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文档简介

课程教学安排理论课46学时,周2~4学时。组织学36学时,胚胎学10学时。实验课应用型第4学期,组织病理学实验。基础型本学期12~15周,20学时。组织学15学时,胚胎学5学时。

请关注教学日历。本文档共71页;当前第1页;编辑于星期三\8点8分课程性质与成绩考核《新乡医学院教学计划(试行)-2015》规定:本科5年制各专业的专业基础必修课。成绩评定方式为考试,考试及格可获2.5学分。课程成绩:70%的理论考试,

20%的基础型实验考试,

10%的平时成绩(实验课出勤、实验报告、学习态度等)。考试时间:理论考试在期末、由学校统一安排。基础型实验考试在实验课结束后进行。本文档共71页;当前第2页;编辑于星期三\8点8分

本文档共71页;当前第3页;编辑于星期三\8点8分第1章组织学绪论本文档共71页;当前第4页;编辑于星期三\8点8分组织学绪论内容简介与目标本节组织学的内容组织学的意义组织学技术简介组织学的学习方法组织学的内容-掌握组织学技术简介-熟悉-了解-了解

课本组织学的内容和意义组织学的发展简史和当代组织学组织学的学习方法组织学技术简介本文档共71页;当前第5页;编辑于星期三\8点8分一、组织学的内容

组织学(histology)是研究机体微细结构及其相关功能的科学。借助显微镜显微解剖学中国解剖学会本文档共71页;当前第6页;编辑于星期三\8点8分(一)显微镜光学显微镜(光镜,lightmicroscope,LM)电子显微镜(电镜,electronmicroscope,EM)样品光镜和电镜的放大原理本文档共71页;当前第7页;编辑于星期三\8点8分普通光学显微镜载物台标本物镜本文档共71页;当前第8页;编辑于星期三\8点8分荧光显微镜滤片滤片本文档共71页;当前第9页;编辑于星期三\8点8分荧光显微镜成像

激光共聚焦扫描显微镜成像本文档共71页;当前第10页;编辑于星期三\8点8分激光共聚焦扫描显微镜光源为激光、共轭聚焦、计算机对图像处理分析。本文档共71页;当前第11页;编辑于星期三\8点8分倒置相差显微镜本文档共71页;当前第12页;编辑于星期三\8点8分透射与扫描电镜的成像原理标本标本本文档共71页;当前第13页;编辑于星期三\8点8分透射电子显微镜扫描电子显微镜本文档共71页;当前第14页;编辑于星期三\8点8分光学显微镜

普通光学显微镜荧光显微镜、激光共聚焦显微镜相差显微镜电子显微镜

透射电子显微镜扫描电子显微镜本文档共71页;当前第15页;编辑于星期三\8点8分1mm=103µm=106nm光镜的放大倍数在千以内电镜的放大倍数在万以上光学和电子显微镜对结构的可分辨性种类结构分辨率度量单位光学光镜结构0.2µm

µm

电子超微结构0.2nm

nm

(ultrastructure)本文档共71页;当前第16页;编辑于星期三\8点8分

组织学(histology)是研究机体微细结构及其相关功能的科学。借助显微镜显微解剖学结构中国解剖学会一、组织学的内容本文档共71页;当前第17页;编辑于星期三\8点8分(二)机体的结构分子

亚细胞细胞

组织

器官

系统生物大分子包括核酸、蛋白质、多糖和脂。细胞器如线粒体等。细胞质、细胞核等。上皮、结缔、肌组织和神经组织。肝、胃等。消化系统、呼吸系统等。生物学解剖学组织学细胞外基质细胞本文档共71页;当前第18页;编辑于星期三\8点8分

组织学(histology)是研究机体微细结构及其相关功能的科学。借助显微镜显微解剖学结构功能中国解剖学会微细光镜结构超微结构一、组织学的内容本文档共71页;当前第19页;编辑于星期三\8点8分二、组织学的意义结构是功能的基础,组织学的发展促进生理学的进步,组织学的学习为生理学打下良好基础。疾病的判断必须以正常为参照,良好的组织学知识为病理学的学习打下基础。

