糖类及蛋白质测定

糖类(tánɡlèi)

蛋白质测定第一页，共六十二页。精选课件§1碳水化合物的测定(cèdìng)§8.1概述一、食品中碳水化合物的种类与营养(yíngyǎng)功能单糖、双糖、低聚糖、多聚糖二、食品中碳水化合物含量三、测定碳水化合物的意义营养功能评价加工工艺评价四、碳水化合物的测定方法物理法、化学法、酶法、色谱法第二页，共六十二页。精选课件碳水化合物来源组成D-葡萄糖天然存在于蜂蜜、水果和果汁中，是玉米糖浆的主要成分，可在蔗糖水解转化过程中产生D-果糖天然存在于蜂蜜、果汁、高果玉米糖浆，可在蔗糖水解转化过程中产生D-山梨醇添加于食品中，主要作为保湿剂蔗糖广泛存在于水果、蔬菜组织和果汁中，也可作为添加用糖D-葡萄糖D-果糖乳糖存在于牛乳及其产品中D-半乳糖麦芽糖存在于麦芽中，玉米糖浆、麦芽糖浆中存在D-葡萄糖第三页，共六十二页。精选课件低聚麦芽糖存在于各种玉米糖浆和麦芽糊精中D-葡萄糖棉子糖少量存在于豆类中D-葡萄糖D-果糖D-半乳糖水苏糖少量存在于豆类中D-葡萄糖D-果糖D-半乳糖淀粉广泛存在于谷物和块茎以及作为加工食品的添加剂D-果糖食用胶：海藻胶、羧甲基纤维素、瓜耳豆胶、阿拉伯树胶、果胶、黄原胶、角叉菜胶、甲基纤维素细胞壁多糖：原果胶、纤维素、半纤维素、甲壳素、葡聚糖第四页，共六十二页。精选课件食品含量食品含量玉米薄片86番茄汁4.2通心粉75午餐肉4面包50鸡肉0冰淇淋22~27蜂蜜75~82酸奶4.7~6.9牛奶巧克力60全脂乳4.7色拉调味料3.3~22葡萄16~17软饮料11~15带皮生苹果15甜红茶7~10土豆12淡啤酒1.3橙汁10~12第五页，共六十二页。精选课件§1.2可溶性糖类(tánɡlèi)的测定一、可溶性糖类分析的预处理1.提取液的制备提取剂：水、乙醇提取方法：含脂肪的食品：预先脱脂液体样品：预先浓缩固体样品：70~80%乙醇溶液提取2.提液的澄清(chéngqīng)常用澄清剂要求：能较为完全地除去干扰物质、不影响糖分测定、易于除去。第六页，共六十二页。精选课件种类：中性酝醋酸(cùsuān)铅乙酸锌、亚铁氰化钾硫酸铜、氢氧化钠澄清剂用量澄清剂的去除第七页，共六十二页。精选课件二、还原(huányuán)糖的测定还原糖是指具有还原性的糖类，如：葡萄糖（分子中含有游离醛基；果糖含有游离酮基，乳糖、麦芽糖含有游离的潜醛基。蔗糖、低聚糖及多糖等可通过水解生成相应的还原性单糖进行测定。还原糖的测定方法主要有：直接滴定法、高锰酸钾法、萨氏（Somogyi-Nelson）法、碘量法等（一）直接滴定法1原理样品中的还原糖与碱性酒石酸铜溶液反应生成红色氧化亚铜沉淀，过量(guò〃liàng)的还原糖将次甲基蓝由蓝色还原为无色，根据样液消耗量可计算出还原糖的含量。第八页，共六十二页。精选课件第九页，共六十二页。精选课件2、试剂碱性酒石酸铜溶液：甲液：硫酸铜、次甲基蓝溶于水并稀释；乙液：酒石酸钾钠、氢氧化钠、亚铁氰化钾溶于水，并稀释。葡萄糖标准溶液：0.1%3、测定方法（1）样品处理称样→70~80%乙醇提取→加入澄清(chéngqīng)剂（乙酸锌、亚铁氰化钾）→定容→静置→过滤，收集滤液备用。（2）碱性酒石酸铜溶液的标定确定试剂的葡萄糖相当量（mg葡萄糖/10mL）第十页，共六十二页。精选课件准确吸取甲液5mL、乙液5mL加入锥形瓶；加水10mL，玻璃珠；（从滴管中）加入9mL葡萄糖标准液；煮沸30s趁热滴定至终点计算滴定度(mg/10mL)

