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文档简介

原交H用DNA探针与组的DA杂交过反因况。章病理检验技术概述病理学的作用:1、研识律2、为临床诊断疾预。:----病的方法称为病理检验。一、病理检验的主要任务(一)确定疾病的诊断)择案据供息)解疗效料)临水务病分类针)(二)组织验-断验三尸剖验理技:术是中之”第二节、病理检验技术常规工作发作取剖作片资理索物仪护大体标本的收集和制作章术P9常规石蜡切片制作程序1/8片察节组织块的处理组作种:1、取材;2;4、浸蜡;5、切片、贴片(:6、封片:长期保。一取材:-----切片过程。注意:向液固定使胞尽活时的形态结构和位置过程。(一)固定目的:(1);(2);(3);(4观辨。

生理或10%。4物、;(三)固定液的特性:1部2胀3置4率(四)组织固定注意事项:二固定方法: 1定1;2或的;3固,组要固质用

2、固定容大3的1020倍4、防止组形5的间(五)组织固定液固:1%甲醛(的4%醛1份加水9份混;2用%数用9;3。4、酒-(F固定液:5ener固液:1、4林:久置能产生醛。2/8固定陈旧多血。2、精醇:高用80%再用9%;%。中甲醛液配置:4醛1500m蒸水800-5m二钠g二钠1g。常用的固定液。:1;2液3、醋酸:不,酸pH23可抑制细菌和;4;5、氯化汞:只宜固定薄片组织m~m厚定68小时;6;7、锇酸:浓为1~电;:在脱成4mm厚充后行钙。组织脱钙的方法及应用:(一)酸性溶液脱钙:1:(1)%~1%酸5mll蒸至100m;(2酸1ml,%林l;(3)Schde液:浓硝酸20l,10%林1l。全;(4)%~1%酸5ml~1l至100ml(5)。(6)Pla-co液比5%硝酸液快3。Jekins混等2。(二)螯合剂脱钙:速度很慢,但对组。1脱(EAg于200l蒸馏水中(NO)调整H至0(大约加2.5gNHDA与。2要~8有。:此。1:2%酸50ml,%酸200ml水750m;2径30cm电解量将在一个四周多孔容器3/8解,通入V直度A~2A调节两电极的距离来控制超0~5,般~6小时即可脱尽。理1、脱洗42小时,除去残留的脱钙剂;2;3;4加%~%之粘牢固。三、洗涤、脱水、透明(一)组织的洗涤1、洗涤的目的:防止组织中留有较多的固定液而影响脱水;2:(1(%大组织洗4小洗~4小。(2)略酒洗。)组织脱水1石火的。2:;剂二蜡;。剂二蜡;脱织价。:水价。脱。。。透作。(三)组织透明或媒浸浸。1以0。2。3。4。4/8四、组织浸蜡(透蜡)P48(一)浸蜡的目的明。(二)浸蜡剂的种类:1经6~8存可靠,为3-4小时。2、火棉胶:目前使。;4。组织包埋P49石:包。1规法;2。(二)快速石蜡包埋法:10~0分完成(1片m0.mⅹ0.3cm,在快固液9%甲沸~2分钟(度不超1.5酮5~l沸~6分钟3热~2分钟(4):埋却。3包为3℃和左为1500和4000两种。于脂的。4、明胶包埋:5。6。节切片器具与切片机片备。(一)切片机的种类及使用:1、石蜡切片机:式最旋。2、冷机:多为恒冷箱。3:多达20µm~50µ。、切刀P58(一)切片刀的种类:其般有4mm1mm、2cm2m等。1蜡。2双两无面。3用。4。刀制料制两种。)与:1、手工磨刀:刀试石;滴;从到左5/8全磨完。2、被刀:用;作 P60(一)切片前的准备:然冷;毛弯;占23;片节2~8)(6-;速片 P3过m正至1.mm左,,埋蜡却可材、。经9%水即速色。冻作 P4,。、备求:置:1;2导;冷:过冷。冰冻切片机制程(一)取材、固定:选取有代表性的组织制片,厚度1m显和理荧体,用织冻后行、化定。(二)冷冻切片方法:1法(1)前~3小温度:)淋、肾睾丸、甲子巢、、腺

