细胞生物学实验室安全手册

*省肿瘤医院转化医学中心细胞制备实验室*省肿瘤医院转化医学中心细胞制备实验室PAGEPAGE12**省肿瘤医院转化医学中心细胞生物学实验室安全手册**省肿瘤医院转化医学中心细胞制备实验室前言实验室安全是科研工作的基础，按照国家相关法律、法规，为了加强和完善我中心细胞生物学实验室安全管理工作，根据实际工作情况和实验室条件，编制细胞生物学实验室安全手册，确立实验室安全的各种程序规范和注意事项，实验室工作人员应提高并重视实验室安全问题，并且运用到日常实际工作中，促使我们的实验室工作向着规范化、法制化的方向发展。本手册中，引用了WHO感染性微生物相对危害程度的等级划分标准，根据感染性微生物的相对危害程度制订了危险度等级的划分标准（WHO的危险度1234级）1生物安全水平、防护实验室——三级生物安全水平和最高防护实验室——四级生物安全水平。现根据操作不同危险度等级制定了安全手册。表1感染性微生物的危险度等级分类1级（无或极低的个体和群体危害不太可能引起人或动物致病的微生物危险度2级（个体危害中等，群体危害低）病原体能够对人或动物致病，但对实验室人员、社区、牲畜和环境不易导致严重危害。实验室暴露也许会引起严重感染，但对感染又有效的预防治疗措施，并且疾病传播的危害有限危险度3级（个体危害高，群体危害低）病原体通常能引起人或动物的严重疾病，但一般不会发生感染个体向其他个体的传播，并且对感染又有效的预防和治疗措施危险度4级 （个体和群体危害均高）病原体通常能引起人或动物的严重疾病，并且很容易发生个体之间的直接或间接传播，对感染没有有效的预防和治疗措施表2与微生物危险的等级相对应的生物安全水平、操作和设备危害度等级级级

生物安全水平基础实验室1级生物安全水平基础实验室2级生物安全水平

实验室类型初级卫生服务、诊断、研究

实验室操作GMTGMT物危害标志在2级生物安全防

安全设施不需要，开放实验台开放实验室，此外需BSC用于可能生成的气溶胶BSC和/或气体所级 防护实验室3级生物安全水平级 最高防护实验室4级生物安全水平

危险病原体研究

护水平上增加特度、定向气流在3护水平上增加气锁入口、出口淋浴、污染物

级BSC或级BSC并穿着正压（体）过滤的空气BSC：生物安全柜；GMT：微生物学操作技术规范要求生物安全水平表3不同生物安全水平对设施的要求要求生物安全水平一级二级三级四级实验室隔离不需要不需要需要需要房间能够密闭消毒不需要不需要需要需要通风--向内的气流不需要最好有需要需要通风--通过建筑系统的通风设备不需要最好有需要需要通风--HEPA过滤排风不需要不需要需要/不需要需要双门入口不需要不需要需要需要气锁不需要不需要不需要需要带淋浴设施的气锁不需要不需要不需要需要通过间不需要不需要需要—带淋浴设施的通过间不需要不需要需要/不需要不需要污水处理不需要不需要需要/不需要需要高压灭菌器--现场不需要最好有需要需要高压灭菌锅--实验室内不需要不需要最好有需要高压灭菌锅--双门不需要不需要最好有需要生物安全柜不需要最好有需要需要人员安全监控条件不需要不需要最好有需要第一章总则目的全和健康，正常有序地开展科研工作，特制订以下条例。依据《病原微生物实验室生物安全管理条例染人类的高致病性病源微生物菌毒种或样本运输管理规定WHO室生物安全手册第三版200适用范围适用于进入细胞生物学实验室的所有工作人员。修订国家卫生部门涉及生物安全的法律法规发生修订更改时，本手册应相应做出修订。实验室生物安全管理组织结构及职责组织机构实验室生物安全管理实行实验室主管责任制。