F=c·V（3）样品溶液预测（初步确定(quèdìng)样品溶液所需测定体积）准确吸取甲液5mL、乙液5mL加入锥形瓶；加水10mL，玻璃珠；煮沸30s保持沸腾（从滴管中）滴加样品溶液，滴定至终点计录样品消耗体积Vi。第十一页，共六十二页。精选课件（4）样品溶液滴定准确吸取甲液5mL、乙液5mL加入锥形瓶；加水10mL，玻璃珠；（从滴管中）加入样品溶液Vi－1mL；煮沸30s趁热继续滴加样品溶液，滴定至终点(zhōngdiǎn)计录样品消耗体积V。5结果计算

第十二页，共六十二页。精选课件（二）高锰酸钾法（费林氏法）1原理样品中的还原糖与过量的碱性酒石酸铜溶液（Cu2+）反应生成红色氧化亚铜沉淀（Cu+），经过滤(guòlǜ)，用硫酸铁溶液溶解氧化亚铜（Fe3+→Fe2+），再经高锰酸钾滴定，计算氧化亚铜含量，再经查检索表后计算样品中还原糖含量。Cu2++还原糖→Cu+Cu2O+Fe2(SO4)3+H2SO4=2CuSO4+2FeSO4+H2O10FeSO4+2KMnO4+8H2SO4=5Fe2(SO4)3+K2SO4+2MnSO4+8H2O第十三页，共六十二页。精选课件2试剂碱性酒石酸铜溶液：甲液：硫酸铜溶于水并稀释；乙液：酒石酸钾钠、氢氧化钠溶于水，并稀释。硫酸铁溶液0.01mol/L高锰酸钾标准溶液（用草酸标定）3仪器古氏坩埚或垂融坩埚、真空泵4测定方法（1）样品处理(chǔlǐ)称样→70~80%乙醇提取→加入澄清剂（硫酸铜、氢氧化钠）→定容→静置→过滤，收集滤液备用。第十四页，共六十二页。精选课件（2）测定50mL样品液加入烧杯中加费林试剂甲液、乙液各25mL加热，煮沸2min趁热抽滤热水洗涤(xǐdí)加硫酸铁溶解高锰酸钾滴定至终点，记录高锰酸钾消耗量（3）计算第十五页，共六十二页。精选课件（三）其它(qítā)方法1萨氏滴定法2萨氏比色法3碘量法4爱农法53,5-二硝基水杨酸法第十六页，共六十二页。精选课件三、蔗糖(zhètáng)的测定（一）测定原理样品脱脂后，以水或乙醇提取，提取液经澄清处理，以盐酸(yánsuān)水解，蔗糖转化为还原糖，然后按还原糖测定方法分别测定水解前后样品液中还原糖含量，差值乘以系数即为蔗糖含量。（二）试剂0.1%转化糖标准液：纯蔗糖1.9000g→溶解定容，取50mL→盐酸水解（70℃，15min）→中和，定容。（三）样品测定1.样品处理2.处理液2份（其中一份水解）3.按还原糖法测定。第十七页，共六十二页。精选课件四、计算1直接(zhíjiē)滴定法2高锰酸钾法第十八页，共六十二页。精选课件四、总糖的测定(cèdìng)食品中的总糖通常是指具有还原性的糖(葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等)和在测定条件下能水解为还原性单糖的蔗糖的总量。在营养学上，总糖是指能彼人体消化、吸收利用的糖类物质的总和，包括淀粉。由于在测定条件下，淀粉水解程度较弱，本节所讲的总糖不包括淀粉。（一）直接滴定法同蔗糖测定测定结果(jiēguǒ)可以以转化糖或葡萄糖计。第十九页，共六十二页。精选课件（二）蒽酮法1原理碳水化合物对强酸和高温特别敏感，在酸存在的条件下连续(liánxù)加热会产生多种呋喃衍生物。这些产物会与其自身或其他产物结合生成褐色和黑色物质，也可以与其他酚类化合物如苯酚、间苯二酚、α-萘酚等尤其是杂环氮结合，生成有色产物，从而可非常方便地进行碳水化合物的分析测定。第二十页，共六十二页。精选课件第二十一页，共六十二页。精选课件2试剂葡萄糖标准系列（0mg/kg~100mg.kg）3测定方法4作标准曲线(qūxiàn)，计算总糖含量吸取标准系列、样品液标准系列样品液2222222加入蒽酮10ml沸水浴10min快速冷却静置10min（暗处）

