学势和酶秋催化欲化学兼的重泽要研意究课欢题。贷β柜－半溉乳糖其苷酶敬的应脚用有孝着长爱远的燥历史黎，最语初在中食品胳工业公中用屡来降膜解乳培糖含柳量以速满足闸乳糖美不适洋症患挥者的潜需要散，然孝而随氏着生纤物技斯术的理开展术，它燥越来馅越应固用于妥基因续工程岂、蛋慕白质纽工程滥和疾脑病诊那断方垂面。阅将范β密-福末半乳烛糖苷缺酶与厕人体系胞外诞淀粉透状蛋饥白前锹体融怪合形穗成融蝶合蛋伏白掏,扫可作渠为园Al甲zh前ei犬me仔r判病的秒免疫用源茶,气并进奶一步压制备按其单项克隆顶抗体藏[8吃]基。还永有报挣道将梳β猜-抗模半乳坊糖苷芳酶作摆为一纺种辅杆蛋白谅,曾饮用作询猫白完血病肤毒颜gp拔70溜顾的疫各苗甩[9妖]右。荷在诊饺断方痛面吵,途将抗宾菌性乐HI爸V伤病毒纺基因虫与甚β伪-滨炭半乳匀糖苷州酶基晨因那La需cZ蕉重组非后作镜为定涛量记HI匹V省利用搜循环便的早线期抑商制作枝用耗,凭并预效测化择合物烫抗墓HI灰V巨的活详性工僻具。旺同时较，肆近年粘来图β施－半滋乳糖溪苷酶即基因春被越那来越条频繁江的用投于转裙基因罚治疗训方面维，菊β哀－半妻乳糖饼苷酶嫁基因嚼作为宅报告烂基因弦，通拍过检飘测炭β迈－半服乳糖寻苷酶达的表赶达情奥况，夺研究抓转基辉因治仿疗没[1裙0]撒。皮在环邻境检承测方宅面孕,抚大肠族杆菌谣的贿β陷-驶滋半乳俘糖苷之酶活下性检倘测可她快速胶分析析浴场乌和渔击场地炉区水零体受戚排泄墓物污累染程稀度。抢由于影β围－半低乳糖折苷酶趋的广拘泛应妨用和牲重要蝇的临济床价蚕值，氏人们意对此铁酶的匹基因昆进行第了深馅入的读研究债，通浑过众管多学辈者的晌努力沙，目远前避β目－半淘乳糖辽苷酶馆基因园库已识根本爸建立舅并将承日趋靠完善明。但限是，泉对于怀此酶跪的抑李制剂乓研究欣还很揭少，膏目前吴文献昏中所完报道眠的研卵究酶谈和抑顾制剂晌相互裤作用谊的方坊法，哲根本那上是猾用单顿一的牧竞争乓性或萍非竞缩争性傍抑制痛剂与缘酶作诞用，粉通过规动力万学研枝究或坛用现成代仪揭器分威析技禽术进蒙行表炕征，短获得通有关库酶的店结构啊或催唐化机梅制的滋信息陵。本丧实验忍就从钓酶的散结构咬出发船，探何讨研纲究并语大量钢筛选突其抑孟制剂译。裂Ov珠er杂al软l偷vi程ew芦s宇of来t拣he拣β-薯ga袄la丧ct世os挠id宽as搂e钉ac兴ti异ve绣s男it钟e梢Fi掩gu秒re乖1.旬S毕te闪re捏ov厅ie像w捷of青a膊s通ur辉fa沸ce食r桌ep具re王se柜nt御at毒io怜n冶of党t洋he快t即et妻ra深me丹r馅in桑w缘hi涌ch热e厉ac钞h皱su肉bu债ni企t奏is淹s倚ho悟wn浆i感n闭a岗di台ff塔er罪en纷t双co充lo衡r.溉T志wo竞l粱ac顺to冤se卵m凤ol南ec演ul局es革(鼓sh眯ow滴n况in尖w省hi江te低)复ar峰e滴sh轿ow司n尖bi派nd赤in帮g站in拥t慌he糠a栽ct堆iv烈e授si滔te棕p农oc救ke歼ts志.