2024版高考生物一轮复习专题基础练专题十一生物技术与工程考点33微生物的培养技术及应用作业课件

考点33微生物的培养技术及应用经典3+23年高考+2年模拟经典3+21[2023哈尔滨质监]关于在马铃薯琼脂培养基上进行酵母菌纯培养的实验，叙述不正确的是A.完成平板划线后立即将接种后的平板和一个未接种的平板倒置培养B.接种平板一般做三组，目的是遵循平行重复原则，使实验结果准确可靠C.使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境D.离开实验室时一定要洗手，以防被微生物感染答案1.A完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置培养，A错误。经典3+22[2021北京卷]人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述操作不正确的是A.对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌B.使用无菌棉拭子从皮肤表面取样C.用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布D.观察菌落的形态和颜色等进行初步判断答案2.C通常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，A项正确;从皮肤表面分离出葡萄球菌，可用无菌棉拭子从皮肤表面取样，B项正确;不能直接用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布，C项错误;一般情况下，不同微生物形成的菌落的形态和颜色等特征不同，可根据菌落的特征对细菌的种类进行初步判断，D项正确。经典3+23[2022海南卷]为探究校内植物园土壤中的细菌种类，某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是A.采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本B.培养细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基C.土壤溶液稀释倍数越低，越容易得到单菌落D.鉴定细菌种类时，除形态学鉴定外，还可借助生物化学的方法答案3.C采集植物园中土壤样本时要随机采样，A正确;牛肉膏蛋白胨固体培养基中含有细菌生长所需的碳源、氮源、水、无机盐等，故可用牛肉膏蛋白胨固体培养基培养细菌，B正确;土壤溶液稀释倍数足够高时，才能将聚集的菌体分散开，容易在培养基表面形成单菌落，C错误;不同种类细菌的理化特性一般不同，鉴定细菌种类时，除根据菌落特征进行形态学鉴定外，还可以借助生物化学的方法进行鉴定，D正确。经典3+24[2020江苏卷]为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是A.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整B.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落C.该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的D.菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色答案4.B倒平板后无需间歇晃动，A错误;图中Ⅰ区、Ⅱ区的细菌数量太多，Ⅲ区的细菌数量较少，可从Ⅲ区挑取单菌落，B正确;Ⅲ区中存在单菌落，该实验结果能达到菌种纯化的目的，C错误;刚果红能与纤维素形成红色复合物，但不能和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物，因此菌落周围的纤维素被降解后，不能被刚果红染成红色，D错误。经典3+25[2021山东卷]解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是A.甲菌属于解脂菌B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力答案5.B解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用，脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，根据实验结果甲菌菌落周围呈现深蓝色可知，甲菌属于解脂菌，A正确;据题意可知，乙菌不能在以脂肪为唯一碳源的培养基上生长，B错误;可以将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行观察，对比两种菌分泌脂肪酶的能力，C正确;可以根据平板上菌落周围深蓝色面积大小，比较解脂菌分泌脂肪酶的能力，D正确。经典3+26[2023广东六校联考]某兴趣小组按如图方法对没有加工的鲜奶进行细菌检测。有关叙述正确的是A.鲜奶常采用湿热灭菌法进行灭菌B.若培养基需要调节pH，应该在灭菌后培养基凝固前立即进行C.若3个培养皿中的菌落数分别为35、33、34，则1mL鲜奶中的细菌数为3.4×106个D.对鲜奶中细菌进行计数时，常采用稀释涂布平板法，用该方法统计的结果往往比实际值偏高答案6.C常采用巴氏消毒法对鲜奶进行消毒，这种消毒方法可以杀死鲜奶中的绝大多数微生物，并且不破坏鲜奶的营养成分，A错误;若培养基需要调节pH，应该在灭菌前进行，B错误;从图中可以看出，涂布时吸取0.1mL稀释液，稀释倍数为104倍，若3个培养皿中的菌落数分别为35、33、34，则1mL鲜奶中的细菌数为(35+33+34)÷3÷0.1×104=3.4×106(个)，C正确;使用稀释涂布平板法对微生物进行计数时，统计的结果往往比实际值偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，D错误。