比色（620nm）测吸光度A0As1~As5Ai第二十二页，共六十二页。精选课件§1.3淀粉的测定淀粉是重要的营养素之一，是人类能量的主要来源。是食品工业的重要原料(yuánliào)。淀粉由葡萄糖单位构成的聚合体，按聚合形式不同，可形成两种不同的淀粉分子——直链淀粉和文链淀粉。直链淀粉是由葡萄糖残基以α-1,4糖苷键结合构成的，分子呈直链状；支链淀粉是由葡萄糖残基以α-1,4糖苷键结合构成直链主干，而支链通过第六碳原子以β-1,6糖苷键与主链相连，形成“树枝”状支叉结构。粮食的糯性与非糯性由淀粉的组成和性质决定。第二十三页，共六十二页。精选课件一、淀粉的主要性质：水溶性：直链淀粉不溶于冷水，可溶于热水，支链淀粉常压下不溶于水，在加热并加压时可溶解于水。醇溶性：不溶于浓度在30％以上的乙醇溶液。水解性：在酸或酶的作用下可以水解为葡萄糖。旋光性：淀粉水溶液具有右旋性，[α]为(+)201.5~205。淀粉的糊化：淀粉粒在适当的温度下（55℃以上），在水中突然溶胀、分裂，形成均匀的糊状液。“α-化”淀粉的老化：淀粉溶液在低温下静置一段时间后，溶液变混浊，甚至沉淀(chéndiàn)。“β-化”淀粉的吸附特性：吸附有机溶剂、吸附碘等。第二十四页，共六十二页。精选课件二、食品中的淀粉来源及含量来自原料作为添加剂加入。填充(tiánchōng)剂、稳定剂、增稠剂、品质改良剂等链长（葡萄糖残基数颜色链长（葡萄糖残基数颜色<12无35~40紫12~15棕>45蓝20~30红淀粉(diànfěn)与碘复合体颜色反应第二十五页，共六十二页。精选课件几种主要粮食中的淀粉(diànfěn)含量各种粮食淀粉(diànfěn)中直链淀粉(diànfěn)含量粮种淀粉含量（%）小麦58~76大麦56~66糙米75~80高粱69~70玉米60~70红薯16马铃薯13~23豌豆21~49大豆2~9淀粉种类直链淀粉（%）大米17糯米0玉米（普）26甜玉米70糯玉米（腊质）0高粱27小麦24燕麦24豌豆（绉皮）70甘薯20马铃薯17*以干物质(wùzhì)计第二十六页，共六十二页。精选课件三、淀粉的测定方法酸水解法、酶水解法、沉淀法、碘结合法（直链淀粉的测定）（一）酸水解法1.原理样品经乙醚除去(chúqù)脂肪，乙醇除去(chúqù)可溶性糖类后，用酸水解淀粉为葡萄糖，按还原糖测定方法测定还原糖含过，再折算为淀粉含量。2．适用范围及特点此法适用于淀粉含量较高，而半纤维素和多缩戊糖等其他多糖含量较少的样品。方法操作简单、应用广泛，但选择性和准确性不及酶法。第二十七页，共六十二页。精选课件3测定方法（1）样品处理固体样品→粉碎→称样→脱脂→去可溶性糖→转移蔬菜等样品→捣碎→称样→脱脂→去可溶性糖→转移（2）水解样品悬浮液→水浴(shuǐyù)回流水解2h→冷却→加甲基红→调pH至6.2以上（黄色）→调pH至4.2以下（红色）→调pH至7→沉淀杂质（蛋白质、果胶等）→脱铅→定容→过滤，收集滤液

