最新肠杆菌肽在母猪生产中的应用

欢迎各位嘉宾莅临指导！本文档共50页；当前第1页；编辑于星期一\16点10分2肠杆菌肽在母猪生产中的应用中农颖泰集团

技术部张江博士本文档共50页；当前第2页；编辑于星期一\16点10分目录我国母猪生产现状抗菌肽概念及研究进展肠杆菌肽简介肠杆菌肽在母猪生产中的应用本文档共50页；当前第3页；编辑于星期一\16点10分目录我国母猪生产现状抗菌肽概念及研究进展肠杆菌肽简介肠杆菌肽在母猪生长中的案例本文档共50页；当前第4页；编辑于星期一\16点10分一、存栏数高二、生产性能低下产活仔数低；年产窝数低；仔猪成活率低美国荷兰丹麦中国PSY（2013）24.828.830.216.0我国母猪现状本文档共50页；当前第5页；编辑于星期一\16点10分三、药物用量大四、疾病多免疫抑制，亚健康本文档共50页；当前第6页；编辑于星期一\16点10分病原菌（传染源）传播途径易感动物控制或减少病原菌动物品种胎盘母源抗体传播方式反刍动物结缔绒膜胎盘分娩前无法获得，分娩后通过初乳获得猪上皮绒膜胎盘分娩前无法获得，分娩后通过初乳获得狗内皮绒膜胎盘分娩前获得有限，分娩后通过初乳获得人血内皮胎盘分娩前即可获得，分娩后通过初乳获得能力有限环境控制、消毒、管理增强群体免疫力，提高机体对疾病的抗病能力本文档共50页；当前第7页；编辑于星期一\16点10分哺乳仔猪问题的根源是母猪问题！1.母猪带毒（病毒、细菌）2.母猪泌乳不足3.母猪化药保健导致保健失效1.减少母猪身体病原菌2.提高泌乳量3.减少抗生素的大量使用——新型保健方案本文档共50页；当前第8页；编辑于星期一\16点10分莆田嘉兴北京对照莆田嘉兴北京莆田嘉兴北京对照粪便粪便肥料土壤抗药性基因种类氨基糖苷类内酰胺类喹诺酮-氨基糖苷类-氯霉素-内酰胺类多重抗药性大环内酯类-链霉素类-内酰胺类等多重耐药四环素类万古霉素其他数据来源：《美国科学院院报》,2012,110(9):3435–3440本文档共50页；当前第9页；编辑于星期一\16点10分母猪减少带毒（细菌）——新型抗菌肽-肠杆菌肽妊娠料哺乳料保健方案有效减少由于大肠杆菌、沙门氏菌造成的仔猪产房腹泻本文档共50页；当前第10页；编辑于星期一\16点10分目录我国母猪生产现状抗菌肽概念及研究进展肠杆菌肽简介肠杆菌肽在母猪生长中的案例本文档共50页；当前第11页；编辑于星期一\16点10分

抗菌肽的概念

抗菌肽又名宿主防御肽，是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽。抗菌肽抗菌肽本文档共50页；当前第12页；编辑于星期一\16点10分食品防腐保鲜---乳链菌肽（nisin）医药---消炎、抗感染、抗真菌保健品---国内已有抗菌肽概念的“食字号”保健品上市，其中大部分为技术含量较低的昆虫蛋白日化---日用化工产品主要集中在化妆品上，以创伤疤痕修复为主，兼具温和杀菌、抗感染和消除红肿等功效公司名称来源临床适应症开发进展AgennixTalactoferrinAlfa人乳铁蛋白重组非小细胞肺癌与糖尿病足溃疡获得了美国FDA的快通道地位，正进行3期临床试验，预期结果2011年出AccessPharmaceuticalspexiganan（MSI78,LocilesTM）人工合成的天然宿主防御素magainin类抗生素糖尿足病完成临床III期试验，FDA要求再做一项附件试验，很可能成为10年来第一个被FDA批准的新一代抗生素。BiolineRx获得以色列生物食品生技公司授权BL-2060抗菌拟肽类（antimicrobialpeptidomimetic）治疗抗药性病菌感染2010年1月完成临床2b期试验Cadence制药公司2004年获得Migenix制药公司北美和欧洲的授权Omigardindolicidin类抗菌肽治疗导管引起感染09年III期临床结果失败，公司打算继续进行临床测试Ceragenix制药公司CerageninsLL-37抗菌肽和α、β防御素（CAS-13），制作硅树脂涂层导尿管CeraShield杀死大肠杆菌提交FDA设备和放射健康中心，在批准上市前进行安全和有效性审查本文档共50页；当前第13页；编辑于星期一\16点10分目录我国母猪生产现状抗菌肽概念及研究进展肠杆菌肽简介肠杆菌肽在母猪生长中的案例本文档共50页；当前第14页；编辑于星期一\16点10分