经典3+27[2021江苏卷](多选)为提高一株石油降解菌的净化能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理。下列叙述不合理的是A.将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率B.涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mLC.需通过预实验考察辐照时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间D.挑取培养基上长出的较大单菌落，纯化后进行降解效率分析答案7.AB培养基应先灭菌再分装于培养皿中，A项错误;石油降解菌能分解石油，可在以石油为唯一碳源的固体培养基上形成菌落，挑取培养基上长出的较大单菌落，纯化后进行降解效率分析，以获得能高效降解石油的菌种，D项正确。经典3+28[2020全国Ⅰ卷]某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题:(1)实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用

的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是

。甲、乙培养基均属于

培养基。

(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释

倍。

经典3+2

(3)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是

(答出1点即可)。

(4)若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤:

。

(5)上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即

。

经典3+2答案8.【参考答案】(1)高压蒸汽灭菌琼脂选择(2)104

(3)S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长(4)取淤泥加入无菌水中，涂布(或稀释涂布)到乙培养基上，培养后计数(5)水、碳源、氮源和无机盐【解题思路】(1)实验过程中，对盛有水或培养基的摇瓶进行灭菌时，常采用高压蒸汽灭菌法。据题图分析可知，乙培养基为固体培养基，与甲培养基相比，其特有的组分Y物质应是凝固剂琼脂。甲、乙培养基均只允许能利用物质S作为氮源和碳源的微生物生长，因此均为选择培养基。(2)据题意，假设至少将摇瓶M中的菌液稀释X倍，才能保证稀释后的100μL菌液中细菌细胞数不超过200个，初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，则稀释之前100μL菌液中有2×106个细菌，可得2×106×(1/X)=200，则X=104，因此至少应将摇瓶M中的菌液稀释104倍。(3)在筛选过程中，若培养基中S浓度过高，可能会导致细胞失水，进而抑制菌株的生长。(4)将含有能降解S的细菌的淤泥加入无菌水中，进行适当稀释后，利用稀释涂布平板法，取适量的菌液涂布到乙培养基上，在适宜条件下进行培养，一段时间后，统计菌落数，即可估算出淤泥中能降解S的细菌细胞数。(5)本实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供的营养物质是水、碳源、氮源和无机盐。经典3+29[2021湖南卷]大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12~38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题:(1)为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以