实验室主管安全管理责任对所有实验室工作人员、来访者、合同方、社区和环境的安全负责；主动告知所有工作人员、来访者、合同方可能面临的风险；为工作人员提供实验室安全培训的机会，保证员工可以胜任所分配的工作；为工作人员提供必要的免疫计划、定期的健康检查和医疗保障；设计性能；为工作人员提供符合要求的防护用品和器材；为工作人员提供符合要求的实验物品和器材；保证工作人员不疲劳工作和不从事风险不可控制的或者国家禁止的工作。实验室工作人员安全责任充分认识和理解所从事工作的风险；自觉遵守实验室的管理规定和要求；在身体许可的条件下，应接受实验室的免疫计划和其他的健康管理规定；按规定正确使用设施、设备和个人防护装备；有责任和义务避免因个人原因造成的生物安全事件或事故；不应因人事、经济等任何压力而违反管理规定；主动识别任何危险和不符合规定的工作，并立即报告；如果怀疑个人受到感染，应该立即报告。第二章实验室生物安全管理制度一、实验室人员准入制度害或事故，制定本制度。适用于进入细胞生物学实验室的所有人员。3、职责由实验室主管负责实验室人员准入工作的监督和实施。进入实验室所有人员所有必须以本规定规范自己的工作。4、制度要求实验室工作人员必须接受相关生物安全知识、法规制度培训并考试合格。特异性抗原、抗体检测。工作范围的技术标准、方法和设备技术性能。从事实验室技术人员应熟练掌握与岗位工作有关的实验方法和标准操作规程果处理，分析和解决工作中的一般技术问题，有效保证所承担环节的工作质量。则和上报程序。况进入实验室特殊工作区需经实验室负责人同意：身体出现开放性损伤；患发热性疾病；呼吸道感染或其它导致抵抗力下降的情况；正在使用免疫抑制剂或免疫耐受；（5）妊♘；已经在实验室控制区域内连续工作6小时；以上或其它原因造成的疲劳状态。实验活动辅助人员（废弃物管理人员、洗刷人员等）事工作的生物安全风险，接受与所承担职责有关的生物安全知识和技术、个体防护方法等内容的培训，熟悉岗位所需消毒知识和技术，了解意外事件和生物安全事故的应急处置原则和上报程序。非工作人员在未经实验室相关负责人同意时禁止进入实验室。的潜在危害，在工作人员陪同下进入实验室。有相关程序，并被告知有潜在危害。进修、实习人员或研究生进入实验室做标本或研究前，需要经过相关实验室的生物安全和技术培训，并有培训记录。实验室负责人应询问是否是易感者（等个体健康原因）是，则限制或禁止进入相关实验室或从事相关操作。或实验室负责人批准，并有安全保护措施。二、健康医疗监护制度规范实验室人员的健康监护工作，预防、控制实验室感染。适用于细胞生物学实验室所有工作人员。实验室负责人负责实验室人员健康监护工作的组织实施。制度要求实验室人员体检制度作有关的特异性抗原、抗体检测。不符合岗位健康要求不得从事相关工作。行临时性体检，档案保留。实验室人员免疫预防制度过敏反映等情况并记入健康监护档案。康监护档案。护档案。对体检结果异常的人员应随时进行必要的免疫接种或采取其他预防手段，并记入健康监护档案。入健康监护档案。三、生物安全实验室人员培训、考核制度为确保实验室全体职工熟悉生物安全法律、法规，建立生物安全意识，保证相关工作人员掌握开展培训、考核计划，报上级领导批准后实施。培训内容：生物安全相关法律、法规、办法、标准、本实验室生物安全手册、生物安全管理制度、维护、个人防护用品的正确使用、菌（毒）株和样本的收集、运输、保藏、使用、销毁、实验室的消毒与灭菌、感染性废物的处置、急救等。每年组织全员（包括实验室管理人员、技术人员、样本运送人员、保洁员等）核。针对不同的工作岗位，在全员培训的基础上，组织开展专项生物安全培训。培训后应对参加培训的人员进行考核，考核形式可采取多样化，如笔试、口试、实操等。建立并保存生物安全工作人员的培训、考核档案。全风险。后应组织开展相关内容的培训和考核。四、设施/设备监测，检测和维护制度的顺利进行。适用于实验室内的各种实验仪器。职责本实验室人员必须以本制度规范自己的工作。