本文档共71页;当前第20页;编辑于星期三\8点8分三、组织学技术简介离体组织研究技术活体组织研究技术

本文档共71页;当前第21页;编辑于星期三\8点8分(一)离体组织研究技术光电镜技术组织化学术组织定量技术本文档共71页;当前第22页;编辑于星期三\8点8分1.光电镜技术离体组织缺陷变腐柔软大块变硬冰冻涂

切5~10μm50~80nm包埋石蜡树脂适应观察策略固定光学显微镜

甲醛电子显微镜

戊二醛锇酸本文档共71页;当前第23页;编辑于星期三\8点8分(1)切片技术光镜标本制作程序:石蜡包埋切片技术本文档共71页;当前第24页;编辑于星期三\8点8分透射电镜标本制作程序:超薄切片技术本文档共71页;当前第25页;编辑于星期三\8点8分离体组织缺陷变腐柔软大块变硬冰冻涂

切5~10μm50~80nm染色化成包埋石蜡树脂适应观察策略结构染料重金属盐固定光学显微镜

甲醛电子显微镜

戊二醛锇酸1.光电镜技术反差小本文档共71页;当前第26页;编辑于星期三\8点8分

(2)显示结构的常用染色法—光镜苏木精-伊红染色

(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色。

染料

组织

名称化学性质色彩化学性质着色部位嗜好苏木精碱蓝酸细胞核嗜碱性

大量核糖体伊红酸红碱大部分成分嗜酸性

特殊染色如硝酸银、甲苯胺蓝、醛复红等。活体染色台盼蓝活体注射。本文档共71页;当前第27页;编辑于星期三\8点8分HE染色嗜酸性嗜碱性本文档共71页;当前第28页;编辑于星期三\8点8分银染硝酸银银离子亲银性银原子嗜银性本文档共71页;当前第29页;编辑于星期三\8点8分甲苯胺蓝染色异染性本文档共71页;当前第30页;编辑于星期三\8点8分铺片、醛复红等和台盼蓝活体染色

本文档共71页;当前第31页;编辑于星期三\8点8分重金属盐醋酸铀和柠檬酸铅电子显微镜染色结果黑白图象高电子密度低电子密度超微结构图

(2)显示结构的常用染色法—电镜本文档共71页;当前第32页;编辑于星期三\8点8分透射电镜结构图本文档共71页;当前第33页;编辑于星期三\8点8分扫描电镜结构图本文档共71页;当前第34页;编辑于星期三\8点8分冷冻断裂技术原理冷冻断裂扫描电镜图

(3)其它的电镜技术本文档共71页;当前第35页;编辑于星期三\8点8分冷冻蚀刻复型技术原理冷冻蚀刻复型透射电镜图本文档共71页;当前第36页;编辑于星期三\8点8分电子显微镜染色结果黑白图象伪彩本文档共71页;当前第37页;编辑于星期三\8点8分离体标本缺陷变腐柔软大块反差小变硬冰冻涂

切5~10μm50~80nm染色化成包埋石蜡树脂透射电镜冷冻蚀刻复型冷冻断裂扫描电镜表面适应观察策略结构染料重金属盐固定光学显微镜

甲醛电子显微镜

戊二醛锇酸1.光电镜技术本文档共71页;当前第38页;编辑于星期三\8点8分2.组织化学术

组织化学术是运用物理学、化学、免疫学、分子生物学等原理,对组织与细胞的化学成分及其变化规律进行定性、定位的技术。

按照运用原理的不同,分为:一般组织化学术免疫组织化学术原位杂交术本文档共71页;当前第39页;编辑于星期三\8点8分(1)一般组织化学术

一般组织化学术是在组织切片上滴加试剂,试剂和组织中的待检物发生化学反应,借助观察最终产物,对待检物定位的方法。

有色物质光镜观察最终产物重金属盐电镜观察本文档共71页;当前第40页;编辑于星期三\8点8分过碘酸(Periodicacid

)希夫(Schiff)试剂PAS反应(过碘酸希夫反应)的原理多糖1)PAS反应显示多糖本文档共71页;当前第41页;编辑于星期三\8点8分PAS反应肝糖原PAS反应小肠黏原颗粒核复染本文档共71页;当前第42页;编辑于星期三\8点8分2)苏丹染色显示脂类

