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文档简介
糖类蛋白质脂肪的鉴定演示文稿本文档共21页;当前第1页;编辑于星期二\5点9分糖类蛋白质脂肪的鉴定本文档共21页;当前第2页;编辑于星期二\5点9分思考题:1、糖类、脂肪、蛋白质鉴定的实验原理2、常见的还原糖有哪些?取材的要求3、斐林试剂的组成,使用时的注意事项4、双缩脲试剂的组成,使用时注意事项5、斐林试剂和双缩脲试剂的比较6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色?借助什么来观察?8、如何鉴定淀粉,颜色反应如何本文档共21页;当前第3页;编辑于星期二\5点9分1.实验原理:化学试剂+有机化合物→特定的颜色(1)还原糖+斐林试剂水浴加热砖红色沉淀(2)脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色(3)蛋白质+双缩脲试剂→紫色本文档共21页;当前第4页;编辑于星期二\5点9分2、常见的还原糖有哪些?取材的要求还原糖:可被氧化充当还原剂的糖。(常见的有:葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖)
注意:蔗糖不是还原糖3、斐林试剂的组成,使用时注意事项斐林试剂:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液使用注意事项:等量混合,现配现用(
NaOH+CuSO4)本文档共21页;当前第5页;编辑于星期二\5点9分1.点拨:还原糖+斐林试剂砖红色沉淀
可溶性还原糖与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。(放在盛有50-65℃温水的大烧杯)水浴加热颜色变化:浅蓝色棕色砖红色本文档共21页;当前第6页;编辑于星期二\5点9分1步骤:样液制备:(取材5g,加入石英砂和
5ml水)(1)取样液2ml于试管中(2)加入新配制的斐林试剂1ml(甲液和乙液等量混合均匀后再加入)盛有50-65℃温水的大烧杯)
(3)水浴加热2min左右((4)观察颜色变化(浅蓝色→棕色→砖红色)本文档共21页;当前第7页;编辑于星期二\5点9分注意事项:(1)材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果》梨》白萝卜。
思考:西瓜、甘蔗、甜菜可以吗?为什么?(2)试剂:斐林试剂(等量混合、现配现用)
甲液:0.1g/mL的NaOH溶液
乙液:0.05g/ml的CuSO4溶液本文档共21页;当前第8页;编辑于星期二\5点9分4、双缩脲试剂组成,使用时注意事项本文档共21页;当前第9页;编辑于星期二\5点9分双缩脲试剂组成:A液:0.1g/mL的NaOH溶液B液:0.01g/mL的CuSO4溶液使用注意事项:先加A液1mL于样液中,再加B液4滴于样液中(1)蛋白质+双缩脲试剂→紫色
本文档共21页;当前第10页;编辑于星期二\5点9分2步骤:(1)试管中加样液2mL(2)加双缩脲试剂A液1mL(造成碱性环
境),摇匀(3)加双缩脲试剂B液4滴,摇匀(4)观察颜色变化(紫色)
注:①样液浓度不宜过高,以免实验后黏住试管壁,洗不干净。②B液不能过量,多余的B液会与A液反应成蓝色,而掩盖生成的紫色。本文档共21页;当前第11页;编辑于星期二\5点9分斐林试剂
双缩脲试剂
甲液乙液A液B液成分
鉴定物质
添加顺序方法反应条件反应现象
5.比较斐林试剂和双缩脲试剂0.1g/mLNaOH同甲液0.01g/mLCuSO40.05g/mLCuSO4还原性糖蛋白质等量混合后再加入先加A液1mL,摇匀,再加B液4滴50-65℃水浴加热砖红色沉淀紫色络合物不需加热,摇匀本文档共21页;当前第12页;编辑于星期二\5点9分6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色?借助什么来观察?本文档共21页;当前第13页;编辑于星期二\5点9分3.脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色本文档共21页;当前第14页;编辑于星期二\5点9分(2)步骤材料的选取:含脂肪量高的组织,如花生的子叶。①取材:取一粒浸泡过的花生种子,去掉种皮②切片③制片:(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央④染色:滴2~3滴苏丹Ⅲ染液,染色3min,用吸水纸吸去染液,再滴体积分数50%的酒精洗去浮色,再用吸水纸吸去多余的酒精(苏丹Ⅲ易溶于酒精中,避免影响实验结果),滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片⑤镜检观察:光学显微镜对光→低倍镜寻找着色圆形小颗粒→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒本文档共21页;当前第15页;编辑于星期二\5点9分8、如何鉴定淀粉,颜色反应如何本文档共21页;当前第16页;编辑于星期二\5点9分
用试管取2mL待测组织样液,向试管内滴加1~2滴碘液,观察颜色变化。4、淀粉+碘→蓝色加1~2滴碘液本文档共21页;当前第17页;编辑于星期二\5点9分1.鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂A.斐林试剂B.双缩脲试剂C.苏丹Ⅲ染液D.苏丹Ⅳ染液2.能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是A.淀粉B.果糖C.蔗糖D.纤维素3.下列哪个实验用到显微镜()A可溶性还原糖的鉴定B.蛋白质的鉴定C.脂肪的鉴定D.淀粉的鉴定ACB本文档共21页;当前第18页;编辑于星期二\5点9分4.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液颜色的变化过程为()A.无色一砖红色(沉淀)B.浅蓝色一砖红色(沉淀)C.浅蓝色一蓝色一砖红色(沉淀)D.浅蓝色一棕色一砖红色(沉淀)5.下列物质中,能被苏丹IV染液染成红色的是()A马铃薯块茎B.浸软的蓖麻种子C.蛋清液D.苹果DB本文档共21页;当前第19页;编辑于星期二\5点9分6.还原糖的实验中,加入斐林试剂时必须要A.先加入斐林试剂甲液,后加入乙液B.先加入斐林试剂乙液,后加入甲液C.将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再加D.以上A、B、C三种操作方法都正确7.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂正确做法是A.先加A液,混合后再加B液摇匀观察B.先加B液,混合后再加A液摇匀观察C.A、B液混合后加入,摇匀后观察D.A、B液同时加入
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