肠杆菌肽简介颖泰二号TM主要成分是植物乳杆菌及其代谢产物。其核心代谢产物肠杆菌肽是利用蛋白质工程技术在植物乳杆菌中高效生产的一种抗菌肽，对大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等革兰氏阴性菌具有强力杀灭作用。本文档共50页；当前第15页；编辑于星期一\16点10分

肠杆菌肽

肠杆菌肽是由21个氨基酸组成的索套肽，分子量为2.1kDa，其中N端的8个氨基酸形成一个圆形的环状结构，9-21氨基酸形成β发夹结构，贯穿圆环，故其性质非常稳定，对高温、酸、碱、胃蛋白酶、胰蛋白酶有良好抵抗力。图1肠杆菌肽空间结构本文档共50页；当前第16页；编辑于星期一\16点10分1、破坏病原菌细胞膜的完整性。

肠杆菌肽的作用机理

图2膜穿孔示意图本文档共50页；当前第17页；编辑于星期一\16点10分2、与病原细菌的RNA聚合酶集合后，抑制病原菌RNA聚合酶的活性。

肠杆菌肽的作用机理数据来源：美国《分子细胞》，2004年14卷6期本文档共50页；当前第18页；编辑于星期一\16点10分颖泰二号四大独特优势（一）针对性强

可杀灭大部分致病性大肠杆菌和沙门氏菌等革兰氏阴性病原菌。菌属菌种革兰氏属性致病性埃希氏菌属大肠杆菌G-大肠杆菌引起的疾病沙门氏菌属沙门氏菌G-沙门氏菌引起的疾病志贺氏菌属志贺氏菌G-志贺氏菌引起的人腹泻疾病本文档共50页；当前第19页；编辑于星期一\16点10分样品抑制效果大肠杆菌（购买）

大肠杆菌（临床分离）O111:H12O55:H6O25:H11O119O125O157:H7

O26O551O552O553O86O111X1X2X3细菌素B17--+++-

---+++--+细菌素C7----++

+++++++++++++细菌素E492+++++++-+

----+++++++细菌素H47-++-++++

----+++++++肠杆菌肽++-++-+++

+++++++++++++++++大肠杆菌素V------

+----+---各索套肽对致泻型大肠杆菌菌株的抑制作用结论：肠杆菌肽能抑制大部分所评价的DEC菌株，而且其抑制效果优于多种细菌素数据来源：美国《应用环境微生物》，2000年66卷10期（IF=3.8）本文档共50页；当前第20页；编辑于星期一\16点10分（二）抗菌能力强

颖泰二号四大独特优势图3对各大肠杆菌抑菌作用

图4对各沙门氏菌抑菌作用本文档共50页；当前第21页；编辑于星期一\16点10分大肠杆菌菌株抑菌圈直径

mm肠杆菌肽纯品（40ug/ml）抑菌圈直径

mm肠杆菌肽产品100mg/mlGZM417.918.8CVCC150612.916.0GL213.914.4F214.614.52592211.911.8K8812.213.7CVCC14978.813.1CVCC149910.213.1O157—12.7CVCC44102——肠杆菌肽对大肠杆菌的抑制作用数据来源：国家饲料工程技术研究中心本文档共50页；当前第22页；编辑于星期一\16点10分2023/6/26a:纯化后的抑菌活性（在20ul的灭菌盐水中稀释）用抑菌圈的平均宽度来表达，以毫米计b:没有抑菌圈