实验室主管负责检查和监督。制度要求须安装断路器和漏电保护器。技术培训。用频率高的仪器按规定在检定周期内进行期间核查。读的位置。仪器使用者必须认真遵守操作规程，并做好仪器设备使用记录，定期维护仪器设备。电安全隐患的设备（如漏电、电源插座破损、接地不良、绝缘不好等。修记录。仪器设备使用结束后，必须按日常保养进行检查清理，保持良好状态。所有仪器设备应加贴唯一性标识及准用、限用、禁用标志。长期用电设备（如冰箱、培养箱）应定期检查，并记录运行情况。因故障或操作失误可能产生某种危害的仪器设备，必须配备相应的安全防护装置。必须对接触污染物的仪器设备进行相应的清洗、消毒。长时间不使用时，应定期通电、除湿。有记录，保持设备清洁干燥（例如每年应对生物安全柜进行一次常规检测，须特别关注高效过滤器。定期对离心机的离心桶和转子进行检查。高压灭菌器使用时，定期进行生物学指示剂检测。五、生物安全实验室安全自查制度为确保实验室生物安全制度、措施落实到位，避免生物安全事故，特制订本制度。实验室主管每年至少组织一次生物安全全面检查，检查内容包括：生物安全管理体系运行情况、生3.实验室主任负责实验室生物安全的全面管理，检查、督促生物安全监督职工作，每季度进行实验室室生物安全工作检查，检查内容包括：生物安全监督职工作记录、菌（毒）销毁情况、生物安全实验室的消毒和灭菌情况以及感染性废物的处理情况、生物安全设备的运行、维护情况、防护物资的储备情况。生物安全监督员负责实验室日常工作的生物安全监督、检查，内容包括生物安全管理制度执行情况、全事故发生。对于检查中发现的问题及时纠正，必要时制定纠正措施或实施整改，并进行跟踪验证。按照资料、档案管理制度保存所有检查记录，及时归档。六、生物安全实验室资料档案管理制度为确保生物安全实验室各类活动记录、资料按要求归档、保存，特制订本制度。与生物安全相关的各类活动的记录均应按照本制度执行。生物安全实验室的记录、资料保存不得少于20年。生物安全实验室记录、资料应至少包括：生物安全手册、生物安全管理制度、人员培训考核记录、生物安全检查记录、健康监护档案、事故报告、分析处理记录、废物处置记录、实验记录、菌（毒）效果监测记录等。生物安全实验室资料档案原则上不外借。因工作需要复制档案资料者需经批准。两人实施，做好销毁记录。七、意外事件处理及报告制度规定实验室职业暴露处理程序，规范发生职业暴露时处理原则、报告和登记流程。实验室工作人员和涉及处理职业暴露的有关人员。职责实验室操作人员在工作中发生职业暴露须按照本规定进行处理和报告程序；实验室负责人按照规定进行组织和控制职业暴露发生后的控制实施；实验室负责人负责组织试验人员职业暴露处理的培训和考核，并保存有关记录；实验室生物安全检查人员负责督察日常工作中生物安全工作的执行和应急样品的检查。步骤实验室发生职业暴露后按照既往进行的该种污染物的生物安全危害度评估结果染和扩散；进行流行病学调查和暴露人员的医学观察等原则和步骤进行处理；度降低病原微生物对暴露人员的伤害；同时，有效的污染区域进行防控，最大限度的防止污染物对周围人员和环境的污染。一般性的小型事故可在紧急医学处置后，要立即向实验室主任报告事故情况和处理方法，以及时发现处理中的疏漏之处，使处理尽量完善妥当。和实验室生物安全领导理小组要立即协调现场紧急处理和周围环境污染防控；协调医学专家评估职业暴露的危害性和对暴露人员的伤害程度；对药物可以治疗和预防该污染物感染的，力争在暴露后最短时间内开始预防性用药；留取暴露人员相应的标本备检，并同时进行医学观察。建议育龄妇女发生职业暴露和职业暴露后和进行预防性用药期间，是否需要避免或终止妊♘。接触物种类（培养液、血液或其他体液）治疗用药情况、首次用药时间（暴露后几小时或几天、药物毒副作用情况（包括肝、肾功能化验结果；定期检测的日期、检测项目和结果。