药物分析 第七章羧酸及其酯类药物的分析

第七章羧酸及其酯类药物的分析第一节芳酸及其酯类药物的分析常见的芳酸及其酯类药物水杨酸类

二氟尼柳对氨基水杨酸钠贝诺酯苯甲酸类

羟苯乙酯丙磺舒（pKa3.4）甲芬那酸第一节结构与性质

一、结构分析包括：芳酸、芳酸酯、芳酸盐

共同点：苯环、羧基

不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）

二、性质

（一）物理性质

1.大部分为具有一定熔点的固体

2.溶解性游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。

（二）化学性质

1.芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在3～6之间，属中等强度的酸或弱酸；

pKa=3.492.954.26—X、—NO2、—OH等吸电子取代基存在使酸性增强

—CH3、—NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱

邻位取代>间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强

2.芳酸碱金属盐易溶于水，水解，溶液呈碱性，但碱性太弱，所以其含量测定方法为双相滴定法或非水碱量法。

3.芳酸酯可水解，利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别；利用芳酸酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，芳酸酯类药物可用水解后剩余滴定法测定含量；芳酸酯类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质。

4.UV

5.IR6.取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别；具芳伯氨基的药物可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。7.色谱法—制剂分析第二节鉴别试验

一、与三氯化铁反应1.水杨酸类水杨酸的水溶液加三氯化铁试液，即生成紫堇色配位化合物，反应宜在中性或弱酸性（pH值4~6）条件下进行。水杨酸Ch.P.【鉴别】

（1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。二氟尼柳溶于乙醇后与三氯化铁试液反应呈深紫色。

间接：阿司匹林、双水杨酯阿司匹林Ch.P.【鉴别】

（1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。2.苯甲酸类二、重氮化—偶合反应

芳香第一胺类鉴别反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物

重氮化试剂：HCl+NaNO2偶合试剂：碱性-萘酚

直接：盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺

间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋氨苯砜、贝诺酯

三、水解反应

阿司匹林Ch.P.【鉴别】

（2）取本品约0.5g，加碳酸钠试液10ml，煮沸2分钟后，放冷，加过量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气。四、分解产物的反应五、UV1.规定一定浓度药物的最大吸收波长

Ch.P.萘普生的鉴别：取本品，加甲醇制成每1ml中含30g的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA）测定，在262nm、271nm、317nm与331nm的波长处有最大吸收。2.规定一定浓度药物的max及其吸光度Ch.P.甲芬那酸的鉴别：取本品，加1mol/L盐酸溶液-甲醇（1∶99）混合液溶解并稀释制成每1ml中含20g的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA）测定，在279nm与350nm的波长处有最大吸收，其吸光度分别为0.69～0.74与0.56～0.60。3.规定一定浓度药物的max及在两波长处的吸光度比值

Ch.P.二氟尼柳的鉴别：取本品，加0.1mol/L的盐酸乙醇溶液溶解并稀释制成每1ml中含20g的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA）测定，在251nm与315nm的波长处有最大吸收，吸光度比值应为4.2～4.6。4.规定一定浓度药物的max、min及肩峰

Ch.P.布洛芬的鉴别：取本品，加0.4％氢氧化钠溶液制成每1ml中含0.25mg的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录ⅣA）测定，在265nm与273nm的波长处有最大吸收，在245nm与271nm的波长处有最小吸收，在259nm的波长处有一肩峰。六、IR七、色谱鉴别法（一）薄层色谱法（二）高效液相色谱法Ch.P.二氟尼柳胶囊的鉴别：取本品内容物适量（约相当于二氟尼柳50mg），加甲醇5ml，振摇使二氟尼柳溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另称取二氟尼柳对照品适量，用甲醇溶解制成每1ml中约含10mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法（附录ⅤB）试验，吸取上述两种溶液各5l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-二氧六环-冰醋酸（85∶10∶5）为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视，供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同。第三节特殊杂质检查