石蜡切片HE染色冰冻切片苏丹染色核复染本文档共71页;当前第43页;编辑于星期三\8点8分

免疫组织化学术(immunohistochemstry)是利用抗原和抗体结合的原理,用标记的抗体检测组织中肽和蛋白质的技术。

抗体的标记物荧光素辣根过氧化物酶胶体金光镜或电镜荧光显微镜电镜(2)免疫组织化学术本文档共71页;当前第44页;编辑于星期三\8点8分免疫组织化学(荧光素标记)本文档共71页;当前第45页;编辑于星期三\8点8分

免疫组织化学(辣根过氧化物酶标记)核复染本文档共71页;当前第46页;编辑于星期三\8点8分

(A胶体金标记B辣根过氧化物酶标记)免疫组织化学电镜像本文档共71页;当前第47页;编辑于星期三\8点8分

原位杂交术(insituhybridization)为利用碱基配对的原则,用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针,检测组织细胞内特定核酸的方法。碱基的标记物放射性核素放射自显影地高辛免疫组织化学术(3)原位杂交术本文档共71页;当前第48页;编辑于星期三\8点8分原位杂交(地高辛标记)本文档共71页;当前第49页;编辑于星期三\8点8分3.组织定量技术显微分光光度术通过测定组织化学术中最终显示物的强度,获得定量信息的技术。图像分析术(imageanalysis)又称形态计量术,是应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析,从而获得立体状态组织和细胞内各有形成分的数量、体积和表面积等参数的技术。体视学(stereology)从组织平面图像,研究三维立体结构的学科。本文档共71页;当前第50页;编辑于星期三\8点8分图像分析仪本文档共71页;当前第51页;编辑于星期三\8点8分

计算机三维重建本文档共71页;当前第52页;编辑于星期三\8点8分(二)活体组织研究技术

属于观察机体不同功能状态的结构、物质代谢过程等的技术。放射自显影术细胞培养术组织工程

本文档共71页;当前第53页;编辑于星期三\8点8分1.放射自显影术

放射自显影术(autoradiography)为利用放射性核素的可观察和显示性,研究物质在组织或细胞内消长、分布的变化来显示细胞的功能状态或该物质在组织和细胞代谢的技术。

方法:将放射性核素或放射性核素标记的物质注入体内,有规律地间断取材、制片,放射性自显影(涂感光乳胶、暴光、显定影),显微镜观察银粒。本文档共71页;当前第54页;编辑于星期三\8点8分3H标记的胸腺嘧啶核苷放射自显影像本文档共71页;当前第55页;编辑于星期三\8点8分

2.细胞培养术

细胞培养术(cellculture)为在体外模拟体内的条件下,培养机体细胞的技术。可研究:代谢、增殖、分化、形态和功能变化。各种理化因子对活细胞的直接影响。

组织培养术、器官培养术、invitro。原代培养、传代培养。细胞系、细胞株。本文档共71页;当前第56页;编辑于星期三\8点8分细胞培养的器皿与倒置显微镜本文档共71页;当前第57页;编辑于星期三\8点8分培养细胞的倒置相差显微镜图像本文档共71页;当前第58页;编辑于星期三\8点8分

组织工程(tissueengineering)是用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。实验中的组织工程耳3.组织工程干细胞器官移植供体转化医学本文档共71页;当前第59页;编辑于星期三\8点8分离体组织的研究技术光电镜技术组织化学术

组织定量技术

显微分光光度术

图像分析术

体视学

活体组织的研究技术

细胞培养术组织工程

放射自显影术光镜技术电镜技术组织化学术图像分析术细胞培养技术与组织工程本文档共71页;当前第60页;编辑于星期三\8点8分四、组织学的学习方法基本知识相互联系、相互对比、分析记忆。用已有的知识去理解记忆新知识。结构和功能的联系。结构的直观化—充分发挥观察能力。借助插图、照片和图谱等,理解记忆结构。立体和切面的关系。本文档共71页;当前第61页;编

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