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回收试验精品文档授课对象:06级检验1-5班课 时:2学时回收试验目 标:1.掌握回收实验的基本原理2.学会衡量检验方法和检测结果的准确度 ---回收率实验的设计3.归纳总结进行回收实验的注意事项及对检测方法的评价实验用品:(以二乙酰法测BUN为例)水浴箱(100℃)、721型分光光度计、混合血清、(①②③)、BUN标准液(100mmol/L、200mmol/L、7.14mmol/L)等内 容:一、原理:在已知浓度的样品中加入一定量的被测物,然后用同样方法测定,测定值与“理论值”(样品浓度和加入浓度之和)之比,乘以 100%即为回收率,一般实验方法应在100±5%为合格。回收实验是测定生化实验方法准确性较好的方法之一,有人认为回收率除鉴定测定方法的优劣处,不可用来纠正测定中的误差,其计算公式如下:回收浓度回收率(%) 100%加入浓度标准液量(ml)加入浓度 标准液浓度血清量(ml) 标准液量(ml)二、操作步骤(以二乙酰一肟法测尿素氮为例):1.样本处理:收集于网络,如有侵权请联系管理员删除精品文档混合血清2ml+H2O0.1ml(R)混合血清2ml+BUN标(200mmol/L)0.1ml(R+S1)混合血清2ml+BUN标(100mmol/L)0.1ml(R+S2)2.测定:加入物(ml)RR+SR+SSB12R血清0.02————1血清—0.02———R+S2血清——0.02——R+S0.02BUN标准————蒸馏水————0.02酸性试剂5.05.05.05.05.0二乙酰一肟0.50.50.50.50.5混匀,置100℃12min,取出待冷比色(λ=540nm),取各管A值计算。三、计算:A(RS1) A(R)7.14A(S)回收率(%) 1000.11002.0 0.1四、注意事项:1.加入标准液的体积在整个样品中占比例要少,一般不能超过 10%,否则整个样品稀释过大,不能反映原有样品的实际情况。2.加入被分析物后,使回收实验样品的溶度达到医学决定水平(是指对病人医疗具有参考价值的临床分析物的溶度)。3.回收实验应重复测定三次以上,以减少随机误差。4.为防止因标准液不稳定,或制备中的误差,或因实验操作所致的误差,应同时用已被公认的可靠性强的方法做比较;测定时应用 2份以上的样品;不同样品要同收集于网络,如有侵权请联系管理员删除精品文档时测定以减少实验操
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