一、阿司匹林中特殊杂质的检查（一）游离水杨酸

1.杂质来源原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解产生）2.检查方法

HPLC限量原料：0.1%

阿司匹林片：0.3%阿司匹林肠溶片：1.5%阿司匹林肠溶胶囊：1.0%阿司匹林泡腾片：3.0%阿司匹林栓：3.0%

取本品约0.1g，精密称定，置10ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液适量，振摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（临用新制）；取水杨酸对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（附录ⅤD）试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20∶5∶5∶70）为流动相；检测波长为303nm。理论板数按水杨酸峰计算不低于5000，阿司匹林峰与水杨酸峰的分离度应符合要求。立即精密量取供试品溶液、对照品溶液各10l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与水杨酸峰保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.1%。（三）有关物质

乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）等

取本品约0.1g，精密称定，置10ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取1ml，置200ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；精密量取对照溶液1ml，置10ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为灵敏度试验溶液。照高效液相色谱法（附录ⅤD）试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20∶5∶5∶70）为流动相A，乙腈为流动相B，按下表进行梯度洗脱；检测波长为276nm。阿司匹林峰的保留时间约为8分钟，理论板数按阿司匹林峰计算不低于5000，阿司匹林峰与水杨酸峰的分离度应符合要求。分别精密量取供试品溶液、对照溶液、灵敏度试验溶液及水杨酸检查项下的水杨酸对照品溶液各10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，除水杨酸峰外，其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（0.5%）。供试品溶液色谱图中任何小于灵敏度试验主峰面积的峰可忽略不计。时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）01000602080二、对氨基水杨酸钠中特殊杂质的检查

HPLC三、甲芬那酸中特殊杂质的检查

1.“铜”检查法AAS

取本品1.0g，置石英坩埚中，加硫酸湿润，炽灼俟灰化完全后，残渣用0.1mol/L硝酸溶液溶解并定量转移至25ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密量取标准铜溶液（精密称取硫酸酮0.393g，置1000ml量瓶中，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加0.1mol/L硝酸溶液稀释至刻度，摇匀）1.0ml，置25ml量瓶中，加0.1mol/L硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取上述两种溶液，照原子吸收分光光度法（附录ⅣD），在324.8nm的波长处分别测定。供试品溶液的吸光度不得大于对照品溶液的吸光度。2.2，3-二甲基苯胺GC3.有关物质HPLC第四节含量测定一、酸碱滴定法（一）直接滴定法pKa3～6阿司匹林

Ch.P.（2010）

取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。1.测定方法及计算

Ka=3.27×10-4

反应摩尔比为1∶1

本法为直接滴定法，测定结果按下式计算：2.讨论（1）中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言（2）优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）酸性杂质干扰（如水杨酸）（3）适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定（二）水解后剩余滴定法酯的一般含量测定方法阿司匹林USP：取本品约1.5g，精密称定，置烧瓶中，加氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。2NaOH（过量）＋H2SO4

＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：

反应摩尔比为1∶2

优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰

（三）两步滴定法阿司匹林片、阿司匹林肠溶片阿司匹林片Ch.P（2005）

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。

第一步中和

第二步水解后剩余滴定

水解：剩余滴定：2NaOH（过量）＋H2SO4

＝Na2SO4＋2H2O本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰

反应摩尔比为1∶1

本法为剩余滴定法，测定结果按下式计算：例

称取阿司匹林供试品0.3955g，溶于中性乙醇，用酚酞为指示剂，以氢氧化钠滴定液（0.1015mol/L）滴定到终点时，消耗氢氧化钠滴定液（0.1015mol/L）21.56ml，每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。计算阿司匹林的百分含量。

例取标示量为0.3g的阿司匹林片10片，称出总重为3.5840g，研细后称取0.3484g，按药典方法测定。供试品消耗硫酸滴定液（0.05015mol/L）23.84ml，空白试验消耗硫酸滴定液（0.05015mol/L）39.88ml。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。求此片剂的标示量%。