柴Th芦e镜de垃ep厨es直t欢pa帝rt饿s滤of朵th神e疫ac傅ti招ve帽s闲it蒸es薯a宋re绣n洋ot洁v孤is齐ib选le免i咽n读th汉e叨fi驼gu化re扬.谜Th颗e摔ot孤he庙r忙tw脖o抽ac蓝ti物ve宗s婆it争es酬a似re珠o遥n库th协e序“b斩ac虏k〞刚s愈id惧e羊of亲t膀he遍t适et谷ra索me证r.猴F壶i业gu屠re甜2.仆棚Cl栋os炎er币s鲁te览re防ov起ie刷w翼of贤a槽s内in准gl脏e害ac礼ti言ve猫s号it挨e.鬼P免ro屿te吧in该a境to后ms扇a庸re绸c凉ol梨or航ed引b拾y退d孤om砌ai趴n驼wi荣th兆d会om户ai抛n酒1差in晴b矩lu驴e,窜d净om姑ai祥n裙2溪in震cy皆an沈,趟do逢ma扎in原伏3泻in创y据el任lo承w,回a该nd母d朴om勉ai围n态5危in兰r偿ed蛇(墓th践er黄e坡ar嗽e乌no愁a玩to孝ms零f聋ro粥m晋do峰ma熊in爽4蚀).画S优ol滴ve鸣nt受m套ol决ec离ul绸es革a纺nd糕m双et揭al浩s玩ar雹e孩in换w斜hi写te促.栽Th记e月ye冠ll也ow苹ba允ll错s耻ar番e芽me油ta嫩l逮li瓦ga耻nd波s侦wh怕ic绍h建ar候e攀pr岩ot绵ei简n巨at嫌om歪s.并T堪he舞s颗em忘it慕ra薄ns演pa最re颜nt轿平s关ur节fa努ce矿w猾as浪c掀al抗cu苗la盗te刺d烛us区in棒g咳pr电ot螺ei枕n缴at稳om匠s未pl烘us机s振ol村ve党nt垮a钉to璃ms吊w笼it玉h研B观<汇25卡Å非2.闪T雹wo踏l币ig迷an港ds新a复re舌s锣ho果wn芽:缓la谱ct排os悟e浑(g胀re负en爸)萍bi僚nd送s唐in伴t鹊he捞“两sh早al闯lo宰w〞愧m驱od愤e辛wh袍il桐e屑g茶al番ac狡to住no延-扫la甲ct亮on提e笼飘(r形ed瓶)感bi嫩nd贪s池in受t洋he觉“犁de雕ep浮er泄〞蛋mo武de上.第通过答对酶混的分远子结顿构和挡活性毅基团令的分纸析，援发现没其蛋绵白质翅原子建中有策金属愈配体拔，因池此研液究了齿金属照离子袍和氨粮基酸嫌对此潜酶的杠抑制乘活性翁。醒2.物实验洲局部隙1、梅混合弹交叉甩法筛挣选金懒属离铸子和艺氨基工酸等渴生物烂小分防子棚Ta庙bl稀e1订.T硬he穗c搁oo壁pe述ra鞋ti申on华e婚ff高ec兆t宵of猛A返mi妙no战a槽ci茧ds岭a部nd饺M盒et症al斜s教Mi筹xt庙ur井e踪of裕A唉mi蛇no减ac垦id在s衬Re起la呆ti着ve爪a踏ct恰iv精it高y(强%)揪Mi奴xt标ur怒e献of攻唉纸Me撑ta汪ls筹Al掀a眨88拔.5寿88甘.9更Co恒Cy煎s敏87凳.6妖96歌.7吃Ni独Se贞r万90滑.4韵95仙.7赚B弓Ly稍s疏92菌.1详98蚊.3汉Cd糖Ph肥e珠10券1皮92间.1干Zn拔Hi稻s竖10厚0短92惧.6裕Mn爹Le野u牧97盛.8伙92资.1厘Cu不Tr眼p购98昼.1隔87抓.3鄙Mg柴从上静表可裹以看迎出，绣金属荐离子宣和氨苹基酸崇有协翁同抑拿制活伞性，袍但抑糊制效曾果较柱小，歉当单烛独的横金属概离子昌有激锈活作之用时闷〔如志Mg兆〕，搞协同事多种汁氨基伴酸反痰而表律现有诚抑制叼活性肾，可朵以初苏步判炭断比蝶较好偿的是动Co放和A姨la预的协遍同效朝果。橡2、养天然令产物妥化合珠物的针筛选撤包括怎黄酮河类、蛙异援黄酮眉类近、染遣料木足素及视其铜贫、锌画、硼搜络合诵物纯、酰超化物乱、多仍酚类淡、容联苯柔类等勇一系笋列化恨合物竖。捕Ta延bl领e2刮.掩Th汪e没Th膝e熟in去hi秧bi风ti姐on呢o盆f泼na娇tu捷re灵c半om坛po宁un虏d拣单位湾：m技M殃Co途mp途ou输nd再IC惠50勇和厚胞朴酚肉4.宫73许厚朴桨酚同－设染料决木素佳－或茶多染酚叮4.另96股槲皮宁素翼－稿小檗虾碱私－掉黄芩凉苷霉－如半乳魂糖希17打.4代曲克芝卢丁菌－吸铜络茎合G验en德is寸te溉in叼－狠锌络弃合G卫en甚is痒te说in润－压改造木厚朴尸酚款－衰改造咱和厚超朴酚吃－谊3、交合成颠化合善物的兔筛选饿通过物筛选踩发现磨，奎皂啉类灰衍生窑物对叨β踏－半慢乳糖济苷酶勇具有驰一定铅的抑扬制活百性。沿Ta楚bl丈e3锹.评Th萝e披in项hi彩bi宏ti糖on坐o霸f济sy农nt坊he考si悉s蚀co咳mp样ou即nd毯s抬单位斩：m驾M猴Co卸mp炼ou叙nd黄IC唤50栽1.飘72仪0.叉33锹2洒0.活03泉29意3.辱结果笑与讨顿论腰通过撑上述脂多种括金属窄离子沟、氨熄基酸桶以太及天暑然产镜物和屑合成洲化合井物的亡大量胀筛选下，我沿们得乔出一检定的肺酶与烂抑制晋剂的教构效殃关系告讨论辱：唯1初、喝二环渐或三撒环多诉酚类狸化合叙物对权该酶灯有抑夸制效乒果蝴2酱、速三环蜓类黄肾酮化能合物解的胀C缓环假设倚为刚弊性的毁苯环染那么没狸有抑方制效异果。悲3东、笛喹啉祸衍生修物中库取代劈基中绕含有严较大效原子恋的化计合物无抑制套效果张更好身4俊、册喹啉及衍生闻物中欺取代寄基含妙有氨旁基支曾链的央抑制堵效果鉴较好饮在研千究挎β瓜－半效乳糖驶苷酶质的同卫时也莫研究蔬了糖夹苷酶主中的艘β灰－葡洲萄糖反苷酶俘和牌α既－蔗浩糖酶听，对敢它们符的抑弱制剂铸也进市行了纸筛选有，发楚现下届面三钻种化艳合物可同时鲁对架β卡－半连乳糖葛苷酶肉、旅β述－葡旋萄糖歌苷酶抬有抑港制活柿性。伐对三浮种糖仰苷酶许抑制德剂的吗筛选鸟我们杀得出忙以下李结论储：挤1.喘β缩－半埋乳糖意苷酶闹、烦呢β诞－葡练萄糖咽苷酶蛇、村α崇－蔗威糖酶置的潜祸在抑屡制剂裤的高涌效抑降制较劈