4.1.6的效果；总结和评估病原微生物实验室工作程序中是否存在不当，发生暴露人员试验操作等过程是否存在失误，整改措施和实行。或污染实验台面等均视为安全事故，应立即进行紧急医学处置(根据事故情况采用相应的处理方法)。根据生物安全危害度和暴露程度，现场初步评估职业暴露危害程度和选择处理方式。（一）化学污染：立即用流动清水冲洗被污染部位。立即到医院就诊，根据造成污染的化学物质的不同性质用药。48小时内向有关部门汇报。（二）针刺伤：液，不可来回挤压，同时用流动水冲洗伤口；75%酒精或安尔碘消毒伤口，并用防水敷料覆盖；48小时内报告有关部门。（三）皮肤、粘膜、角膜被污染：皮肤若意外接触到血液或体液或其他化学物质时，立即用肥皂和流动水冲洗；若患者的血液、体液意外进入眼睛、口腔，立即用大量清水或生理盐水冲洗；小时内向有关部门报告。（四）标本污染：棉质工作服、衣物有明显污染时，可随时用有效氯500mg/l的消毒液，浸泡30-60分钟，然后冲洗干净。各种表面若被明显污染，用1000-2000mg/l30-60分钟，再擦除，拖把或抹布用后浸于上述消毒液内1小时。仪器污染应考虑消毒方法对仪器的损伤，和对检测项目的影响，选用适当的方法。实验室意外和事故的登记、报告和检测（一）重大意外和事故必须登记，包括：意外和事故的时间，地点，详细经过；(3)随访检测的时间，项目和结果。（二）意外和事故的报告和检测：行定期检测；发生小型事故时可在紧急处理后立即将事故情况和处理方法报告主管领导和专家。实验室应组织所有人员每年应至少进行一次演习。从工作区撤离的规定和程序：突遇突发事件如地震、水灾、火灾时，工作区工作的人员应及时撤离实验区发生泄漏事件或溢出事件影响到工作区人员安全时，工作区人员也应及时撤离工作区人员在明确撤离指示后不得再进入试验区已经撤离的工作区人员不得再进入工作区在工作区外的人员不得再进入工作区撤离路线按照通道中“安全通道”箭头指示，有序撤离。实验室紧急情况处理规程当发生自然灾害（如地震、水灾等）或设施出现故障时，有可能使保存菌（毒）种等感染性材料的容器发生破裂，而对操作者、环境和后续的抢险清理人员的健康造成威胁。生物安全柜等关键设备出现故障或/些情况的处理原则如下：（一）地震若发生地震，应根据实验室被破坏的程度进行处理。房屋倒塌BSL-2业人员在做好个人防护的前提下对实验室边消毒边清理，清理到菌（毒）种保存室。如果菌（毒）种的容器没有破坏，可安全移到其他安全的实验室存放。如果菌（毒）种的容器已有破坏和外溢应立即用可靠的方法进行彻底消毒灭菌。处理现场的人要进行适当的医学观察。实验室轻微损坏可由专业人员按照上述方法处理。（二）水灾万一发生水灾报警时应停止工作，转移菌（毒）可重新启动。（三）火灾不会迅速蔓延时，可力所能及地扑灭或控制火情，以便火灾不会殃及邻居。（四）停电呼吸，待正常后恢复正常呼吸；如时间较长，应加强个人防护，如佩带专用的头盔。（五）生物安全柜出现正压护的条件下进行消毒处理，撤离实验室。（六）房间正压而安全柜负压应视为房间轻微污染，此时危险不大，应停止工作，报告实验室负责人进行检修。（七）房间和安全柜均为正压封住缓冲间的外门。对半污染区进行消毒，个人消毒后进入第一缓冲间，锁住或封住进入半污染区的门。实验室污染。第三章实验室生物安全要求一、工作人员和实验室安全的一般要求吸烟实验室工作区内绝对禁止吸烟；点燃的香烟是易燃液体的潜在火种；香烟、雪茄或烟斗都是传染细菌和接触毒物的途径。食物、饮料及其它实验工作区内不得有食物、饮料及存在“手－口”接触可能的其它物质；实验室工作区内的冰箱禁止存放食物。化妆品实验工作区内禁止使用化妆品进行化妆，但允许并建议经常洗手的实验人员使用护手霜。