数据来源：美国《应用环境微生物》，2000年66卷10期（IF=3.8）致泻型大肠杆菌抑菌活性2ug20ug购买菌株

O111:H1221.025.4O55:H6-b5O26:H1122.125.9O119-5O125-8O157:H722.327.0临床分离

02622.026.4O55121.524.2O55221.224.8O55320.624.3O8614.116.1O11122.026.2X122.826.4X221.125.0X322.226.5

纯化后的肠杆菌肽对致泻型大肠杆菌菌株的抑制作用本文档共50页；当前第23页；编辑于星期一\16点10分菌株名

肠杆菌肽(ug/ml)硫酸粘菌素（ug/ml)大肠杆菌

GL20.212.5F20.212.5GZM40.212.514990.46.25K880.212.5肠杆菌肽与硫酸黏杆菌素对大肠杆菌MIC

（最低抑菌浓度）的比较数据来源：国家饲料工程技术研究中心本文档共50页；当前第24页；编辑于星期一\16点10分肠杆菌肽对沙门氏菌的抑制作用沙门氏菌菌株抑菌圈直径

mm肠杆菌肽（40ug/ml）抑菌圈直径

mm样品100mg/mlSK22513.315.9SK22615.616.3SK23214.316.7SK23615.917.7SK7715.117.1CVCC6962——鸡白痢（CVCC519）19.321.5鼠伤寒沙门氏菌——数据来源：国家饲料工程技术研究中心本文档共50页；当前第25页；编辑于星期一\16点10分菌株名

肠杆菌肽(ug/ml)硫酸粘菌素（ug/ml)沙门氏菌SK2260.212.5SK2320.212.5SK2360.212.5SK770.812.5鸡白痢

0.26.25肠杆菌肽与硫酸黏杆菌素对沙门氏菌MIC（最低抑菌浓度）的比较数据来源：中农颖泰集团技术研发部本文档共50页；当前第26页；编辑于星期一\16点10分

图2.肠杆菌肽在不同培养基中抗菌活性将106CFU的新港沙门氏菌接种到LB,全血(WB),血浆(P)和灭活血浆(IS)中。血浆中接种量为108。通过在时间点为0时定量培养验证接种物（黑色柱）。菌株在没有肠杆菌肽（对照组），两种不同剂量的肠杆菌肽，以及氨苄青霉素存在的条件下孵育2h。结论：肠杆菌肽可能比传统抗生素的杀菌活力高出许多。数据来源：英国《抗菌药物治疗杂志》2007年，59卷，4期（IF=5.31）本文档共50页；当前第27页；编辑于星期一\16点10分（三）结构稳定，耐酸、耐热、耐胃蛋白酶、耐胰蛋酶

肠杆菌肽用胰蛋白酶、胃蛋白酶处理5.5小时后，活性不降。

颖泰二号四大独特优势AB图6胃蛋白酶和胰蛋白酶处理结果，A图为处理30分钟，B图为处理5.5小时结果本文档共50页；当前第28页；编辑于星期一\16点10分

颖泰二号四大独特优势（三）结构稳定，耐酸、耐热、耐胃蛋白酶、耐胰蛋白酶模拟胃酸环境下肠杆菌肽对大肠杆菌25922菌株的抑菌效果PH为2的胃酸，以不同时间处理肠杆菌肽，其对大肠杆菌25922菌株的生物活性没有影响本文档共50页；当前第29页；编辑于星期一\16点10分

颖泰二号四大独特优势（三）结构稳定，耐酸、耐热、耐胃蛋白酶、耐胰蛋白酶0.3%胆盐处理肠杆菌肽对大肠杆菌25922菌株的抑菌效果0.3%胆盐以不同时间处理肠杆菌肽，其对大肠杆菌25922菌株的生物活性没有影响。本文档共50页；当前第30页；编辑于星期一\16点10分

颖泰二号四大独特优势（三）结构稳定，耐酸、耐热、耐胃蛋白酶、耐胰蛋白酶不同温度处理肠杆菌肽对大肠杆菌25922菌株的抑菌效果以不同温度处理肠杆菌肽，其对大肠杆菌25922菌株的生物活性没有影响。指示菌抑菌圈处理未处理85℃处理95℃处理110℃处理大肠杆菌25922菌株24mm24mm24mm24mm本文档共50页；当前第31页；编辑于星期一\16点10分32（三）结构稳定，耐酸、耐热、耐胃蛋白酶、耐胰蛋白酶