（四）非水碱量法

苯甲酸钠Ch.P.（2010）冰醋酸作溶剂高氯酸的冰醋酸溶液作滴定剂结晶紫作指示剂指示终点或电位法指示终点

二、紫外分光光度法（一）直接紫外分光光度法二氟尼柳胶囊Ch.P.（2010）取装量差异项下的内容物，研细，精密称取适量（约相当于二氟尼柳0.1g），置100ml量瓶中，加0.1mol/L的盐酸乙醇溶液适量，超声处理10分钟使二氟尼柳溶解，放冷，用0.1mol/L的盐酸乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置l00ml量瓶中，用0.1mol/L的盐酸乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，在315nm的波长处测定吸光度；另取二氟尼柳对照品，精密称定，用0.1mol/L的盐酸乙醇溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含50μg的溶液作为对照品溶液，同法测定，计算，即得。

吲哚美辛贴片Ch.P.（2010）

取本品5片，分别剪成小条，除去保护层，置干燥的具塞锥形瓶中，精密加甲醇250m1，避光放置，浸渍2h后，摇匀，精密量取浸渍液5ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。照紫外-可见分光光度法，在320nm的波长处测定吸收度，按C19H16ClNO4的吸收系数（）为179计算，即得。片剂、胶囊剂、注射用无菌粉末：紫外分光光度法的吸收系数法例.VitB1片UV法含量测定：取本品20片(规格10mg/片)，精密称得重量1.4070g，研细，精密称取0.1551g，置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)约70ml，振摇15分钟，加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5.0ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，在246nm处测得吸收度0.474，按C12H17ClN4OS·HCl的吸收系数为421计算本片的标示量%。（二）柱分配色谱-紫外分光光度法USP阿司匹林胶囊和栓剂

固定相：NaHCO3

洗脱液：冰醋酸-三氯甲烷280nm测定，对照法定量三、HPLC

离子抑制色谱法阿司匹林栓Ch.P.（2010）

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂，以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20∶5∶5∶70）为流动相；检测波长为276nm。理论板数按阿司匹林峰计算不低于3000，阿司匹林峰与水杨酸峰的分离度应符合要求。

测定法取本品5粒，精密称定，置小烧杯中，在40～50℃水浴上微温熔融，在不断搅拌下冷却至室温，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.1g），置50ml量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液适量，在40～50℃水浴中充分振摇使阿司匹林溶解，放冷，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，置冰浴中冷却1小时，取出，迅速滤过，取续滤液作为供试品贮备液。精密量取供试品贮备液5ml，置100ml量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取10l，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿司匹林对照品，精密称定，加1%冰醋酸的甲醇溶液振摇使溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。测定结果按下式计算：98：80．鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是（C）A.碘化钾B.碘化汞钾C.三氯化铁D.硫酸亚铁E.亚铁氰化钾

95：129.乙酰水杨酸片剂可采用的测定方法为（CD）A.非水滴定法B.水解后剩余滴定法C.两步滴定法D.柱色谱法E.双相滴定法

98：134．测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是（BC）A.重量法B.酸碱滴定法C.高效液相色谱法D.络合滴定法E.高锰酸钾法

99：81.两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L）相当于阿司匹林（分子量=180.16）的量是（A）A.18.02mgB.180.2mgC.90.08mgD.45.04mgE.450.0mg

96：78．苯甲酸钠的含量测定，中国药典（1995年版）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为（D）A.水—乙醇B.水—冰醋酸C.水—氯仿D.水—乙醚E.水—丙酮

99：83.双相滴定法可适用的药物为（E）A.阿司匹林B.对乙酰氨基酚C.水杨酸D.苯甲酸E.苯甲酸钠

例.采用直接酸碱滴定法测定阿司匹林的含量时，已知阿司匹林的分子量为180.2，所用氢氧化钠滴定溶液的浓度为0.1mol/L，请问1ml氢氧化钠滴定溶液相当于阿司匹林的量应是（C）A.180.2mgB.180.2gC.18.02mgD.1.802mgE.9.01mg

例.阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是（C）A.苯酚B.乙酰水杨酸C.水杨酸D.醋酸钠

E.醋酸苯酯

例.水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的pH值是（D）A.pH10.0B.pH2.0C.pH7～8D.pH4～6E.pH2.0±0.1

例.两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是（B）A.测定阿司匹林含量B.消除共存酸性物质的干扰C.使阿司匹林反应完全D.便于观测终点