眼睛和面部的防护处理腐蚀性或毒性物质时，须使用安全镜、面罩或其它保护眼睛和面部的防护用品。工作人员在实验室的危险区内不要佩戴隐形眼镜，除非同时使用护目镜或面罩。镜、面罩或面具式呼吸器。服装和个人防护装备应穿着符合实验室工作需要的服装，工作服应干净、整洁。当工作中有危险物喷溅到身上的可能个人防护服装应定期更换以保持清洁，如被危险物品严重污染，则应立即更换。鞋在工作区内，应穿舒适、防滑、并能保护整个脚面的鞋。在有可能发生液体溅溢的工作岗位，可材料的鞋。工作区。头发不得垂肩，应与离心机、切片机等正在运转的器械保持一定距离。胡须蓄有胡须的男性工作人员必须遵守上项的规定。手。接触血液、体液或其它污染物时，应立即洗手。锐利物品谨慎处理针头、解剖刀、和碎玻璃等锐利物品。使用后的针具不要折断、弯曲、破损、重48小时之内更换。二、工作环境“清洁”区和“非清洁”区之间设“缓冲区被指定为“非清洁”的区域，允许戴手套接触所有物品（）备，应该戴上手套，或在使用后立即彻底洗手。“清洁”和“非清洁”区都应保持整洁。实验台至少每天清洁、消毒一次，如有必要可以多次清洗外衣：外衣（实验服、工作服、和围裙）应悬挂在远离散热器、蒸汽管道、供暖装置、以及有明火的地方，不要挂在压缩气瓶或灭火器上，也不要挂在门的玻璃隔板上，妨碍视线的个人防护服要分开存放。如酸或碱性液体应放在视平线以下。较大的废弃物容器应靠近地面存放危险的装饰品。为便于清洁消毒，实验室内不应有织物装饰的用具或椅子。和药品等。实验室内应配备应急设备，如应急洗眼装置，酒精等消毒用品。实验室应安装非手触式洗手装置。实验室内应安装防蚊蝇装置，应定期投撒灭蟑螂、老鼠的药物。必须保持畅通，不得堵塞。无论任何时间、何种原因都不得阻塞通往灭火器、火警箱、防火毯、安全出口的道路。三、仪器设备的使用玻璃仪器用各种玻璃器皿时，应注意以下事项：用水冲洗干净。对于不能修复的玻璃仪器，应当按照废物处理。在修复玻璃仪器前应清除其中所残留的化学药品。不要用猛力取下玻璃试管上的塞子，粘紧的试管可用刀切开分离。脂涂在接口处作润滑剂。对粘结在一起的玻璃仪器，不要试图用力拉，以免伤手。()操作时，应当在保护挡板后进行。不要将加热的器皿放在过冷的台面上，以防止温度急剧变化而引起玻璃仪器破碎。接触过传染性物的玻璃器具，清洗之前，应先行消毒。高热操作玻璃器具时应戴隔热手套。在不影响实验质量的前提下，应尽量减少使用玻璃器具。天平天平刻度要校正，并记录，天平的托盘在每次使用后必须清洁，避免残留物污染。真空泵20～100mmHg0.001～5mmHg。油泵前必须接冷阱。循环水泵中的水必须经常更换，以免残留的溶剂被马达花引爆。使用完前蒸馏液先降温，再缓慢放气，达到平衡后再关闭。油泵必须经常换油。油泵上的排气口上要接橡皮管并通到通风橱内。通风橱通风橱的作用是保护实验室人员远离有毒有害气体，但也不能排出所有毒气。化学药品和实验仪器不能在出口处摆放。在做实验时不能关闭通风。加热加热通风常用有四种方法：油浴、水浴、加热套、电炉。伤害人体，放置时间较长的油浴应及时更换。化学品受热分解，发散有毒气体。使用水浴时要注意水浴中的水量，避免水被蒸发干，达不到加热的目的。电炉用于加热水和烘层析板，使用时必须有人照看，不能用手触摸加热板。温度计温度计一般有酒精温度计、水银温度计、石英温度计及热电偶等。低温酒精温度计测量范围 80℃--+5℃--+80--+360℃折断。水银温度计破碎后要用吸管吸去大部门水银，然后用硫磺覆盖剩余的水银。数日后进行清理。冷阱会产生下列危险：因低温引起皮肤冻伤。)。)。)。容器因脆化或加压而损坏。气体钢瓶意下述几点：钢瓶上原有的各种标记、刻印等一律不得除去。所有气体钢瓶必须装有调压阀。体放空以保护调压阀。