肠杆菌肽在121℃，0.1MPa处理1.5小时，仍有活性。

32颖泰二号四大独特优势AB图7

高热高压处理结果（1、1’、1”为三批产品稀释液

2、2’、2”为只加氨苄青霉素的培养基

3.为产品稀释液调pH为中性），其中，A图为100℃处理30分钟抑菌活性，B为121℃，0.1MPa处理90分钟抑菌活性。本文档共50页；当前第32页；编辑于星期一\16点10分图1.肠杆菌肽在LB和不同生物培养基中的稳定性肠杆菌肽(1mg/mL)在37℃时在LB培养基（1）、血浆（2）、全血(3)、灭活血清(4)和血清(5)中孵育24h，通过spot-on-lawn法测定肠杆菌肽生物活性。作为对比，图中为稀释了1024倍的培养液在孵育时间点为0和孵育24h后产生的抑菌圈。结论：肠杆菌肽的活性不受血液中任何成分的影响。此外，肠杆菌肽对人体红细胞不存在溶血性。数据来源：英国《抗菌药物治疗杂志》2007年，59卷，4期（IF=5.31）本文档共50页；当前第33页；编辑于星期一\16点10分颖泰二号四大独特优势（四）膜穿孔作用，不易产生耐药性本文档共50页；当前第34页；编辑于星期一\16点10分目录我国母猪生产现状抗菌肽概念及研究进展肠杆菌肽简介肠杆菌肽在母猪生产中的案例本文档共50页；当前第35页；编辑于星期一\16点10分

日粮中添加肠杆菌肽对母猪繁殖性能的影响本文档共50页；当前第36页；编辑于星期一\16点10分选取40头配种时间接近、胎次大致相同、体重大致接近、健康状况良好的长白×大约克经产母猪随机分为两个处理，每个处理4个重复，每个重复5头。试验分为2个处理组，处理1组为对照组，饲喂基础日粮；处理2组为试验组，饲喂基础日粮+肠杆菌肽300mg/kg。基础日粮采用该猪场原有日粮。试验开始前将母猪赶进定位栏饲养，预饲期7d，试验从母猪妊娠90d至仔猪断奶结束。试验设计本文档共50页；当前第37页；编辑于星期一\16点10分试验结果项目对照组试验组母猪采食量（kg）136.19±11.83144.52±15.30仔猪初生均重（kg）1.24±0.061.19±0.08仔猪断奶均重（kg）6.37a±0.567.78b±0.64平均产活仔数（头）8.79±1.239.03±1.34平均断奶头数（头）7.40a±1.928.57b±1.42仔猪成活率（%）0.84a±0.130.95b±0.12肠杆菌肽对母猪生产性能的影响注：同行数据肩标字母不同表示差异显著（P＜0.05）；相同表示差异不显著（P＞0.05）。本文档共50页；当前第38页；编辑于星期一\16点10分试验结果组别对照组试验组腹泻频率（%）19.62a±3.292.30b±1.16肠杆菌肽对仔猪腹泻频率的影响注：同行数据肩标字母不同表示差异显著（P＜0.05）；相同表示差异不显著（P＞0.05）。本文档共50页；当前第39页；编辑于星期一\16点10分

肠杆菌肽对母猪的繁殖性能和仔猪的生长性能等指标的影响，试验结果表明，母猪添加300mg/kg肠杆菌肽能够提高仔猪断奶重和成活率，同时显著改善仔猪的腹泻问题，对母猪、仔猪疾病起到一定的预防作用，减少应激对机体的损伤。试验结论本文档共50页；当前第40页；编辑于星期一\16点10分肠杆菌肽对哺乳仔猪腹泻的治疗效果本文档共50页；当前第41页；编辑于星期一\16点10分

吉林某规模化猪场。此场饲养管理属于中等水平，经常出现产房腹泻的问题。本文档共50页；当前第42页；编辑于星期一\16点10分试用案例一选用的为5日龄仔猪，该窝仔猪共计11头，拉稀6头，3头使用颖泰二号，3头使用诺氟沙星。10月13日下午用药，10月14日用药2次，10月15日早康复！

说明颖泰二号具有明显的治疗仔猪拉稀作用，且作用和诺氟沙星一样，可作为诺氟沙星替代品用以治疗仔猪拉稀。头数用药试用组3肠杆菌肽对照组3