空白试验（3）测定按还原糖测定方法进行。第二十八页，共六十二页。精选课件4结果计算（1）高锰酸钾(ɡāoměnɡsuānjiǎ)法（2）直接滴定法第二十九页，共六十二页。精选课件（二）酶水解(shuǐjiě)法1．原理样品经除去脂肪和可溶性糖类后，在淀粉(diànfěn)酶的作用下，使淀粉水解为麦芽糖和低分子糊精，再用盐酸进一步水解为葡萄糖，然后按还原糖测定法测定其还原糖含量，并折算成淀粉含量。2.适用范围及特点本方法不受半纤维素、多缩戊糖、果胶质等多糖的干扰，适合于这类多糖含量高的样品，分析结果准确可靠，但操作复杂费时。3.试剂碘试剂、淀粉酶第三十页，共六十二页。精选课件4测定方法（1）样品处理称样→脱脂→去可溶性糖→定容，过滤（2）酶水解滤液→糊化→冷却→加酶水解→验证水解程度→加热杀酶→冷却→转移定容→过滤（3）酸水解滤液→水浴回流水解1h→冷却→加甲基红→调pH值→转移定容（4）测定(cèdìng)按还原糖测定方法进行。5结果计算第三十一页，共六十二页。精选课件糊化淀粉总量的测定淀粉淀粉溶液直链淀粉和支链淀粉的线性及分支的水解片段D－葡萄糖显色1.葡萄糖氧化酶2.过氧化氢酶反应并发色葡萄糖淀粉酶α－淀粉酶第三十二页，共六十二页。精选课件（三）旋光法1原理淀粉具有旋光性，在一定条件下旋光度的大小与淀粉的浓度(nóngdù)成正比。用氯化钙溶液提取淀粉，用氯化锡沉淀提取液中的蛋白质，测定旋光度，通过计算得淀粉含量。2应用范围及特点本法适用于淀粉含量较高，而可溶性糖类含量很少的谷类样品，如面粉、米粉等。方法操作简便、快速。第三十三页，共六十二页。精选课件2测定方法样品粉碎(fěnsuì)→称样→加水→加氯化钙提取→煮沸15min→冷却→转移→加氯化锡沉淀杂质→定容（以氯化钙溶液）→过滤→测旋光度3结果计算（四）肉制品中淀粉的测定（五）直链淀粉的测定第三十四页，共六十二页。精选课件淀粉溶液/悬浮液直链淀粉和支链淀粉的线性片段麦芽糖此值与完全糊化的淀粉所得的值相比较分支酶β－淀粉酶还原糖测定淀粉糊化度测定第三十五页，共六十二页。精选课件§1.4纤维(xiānwéi)的测定纤维是植物性食品的主要成分之一，广泛存在于各种植物体内，其含量随食品种类的不同而异，尤其在谷类、豆类、水果、蔬菜中含量较高。“粗纤维”用来表示食品中不能被稀酸、稀碱所溶解，不能为人体所消化利用的物质，包括食品中部分纤维素、半纤维素、木质素及少量含氮物质，不代表食品中纤维的全部内容。“膳食(shànshí)纤维”是指食品中不能被人体消化酶所消化的多糖类和木质素的总和。它包括纤维素、半纤维素、戊聚糖、本质素、果胶、树胶等。“膳食纤维”比“粗纤维”更能客观、准确地反映食物的可利用率。第三十六页，共六十二页。精选课件一、粗纤维的测定(cèdìng)（重量法）1原理样品在热的稀硫酸作用下，水解除去样品中的糖类杂质干扰，经热的氢氧化钾处理，除去蛋白质、脂肪干扰。再用乙醇印乙醚处理以除去单宁、色素及残余的脂肪，所得的残渣即为粗纤维，如其中合有无机物质，可经灰化后扣除。2适用范围与特点适用于各类食品，是应用最广泛的经典分析法。方法(fāngfǎ)操作简便、迅速第三十七页，共六十二页。精选课件3测定方法（1）样品酸解称样20~30g（5.0g干样）→锥形瓶加1.25%硫酸200ml（预先煮沸）→锥形瓶加热回流30min（保持微沸）（2）过滤，沸水洗涤（3）碱解滤渣+1.25%氢氧化钾200ml（预先煮沸）→锥形瓶加热回流30min（保持微沸）（4）过滤，沸水洗涤（5）乙醇洗涤、乙醚(yǐmí)洗涤（6）烘干（105℃）至恒重（7）灼烧（550℃）至恒重第三十八页，共六十二页。精选课件4结果(jiēguǒ)计算第三十九页，共六十二页。