(下安全帽后，必须谨慎小心以免无意中打开钢瓶主阀。在操作有毒或腐蚀性气体时，应戴防护眼睛、面罩、手套和工作围裙。()套上安全帽，以防阀门受损。空的或不再使用的钢瓶(空钢瓶应标注“空”字)应立即归还气体仓库。同时钢瓶不得放于走廊与门厅，以防紧急疏散时受阻及其它以外事件的发生。应经常检查钢瓶，特别是氢气钢瓶是否泄漏。(6)气体钢瓶有使用年限，定期试4眯压、过期钢瓶要报废。烘箱及真空干燥箱在使用时不准将二种不同样的样品同时放入一个干燥箱内进行干燥，以免样品的交叉污染。需干燥的样品必须用玻璃盖或有小孔的铝箔覆盖。真空烘箱加热应缓慢。加热后的真空烘箱应该冷却到室温后再解除真空。解除真空应缓慢进行防止样品飞溅。离心机气溶胶：离心过程中应控制气溶胶的产生在最低水平。操作：离心机只有在盖好盖板后，才能启动。紧的离心头或转头中进行。为防止气溶胶飞溢，应在离心停止30分钟后打开离心物。清洗：按照消毒隔离制度要求清洗离心机。平衡：离心时应保持合适的平衡，以保证离心的顺利进行。11、紫外灯造成眼损伤。12、冰箱和冰柜实验室中的冰箱均无防爆装置，不适用存放易燃、易爆挥发性溶剂。严禁在冰箱和冰柜内存放食品。所有存放在冰箱和冰柜内的低沸点试剂均应有规范的标签。放于冰箱和冰柜内的所有容器密封，并定期清洗冰箱及清除不需要的样品和试剂。13、小工具作捶子用，以及随意在扳手手柄加延长杆而使扳手过载。不允许用衣服口袋装带工具。四、有机溶剂的使用许多有机溶剂如果处理不当会引起火灾、爆炸、中毒事故。极度易燃溶剂的燃点通常为32°C。燃烧范围越大，危险性也越大。建立安全使用有机溶剂制度，包括以下几个方面：检查极易燃溶剂的储存和使用是否符合当地规定。使用和储存所需的最小数量。(地方使用，避免达到最低爆炸标准，使用中尽量少产生气体。洒，再用吸收剂清扫、装袋、封口，作为废溶剂处理。五、个人防护（危险的一种物理屏障。需要防护的部位及对应防护装备为：眼睛——眼镜（安全镜、护目镜面罩、防毒面具、帽子；躯体——防护服(实验服、隔离衣、连体衣、围裙)；手、足——手套、鞋套；耳（听力）——听力保护器等。验区，不得穿着进入办公区。工作服应定期消毒。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。必须使用面部保护装置（护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备。工作人员在生物安全实验室工作时不配戴隐型眼镜。在工作人员可能暴露于腐蚀性材料的所有场所均需提供紧急洗眼设备易接近的位置。严格限定穿着场所：工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）工作服或其他防护服。/或护目镜；③隔离衣；④口罩、防护面具、防护帽；⑤鞋套。所有个人防护装备不得带离实验室。眼睛的防护安全眼镜和护目镜备离开实验室区域。建议工作人员在生物安全实验室工作时不配戴隐型眼镜。如发生腐蚀性液体或生物危害液体喷溅至工作人员的眼睛时，应该（或在同事的帮助下）的洗眼台（洗眼装置）用大量缓流清水冲洗眼睛表面至少15-30分钟。洗眼装置应安装在室内明显和易取的地方，并保持洗眼水管的通畅，便于工作人员紧急时使用。冲洗时，应将眼皮撑开，小心地用自来水冲洗数分钟，再用蒸馏水冲，然后去医务室进行治疗。头面部防护装备口罩口罩仅可以保护部分面部免受生物危害物质如血液、体液、分泌液以及排泄物等喷溅物的污染仅适用于BSL-1或BSL-2使用的方法保护整个面部，单独使用不能对工作人员提供呼吸保护。使用要点：①佩戴时选择合适和合格的口罩②遮盖住鼻子、口和下颚③用橡皮筋（松紧带）固定在头部④调整在合适的面部位置并加以检验⑤卸下口罩时，首先提起面具下方橡皮筋（松紧带）越过头部，然后提起面具上方橡皮筋（松紧带使面具脱离面部，值得注意的是：一次性防毒面具使用完毕后应先消毒再丢弃。