1-6122--8(2用T冻1~2分;(3;(4)为4µm~8µ展,;(5)切片。6/82法3碳法(三)冷冻切片粘片法1:过0%和后即染色。2Llie入%%甲醛水溶定5分钟,水洗0分钟。3、酒精明胶入0.1或0.7%用4%玻片捞起后,仿1分经%和7精即染。三、注意事项1;2入0水析造坏;3埋;4;5片;6、一般来说。察第七章组织切片染色技术第一节病理片色概述P68组理使不上色产不同于。三、染色的原理染色。酸的碱物酸性核胞性伊红染色。(二)染色的物理作用:12面上过程3。:或物1;2。)的:1、据染料来源:天然、合成染料和无机物2、根据染料化学反应:酸性、碱性和中料3、据染色对:(1:7/81:;2);(2等。五、常用染色术语的概念一、普最的-称E染。定。单选染。料。染以法。节染色前后的处理P74染的:1、脱蜡至水(%、%、8%、%过。2、脱切片在用0.2%~0.5%碘酒精处理5~15分钟,使汞盐沉淀物溶解。3用Verocay%氢氧化钾水液1l%精100ml)处理0分洗5分钟。(二)染色后的处理:1、分化作用用1酸附。2。3、染色后的脱水:低度到高度酒精逐步。4。:1:(1)剂配制胶10g水60ml油70m酸0.2g温。(2中液固,接。七、染色的注意事项(1)作(2);(3)。章组织切片常染色技术第一节常规染色的概念染理染铝的蓝色色精,带正色氢色木液以胞被染蓝。(二红Y红Y使8/8中正电染或胞。制 P80(一)苏木素液:从苏木素的树中提炼的天然染料。1、Haris苏液常。素 g 水 0l精 0l 汞 g钾 2g配置方书1页色34分。:0%伊液红Y0.5g5酒精100m间13分钟。性酒:沉淀酸红Y酒精液:2、Mayr苏木素改良配法:(1A液:苏木素g精40ml加热溶解;(2B液铝钾100,水600稍加热使硫酸铝钾在水中溶解,将A与B液混合2分钟足600l加入400mg碘。为1~0。3、Ehrlh苏木素素2g精10l,甘油100m钾1g蒸水100醋酸10ml染为0~0。4ll改良苏素g精250ml钾17.g水750m,碘酸钠0.2,酸2l。染色时间为5分钟。).%~%:酸0.5~1l,75%精99ml分间。四蓝液弱体的。1、5水(%氢氧)3水100m水1l。法P83(一)人工操作苏木素:1脱:(1蜡5;(2)二(5;(3)(2分;(4)95%精1分钟;(5)85%精1分钟;(6)75%精1分钟;(7)洗2分钟;2、苏木素染色5-10分钟;自来水洗1分钟;3.%~%盐酸酒精至0分钟呈紫红色水1分钟水0℃)蓝化~5分(化0秒,洗0钟);9/84、伊红染色,1分钟洗1分钟;5、脱水、透:(1)85%0秒;(2)95%(1分;(3)1;(4)二(12分钟;(5)二(12分钟。6、固:(1);(2)。(二片HE染色:用%酒精和酸5ml的混合定1洗0~1,E染色。切、E色节染色中常见问题及注意事项P85HE染:;。章组织切片特殊色P87胞。节色8、胶维色VnGiesn染色(称VG染色(书)1染:(1)铁苏见Masson色色(2)Vanin苦液::12液9ml,液:1%液10m。。2染:(1)水蒸水洗(3)Weigert铁苏染50钟(4)洗2钟(5)据用0.5%酸化(6)自来水洗(7)VanGin液色~5钟(8用9%水(9)水0透明(11)胶封。3、染色,肌色,细核黑.10/184维用8(1);(中含量与分的;(3);(4)。、网状纤维染色Gomoi银染法:21银10.2g水100m液氢纳3.1g,蒸馏水10l2、染1(钾0.5g水95m,加%酸5ml)5钟()洗1钟()2漂白2分钟水洗2钟()2%染2钟()洗)银色1分()洗3(920%原5分钟(1)蒸馏水洗21)入0.2%化金液调色2分钟馏水洗2次(122固定2钟(3用G(4(5甲苯透(1。3。4维用(1)区分上;(2);(3);(4)。四、多色:P93(一)Masn三色:P31染:(1红0.7g红0.3g酸1l水99m先好醋酸溶绿1.0g酸l水99l。(2)蓝g,醋酸2ml至100ml。