为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于

培养基。

(2)配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是

。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是

。

(3)简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路

。

(4)为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株

，理由是

。

菌株秸秆总重(g)秸秆残重(g)秸秆失重(%)纤维素降解率(%)A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.32经典3+2答案9.【参考答案】(1)纤维素选择(2)杀灭培养基中的微生物将灭菌的固体培养基放置在适宜的温度下培养后，观察是否长出菌落(3)取一定量的大熊猫新鲜粪便，用无菌水对其进行梯度稀释，在适宜稀释倍数下用稀释涂布平板法接种到以纤维素为唯一碳源的刚果红固体培养基上，培养后计数，再进行纤维素分解菌的活菌数计算(4)CC菌株纤维素降解率最高，推测该菌株纤维素酶活力最高经典3+2【解题思路】(1)在以纤维素为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于选择培养基。(2)配制的培养基常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，目的是杀死培养基中的所有微生物(包括芽孢和孢子)，防止培养基中的微生物对实验结果造成影响。为检测灭菌效果可对培养基进行空白培养，即将未接种的培养基在适宜条件下培养一段时间，若无菌落出现，说明培养基灭菌彻底，否则说明培养基灭菌不彻底。(3)为测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数，常采用稀释涂布平板法，在适宜的条件下对大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌进行纯化并计数时，对照组应该涂布等量的无菌水。将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后，取0.1mL涂布到若干个平板(每个稀释度至少涂布三个平板)，对菌落数在30~300个的平板上的菌落进行计数，则可根据公式推测大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数。(4)测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。由表格可知，在37℃条件下，接种菌株C后秸秆残重最小，失重最多，纤维素降解率最大，说明该菌株产生的纤维素酶活力最大。创新1+1情境创新+命题创新创新1+11新考法·逆向推理[2023湖北重点中学联考]如表为不同培养基中某细菌的生长状况(S、C、M为简单培养基;U、V、X、Y、Z代表加入培养基的不同物质)，据表推测该细菌自身不能合成的物质是(“+”表示能正常生长，“-”表示不能生长)A.UB.VC.YD.Z答案1.C分析表格可知，凡添加了物质Y的培养基，该细菌都能生长，反之则不能生长，说明物质Y是该细菌不能合成的。C符合题意。培养基生长状态S、C、M-S、C、M，+V+Z-S、C、M，+U+Y+S、C、M，+Z+X-S、C、M，+V+Y+S、C、M，+U+X-S、C、M，+Y+Z+创新1+12新方法·原位接种[2023湖北沙市中学月考]滥用抗生素会导致“超级细菌”(对多种抗生素有高耐药性)的产生。某兴趣小组探究了细菌产生青霉素抗性与青霉素之间的关系，过程及结果如图。下列相关的说法错误的是A.细菌培养基在使用前、后都要经过严格的灭菌处理B.结果表明细菌的青霉素抗性出现在接触青霉素之前C.结果表明抗生素的使用是“超级细菌”产生的原因D.提高青霉素的浓度，培养基上菌落的位置和数量可能不变答案2.C细菌培养基在使用前要经过严格的灭菌处理，防止杂菌的污染，在使用后也要经过严格的灭菌处理，防止对环境造成污染，A正确;由图可知，多个含青霉素的培养基在相同的位置长出了细菌，说明细菌的青霉素抗性出现在接触青霉素之前，B正确;抗生素的使用是为了对“超级细菌”进行选择，而不是“超级细菌”产生的原因，C错误;经过抗生素的长期选择，使得有的细菌已不再受抗生素的影响，提高青霉素的浓度，培养基上菌落的位置和数量可能不变，D正确。创新1+1解后反思：遗传变异是生物进化的基础，首先细菌的抗药性存在着变异，有的抗药性强，有的抗药性弱。使用抗生素时，抗药性弱的细菌被杀死，即不适者被淘汰;抗药性强的细菌活下来，即适者生存。活下来的抗药性强的细菌，繁殖的后代有的抗药性强，有的抗药性弱，在使用抗生素时，抗药性弱的细菌被杀死，抗药性强的细菌活下来。这样经过抗生素的长期选择，有的细菌已不再受抗生素的影响了，就出现了题述中的“超级细菌”。创新1+13新素材·TSI琼脂实验[2023济南模拟](多选)三糖铁(TSI)培养基含有牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、乳糖、微量葡萄糖、硫酸亚铁、氯化钠、酚红、琼脂等成分，可根据观察单一细菌对三种糖的分解能力及是否产生硫化氢，来鉴别细菌的种类。三糖铁(TSI)琼脂实验方法是:使用笔直的接种针挑取待测菌落，将接种针平稳刺入三糖铁固体斜面培养基内，然后沿原穿刺途径慢慢抽出接种针，最后在斜面上进行“之”字划线，36℃下培养18~24h，观察实验结果。酚红在酸性条件下显黄色，在碱性条件下显红色。细菌产生的硫化氢与铁盐反应生成黑色沉淀。下列叙述正确的是A.穿刺或划线的目的是将纯培养物进行二次传代培养，须严格控制交叉污染B.若培养基出现黑色沉淀，可推测该细菌能够分解牛肉膏、蛋白胨C.若细菌能分解乳糖和葡萄糖而产酸、产CO2，推测斜面为黄色、底层为红色且有气泡D.若底层穿刺线四周出现扩散生长现象，可推测细菌是可以运动的答案3.ABD细菌产生的硫化氢与铁盐反应生成黑色沉淀，若培养基出现黑色沉淀，可推测该