精选课件二、中性(zhōngxìng)洗涤纤维（NDF）的测定1原理样品经热的中性洗涤剂浸煮，水洗去除蛋白质、游离淀粉、矿物质，加入淀粉酶水解结合态淀粉，再经水、丙酮洗涤去除脂肪、色素等，残渣经烘干即为中性洗涤纤维。2适用范围适用于谷物及其制品、饲料、果蔬等样品，对于蛋白质、淀粉含量(hánliàng)高的样品，易形成大量泡沫。粘度大，过滤困难，使此法应用受到限制。所测结果包括食品中全部的纤维系、半纤维素、木质素，最接近于食品中膳食纤维的真实含量(hánliàng)，但不包括水溶性非消化性多糖，这是此法的最大缺点。第四十页，共六十二页。精选课件3测定方法（1）样品处理样品→粉碎→称样→（脱脂）→锥形瓶（2）中性洗涤剂洗涤中性洗涤剂→锥形瓶十氢钠→锥形瓶50mg无水亚硫酸钠→锥形瓶煮沸1h（保持微沸）（3）过滤，沸水(fèishuǐ)洗涤（4）加入淀粉酶，抽滤（5）加入淀粉酶，水解1h（6）抽滤，丙酮洗涤（7）烘干，称量（8）结果计算第四十一页，共六十二页。精选课件三、酸性(suānxìnɡ)洗涤纤维（ADF）的测定1原理样品经磨碎烘干，用十六烷基三甲基溴化铵的硫酸溶液回流煮沸，除去细胞内容物，经过滤、洗涤、烘干，残渣即为酸性洗涤纤维。2测定方法（1）样品磨碎（16目）→干燥（2）称样（3）加入(jiārù)酸性洗涤剂，加热回流2h。（4）过滤（5）水洗（6）丙酮洗涤（7）烘干，称量。（8）结果计算第四十二页，共六十二页。精选课件四、膳食(shànshí)纤维的测定1甲醇回流，去除低分子糖类(tánɡlèi)、色素、脂肪、蜡质等2酶解，乙醇分离去除淀粉水解物3热水抽提水溶性多糖，乙醇沉淀→离心分离→硫酸酸解→碱液中和→测定已糖、戊糖、糠醛酸等，得水溶性非消化性多糖4残渣→酸解→乙醇沉淀→离心分离→水解液中和→测定已糖、戊糖、糠醛酸等，得水不溶性非消化性多糖5残渣→高浓度低温酸解→中和→抽滤分离→水解液中和→测定已糖、戊糖、糠醛酸等，得纤维素6残渣→乙醇洗涤→干燥→灼烧→得木质素含量。7计算多糖含量（%）=已糖×0.9+戊糖×0.88+糠醛酸×0.81膳食纤维（%）=水溶性非消化性多糖＋水不溶性非消化性多糖＋纤维素＋木质素第四十三页，共六十二页。精选课件§2蛋白质含量(hánliàng)的测定§2.1概述蛋白质是一类存在于所有细胞中含量丰富的成分，除了储备蛋白质外，几乎所有的蛋白质对生物功能和细胞结构都非常重要。食品中的蛋白质种类非常复杂，其中很多已经被纯化和定性。蛋白质分子质量的变化范围通常为5000—1000000u，它们包括氢、碳、氮、氧和硫等元素，20种常见α-氨基酸是蛋白质的主要构成。蛋白质可以按照它的成分、结构、生物功能或者溶解特性来分类。如水解简单蛋白质只得到氨基酸，但结合类蛋白质还含有非氨基酸成分。蛋白质有非常独特的构型，它可被各种变性因素，如热、酸、碱、8mol／L尿素(niàosù)、6mol/L盐酸胍、有机溶剂和去垢剂所改变，其溶解性及功能性也可被变性剂所改变。第四十四页，共六十二页。精选课件氮是存在于蛋白质中的特征元素，不同食品中蛋白质的含量相关很大。由于一些食品的组分具有相似的物化性质而使得(shǐde)对蛋白质的分析变得非常复杂。非蛋白氮可能来自于游离氨基酸、小肽核酸、磷脂、氨基糖、嘌呤以及某些维生素、生物碱、尿酸、脲和氨基离子，因此，食品中的总有机氮主要来自于蛋白质，小部分来自于非蛋白质组分的有机氮。食品中其他主要成分包括脂类和碳水化合物可能会干扰食品蛋白质的分析。目前已建立和完善了大量测定蛋白质的方法。这些方法的基本原理包括利用蛋白质的氮、肽键、芳香族氨基酸和紫外吸收性质以及游离基、光散射性质和染色结合能力。第四十五页，共六十二页。精选课件蛋白质分析的重要性