(3)Weigert铁苏木素素1g,9%精100ml液氯化铁液4l酸1ml水l4小用)2、Masson三色的染色步骤:(1;(2)Weigert铁苏色50分;(3)稍(;(5);(6色5;(7;(8)%理5分钟,镜下见肌肉纤维呈红;(9)不经染5分钟;11/18(101%理1分钟;(11%无;(12)二甲(1封。3、染色结果:胶原纤维呈蓝色(用苯胺)色亮,蓝。(二)May三色染色法P41染:(1)0.5;(2)苯黄G液:苯胺蓝0.5黄G2g,酸g水100ml将%磷钨酸黄滤,存合。(3);2染:(1)切片脱蜡至水(Znkr固定液固定1;(3)充分水()05处理50分钟;(5)0.5理25分钟;(6)充分水;(7)染5(8;(9)苯黄-G液染0~0分钟;(10接%酒精快速化;(11)()二苯明;(13)胶封。3、染色结果:胶原纤维、网状纤维呈蓝纤,色色。组色用(1;(2);(3)鉴别某些断(4)用于。节肌肉组织染色P5(一Malory磷钨酸苏木素染色法(简称PTAH:1制(1素0,酸2,水10ml。入20ml蒸馏中于80ml蒸冷却后置33月后使用。此液可保存数年。急钾0.1g促成熟2~4小用。(2):液5l;05硫酸水液50。12/182染:(1)以Zenkr液固定最佳;如用甲醛固定则先要用Zenkr液处理(℃温箱内3小时;(2)切片用9%;(3)充分水(理50钟(5)洗2分钟)%白1分钟;(7洗2;(8染~8;(9)用95%(水;(11)二甲(1封。3、染色结果:横纹肌纤维、细胞核呈紫,、色。4肉色常用于Mallory磷钨酸苏木素染:()横纹肌纤;)诊;)用,)用。节色P6丹染法:(书)1染:(1Ⅲ0.15g,60~%精100l于60%~%精用上密容器备。(胶5油35,水35l热溶解,再混加~2粒石炭后4℃保存,用时。2:(1厚81;(2)3)Hs苏素12分钟;(4;(5))%;(7)苏液30~0分钟(如置于6℃;(8)70%9蒸;(10)在空1)甘油明胶液。3挥发。在封固放置6切不应相。4、染色结果:脂肪呈橘红色,脂肪酸不,淡。5肪用13/18(1);(2)。(3)。(胞胞别。节糖原染色与粘液色过染S法:81染:(1)过酸0.5g水100g放4℃冰。(2Scif液性红1g1mo/L盐酸20m重水200l。(先水200ml煮沸,加入g碱性沸2分钟至50加1mol/L的盐酸20ml降至25g~1.5g,室2小时后碱带5活炭g~1.,于棕色磨口瓶内,入。2染:(1)切片脱蜡至水(馏(3%过氧化液0~0分;)水洗(入Schiff色10于5可(洗0分钟;(7用Mayer或Hars明矾苏木核35分钟(8(9水;(10)()二苯明(1。3、染色结果它PS反应质色成。4原用(细的贮尿某细断。(中的。(肉胞结。(4)。液色称AB染P91染:(1)B(H)奥辛蓝8GS水97ml酸3l酚2好3%冰醋酸,然后溶蓝后pH值2.5~3.0间.(2)0.5%液:红0.5至1ml。2:(1)B液染色2~0;(3)快速蒸馏水洗(0.5%染~2分;(5);(6)95%;(7)8。14/183、染色结果:酸性粘液物质(及真菌菌隐膜性混合呈,呈。4液用(1)、黏纤;(2)。节病色0品染:11染:石炭红1g,精10,石炭(%液100。前。2菌:(1;(2)染5~0分钟;(3;(4)%;(5)蒸馏水()1染2分;(7)95%;(8)无水酒精脱水(;(10)性。3果菌杆菌呈细淡。4用用于结核病麻(点较(为风。物书)Bennhola刚果红染色法:1、染色配制:(1)%:红g,蒸馏水100l。(2)锂125g,蒸馏水100l。2、染色结果:淀粉样物质呈红色,其它组织呈浅红色,细胞核呈蓝色。3、Bennhola刚果红染色步骤:(1;15/18(2)明核35分钟;(3)%液洗12分钟;(4)充分水洗返蓝(;(6)%色0~0分钟或;(7)经理12分钟;(8)80%;(9)洗1~2分钟;(10%;(11)二甲(1封。4、淀粉样物质的染色的应用(1):;(2):;(3断:腺胰胞质断;(4据化上瘤、带息等常现淀样变,为断据。黑素染色Masson-Fontana染色法:1、染液配制:(1)Ma

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