E.有利于第二步滴定

例．对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是（B）A.水杨酸B.间氨基酚C.氨基酚D.苯酚

E.苯胺

例.能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物有（ABC）

A．苯甲酸钠

B．水杨酸

C．对乙酰氨基酚

D．氢化可的松

E．丙酸睾酮

例.采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是（A）

A.防止反应产物的干扰

B.乙醚层在水上面，防止样品被氧化

C.消除酸碱性杂质的干扰

D.防止样品水解

E.以上都不对

例.采用双步滴定法测定阿司匹林制剂含量时，被测组分与标准溶液的反应摩尔比为（C）

A.2:1B.1:2C.1:1D.3:1E.以上都不对

例.阿司匹林中含量最高的杂质为（C）A.乙酰水杨酸酐B.乙酰水杨酸水杨酸C.水杨酸D.水杨酰水杨酸

E.以上都不对

例.区别水杨酸和苯甲酸钠，最常用的试液是（C）A.碘化钾B.碘化汞钾C.三氯化铁D.硫酸亚铁

E.亚铁氰化钾

例.在中性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成赭色沉淀的药物是（D）A.水杨酸钠B.对氨基水杨酸钠C.乙酰水杨酸D.苯甲酸钠

E.扑热息痛

例.对氨基水杨酸钠的含量测定方法有（ABCDE）A.离子对高效液相法B.非水滴定法C.溴量法D.亚硝酸钠滴定法

E.以上都对

例.用直接滴定法测定阿司匹林含量（ABE）

A.反应摩尔比为1：1B.在中性乙醇溶液中滴定

C.用盐酸滴定液滴定

D.以中性红为指示剂

E.滴定时应在不断振摇下稍快进行

第二节脂肪酸及其酯类药物的分析萘普生芳基乙酸类双氯芬酸钠芳基丙酸类布洛芬酮洛芬105脯氨酸类（普利类）1072-甲基丁酸萘酯类（他汀类）苯氧基烷酸类氯贝丁酯一、结构与性质

（一）结构分析游离羧酸、羧酸酯、羧酸盐2.旋光性3.酸碱性和水解性4.官能团反应特性（二）性质1.溶解性5.光谱特性二、鉴别试验

1.异羟肟酸铁反应2.官能团反应（1）缩合反应酮洛芬具有二苯甲酮结构，

在酸性条件下与二硝基苯肼缩合生成橙色偶氮化合物沉淀（2）酰化反应含巯基的卡托普利与亚硝酸作用，生成亚硝酰硫醇酯，呈红色。3.UV4.IR三、特殊杂质检查（一）布洛芬中有关物质的检查TLC，供试品溶液自身稀释对照法（二）萘普生中6-甲氧基-2萘乙酮等有关物质的检查HPLC（三）卡托普利中卡托普利二硫化物的检查HPLC（四）辛伐他汀中洛伐他汀等有关物质的检查HPLC（五）氯贝丁酯中特殊杂质的检查

1.对氯酚杂质来源：原料残存、分解产生检查方法：GC色谱条件：用2m玻璃色谱柱，以甲基硅橡胶（SE-30）为固定液，涂布浓度5%，柱温160℃，载气为氮气，检测器为氢火焰离子化检测器。检查：取本品10.0g，加氢氧化钠试液20ml，振摇提取，分取下层液，用水5ml振摇洗涤后，留作挥发性杂质检查用。上述水洗液并入碱性提取液（上层）中，用三氯甲烷振摇洗涤，弃去三氯甲烷液，加稀盐酸使成酸性，用三氯甲烷提取，合并三氯甲烷提取液，并加三氯甲烷稀释成10ml，作为供试品溶液；另取0.0025%对氯酚的三氯甲烷溶液作为对照品溶液。精密量取等体积的供试品溶液和对照品溶液，分别进样分析。供试品溶液中对氯酚峰面积不得大于对照品溶液中对氯酚峰面积。2.挥发性杂质GC取对氯酚检查项下经碱液提取、水洗涤后的本品适量，经无水硫酸钠干燥，作为供试品；取供试品溶液注入气相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液色谱图