(1)生物活性测定一些蛋白质包括酶或酶抑制因子和食品科学与营养有关，例如肉类嫩化中的蛋白酶、水果成熟中的果胶酶以及豆类中的胰蛋白酶抑制因子都是蛋白质。(2)功能性质调查不同种类食品中的蛋白质都有其独特的食品功能性质，例如小麦面粉中的麦醇溶蛋白和麦谷蛋白具有成面团性，牛乳中的酪蛋白在干酪制作(zhìzuò)中具有凝结作用，而鸡蛋卵清蛋白具有起泡能力。(3)营养标签①总蛋白质含量；②氨基酸组成；③混合物中的特定蛋白质的含量；④蛋白质分离纯化过程中的蛋白质含量；⑤非蛋白氮；⑥蛋白质的营养价值(消化率、蛋白质功效比或氮平衡)。第四十六页，共六十二页。精选课件食品(shípǐn)中蛋白质的含量

食品种类

蛋白质的百分含量食品种类

蛋白质的百分含量大米(糙米)大米(白米)小麦粉(整粒)玉米粉(整粒)意大利面条玉米淀粉

7.97.113.76.912.80.3大豆(成熟、生）豆(腰子状、生)豆腐(生、坚硬)豆腐(生、普通)36.523.615.88.1第四十七页，共六十二页。精选课件乳制品牛乳(全脂，液体)牛乳(脱脂、干)切达干酪酸奶(普通的、低脂)水果和蔬菜苹果(生、带皮)芦笋(生)草莓(生)莴苣(冰、生)土豆(整粒、肉和皮)

3.336.224.95.3

0.22.30.61.02.1肉、家禽、鱼牛肉(颈肉、烤前腿)牛肉(腌制、干牛肉)鸡(可供煎炸的鸡胸肉、生)火腿(切片、普通的)鸡蛋(生、全蛋)鱼(太平洋鳕鱼、生)鱼(金枪鱼、白色、罐装、油浸、滴干的固体)

