13种伞形科中药抗氧化能力研究

13种伞形科中药抗氧化能力研究

作者：潘海宇，韩刚，姜辉，王传美

【关键词】超氧自由基；抗氧化；伞形科；化学发光法

摘要：目的对13种伞形科中药的抗超氧阴离子(O2)能力进行了研究。方法采用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶-鲁米诺化学发光体系测定了中药乙醇提取物对O2自由基的清除作用。结果羌活对超氧自由基清除能力最强。结论13种伞形科中药对超氧自由基均有清除作用。提取液的加入量与抑制O2自由基的能力呈现明显量效关系。

关键词：超氧自由基；抗氧化；伞形科；化学发光法

StudyonAntioxidationofUmbelliferaeChineseHerbs

Abstract：ObjectiveTheabilityofantioxidationfor13kindsofUmbelliferaehasbeenantioxidantactivitiseoftheethanolextractionsof13UmbelliferacChineseherbmedicineweremeasuredbychemiluminescence.ResultsTheabilitythatscavengessuperoxideradical(O2)wasNotopterygiumforbesiiBoiss.Conclusion13kindsofUnbelliferaeChineseherbmedicinescanscavengesuperoxideradical.

Keywords：Superoxidefreeradical;Antioxidation;Umbelliferae;Chemiluminescence

随着自由基医学的发展，人们认识到多种疾病与自由基有关。机体在代谢过程中产生超氧阴离子自由基，过量的超氧阴离子自由基如不及时清除，在体内积累会产生细胞毒性［1］，破坏生物膜的结构和功能，引发多种疾病。寻找抗自由基活性成分的研究非常活跃［2］。我国植物资源非常丰富，许多中药有抗自由基作用［3］。我国约有伞形科植物95属，600种，已知药用的有230种［4］。伞形科植物常含挥发油、香豆素、三萜及黄酮类化合物。自古以来伞形科植物多用于活血，美白等方剂中。本研究对13种常用伞形科中药的乙醇提取液进行了抗超氧自由基能力的研究，为筛选抗衰老药物奠定基础。

1仪器与材料

仪器FA4000电子天平，WDD2型发光仪，KDC1042离心机，电热恒温水浴锅，PHS3C型酸度计。

试剂鲁米诺，黄嘌呤，黄嘌呤氧化酶购自Sigma公司，Vc购自北京双旋微生物培养基制品厂，其余试剂均为分析纯。

中药材羌活Notopterygiumforbesiiboiss，川芎LigusticumchuangxiongHort，柴胡BupleurumfalcatumL.，独活Angclicapubescensmaxim.，蛇床子Cnidiummonnieri(Li)Cusson，小茴香FoeniculumVulgareMill.，当归AngelicaSinensisdiels，北沙参GlehniaLittoralisFR.，白芷AngelicaDahuricabenth.Hook，藁本LigusticumsinenseDuver，白花前胡PeucedanumpraeruptorumDunn，防风Saposhnikoviadivaricata，川党参CodonopsistangshenOliv［5］以上中药材均购自河北安国中药材市场，经药学系生药教研室鉴定，符合2000版药典标准。

2方法与结果

中药提取液的制备取中药材适量，粉碎，干燥器中干燥1d，过40目筛。准确称取10g中药粉末，于回流装置中，加入95%乙醇50ml，电热套加热，两次回流提取；第1次回流2h，第2次回流时乙醇用量与加热时间均减半。合并两次提取液，3000r・min1离心5min，取上清液于100ml容量瓶中定容，作为样品测试液。另取Vc配成5mmol・L1作为对照液备用。

清除超氧自由基作用采用黄嘌呤黄嘌呤氧化酶鲁米诺产生O2自由基的发光体系进行测定［6］。在发光杯中依次加入pH=，1mol・L1Na2CO3NaHCO3缓冲溶液ml,1mmol・L1鲁米诺50μl,1mol・L1黄嘌呤200μl，中药提取液适量，最后加入mol・L1黄嘌呤氧化酶启动反应，记录10s积分发光强度。以Vc做对照。同上述方法以不加中药提取液做空白测定10s积分发光强度，重复上述测定。

乙醇提取物对O2自由基的抑制率抑制率=/I0×100%式中I0为空白发光强度，I为样品发光强度。样品对O2自由基的清除能力，一般用抑制率为50%时的样品加入量IC50来表示。IC50越小，对自由基清除能力越强。13种伞形科中药醇提取物对O2自由基的清除能力见表1。

表1不同用量乙醇提取物对O2的清除作用

［1］SimonianNA,CoyleJT.OxidativeStressinneurodegenerativedisease［J］.AnnuRevpharmacolToxicol,1996,36:83.

［2］丁长海.抗氧化自由基药物研究进展［J］.中国药理通报，1992，8；21.

［3］段凤莲，赵克然.宁玉，等.中药清除氧自由基近况［J］.中国中药，1999，24：106.

［4］郑少臣，蔡少青.药用植物学与生药学［M］.北京：人民卫生出版社，2004:354.

［5］韩立，徐国钧.汉拉英中草药名称［M］.福州