18.529.123.117.612.517.926.5第四十八页，共六十二页。精选课件

测定蛋白质的方法可分为两大类：一类是利用蛋白质的共性，即含氮量、肽键和折射率等测定蛋白质含量；另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性和碱性基因(jīyīn)以及芳香基团等测定蛋白质含量。常用的方法为凯氏定氮法（粗蛋白质测定）此外，双缩脲法、染料结合法、酚试剂法、NIR法等也常用于蛋白质含量测定，因其方法简便快速，多用于生产单位质量控制分析。氮基酸总量测定通常采用酸碱滴定法，目前HPLC、氮基酸分析仪也已得到广泛使用。第四十九页，共六十二页。精选课件§2.2蛋白质的测定一、常量凯氏定氮法1原理(yuánlǐ)样品中的蛋白质和其他有机成分在催化剂存在下，被硫酸消化，总有机氮转化成硫酸铵，在碱性条件下转化为氨，通过水蒸汽将氨蒸馏至硼酸溶液中形成硼酸铵，用标准酸溶液滴定，测出样品转化后的氮含量。由于非蛋白组分中也含有氮，所以此方法的分析结果为样品中的粗蛋白含量。第五十页，共六十二页。精选课件2NH2(CH2)2COOH＋13H2SO4＝(NH4)2SO4+6CO2＋12SO2＋16H2O2NaOH＋(NH4)2SO4＝2NH3+Na2SO4+2H2O2NH3+H3BO3

＝(NH4)2B4O7+5H2O(NH4)2B4O7

+5H2O+2HCl＝2NH4Cl+4H3BO3第五十一页，共六十二页。精选课件2主要(zhǔyào)仪器第五十二页，共六十二页。精选课件3测定方法（1）消化（2）蒸馏(zhēngliú)（3）滴定4结果计算

蛋白质含氮量%换算系数

蛋白质含氮量%换算系数蛋或肉16.06.25燕麦17.155.83牛乳15.76.38大豆17.515.71小麦17.545.70大米16.815.75玉米16.06.25花生

18.32

5.46第五十三页，共六十二页。精选课件二、微量凯氏定氮法1测定原理同凯氏定氮法2主要(zhǔyào)仪器第五十四页，共六十二页。精选课件3测定方法（1）样品处理精密称样（约相当氮30～40mg）→100ml定氮瓶固体样品0.2～2.0g半固体样品2～5g液体样品吸取10～20ml

加入催化剂、硫酸0.2g硫酸铜，3g硫酸钾、20ml(一般用5ml)硫酸，硒催化剂1g、5ml硫酸小心加热，至无泡沫产生(chǎnshēng)大火消化，至液体呈蓝绿色澄清透明，再继续加热0.5h。取下放冷，小心加20ml水。转移至100ml容量瓶中，加水定容。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。第五十五页，共六十二页。精选课件（2）按装定氮装置水蒸气发生瓶内装水至约2/3处，加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，加入数粒玻璃珠以防暴沸；加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。（3）蒸馏吸收接收瓶内加入10ml(一般用30ml)2%硼酸溶液及混合指示液1滴，并使冷凝管的下端插入液面下；吸取10.0ml样品消化稀释液由小玻杯流入反应室，并以10ml水洗涤小玻杯使流入反应室内，塞紧小玻杯的棒状玻塞。将10ml40%氢氧化钠溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其缓缓流入反应室，立即(lìjí)将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏。蒸馏5min，移动接受瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸馏1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。第五十六页，共六十二页。精选课件（4）滴定取下接收瓶，以0.05000mol/L（一般用0.01000mol/L）盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。

同时吸取10.0ml试剂空白消化液作空白试验5结果计算X——样品中蛋白质的含量，%；

V1——样品消耗(xiāohào)盐酸标准液的体积，ml；

V2——试剂空白消耗盐酸标准液的体积，ml；

N——盐酸标准溶液的当量浓度；

0.014——1mol/L盐酸标准溶