然后用手卸下防护面罩。头发染，同时保护负压实验室的空气过滤器。工作人员在实验操作时应佩带防护帽，罩住全部头发。备。使用和维护指导书包括在相应活动的安全操作程序手册中，并按指导书及培训的要求使用。手部防护装备（一）在实验室中为了防止手受到伤害，可根据需要选戴各种手套。)在接触感染性物质（血液、体液、分泌液、渗出液、以及接触粘膜和非完整皮肤时，必须使用合适的手套以保护工作人员避免受到污染物溅出或生物污染的事故所造成的损害。手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够的防护手套必须爱护使用，以确保无破损。对实验室工作人员进行手套选择、使用前及使用后的配戴及摘除等培训。防护手套主要有以下几种：剂，因为许多溶剂可以渗透聚乙稀，而在缝合处产生破洞。)，因为这些溶剂会造成手套溶胀而损害。橡胶手套：橡胶手套较医用乳胶手套厚。适于较长时间接触化学药品帆布手套：一般用于高温物体。规范的使用手套方法的几个要点：溶剂和生物危害物质的防护②手套的检查：在使用手套前应该检查手套是否退色、穿孔（漏损）检查手套的质量③手套的使用：一般情况下，佩戴一副手套即可BSL-1实验室；若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-2实验室）后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手套继续实验；戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服袖口④手套的清洗和更换：一次性手套不可再次使用。用后立即高压灭菌消毒然后丢弃；不得戴着手套离开实验室区域；在完成感染性物质实验，离开生物安全柜之前，应该脱去外层手套丢入生物安全柜内的高（BSL-2实验室损坏或手套污染时应及时更换手套。⑤避免手套“触摸污染（如眼镜等洗手部；注意尽量不去触摸工作台面和其他物品。手套后将手套口遮盖实验服袖；戴手套的手要远离面部。内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状；丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。(二)洗手装置可以是脚控或红外控制的洗手池，或者配置一个酒精擦手器。身体的防护或皮质的满口鞋。工作服一般不耐化学药品的腐蚀，故当其受到严重腐蚀后，这些工作服必须换下更新。开实验室区域之前应脱去防护服。每周清洗工作服一次。防护服应放置在专用存放处；污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中；定期清洁、消毒；当防护服已被危险材料污染后应立即更换BSL-2实验室要坚持穿鞋套或靴套；禁止在生物安全实验室中穿凉鞋、拖鞋、露趾和机织物鞋面的鞋。六、实验室防火安全制度防火隐患的估计和研究人值班看守的自动化实验操作。火源隐患常见的火源是明火、加热器件和电火花（电灯开关、电动机、摩擦和静电。存放易燃气体的场所，应安装防爆灯具和开关，使用专门防爆设计的电器设备。应对电气设备的接地、漏电和墙上插座的接地、极性进行年度检查。易燃性液体的供给量应控制在有效并安全进行实验的最小量。待处理的用过的可燃性液2/3箱储存易燃液体。如果确实需要，应存放在专门的防爆冰箱内。冰箱应远离火源。从储藏罐里倒出易燃液体，应在专门的储藏室或通风橱内进行。运送易燃液体时，其金属容器应有接地装置。加热易燃易爆液体（燃点低于94℃）必需在通风橱进行，不能用明火加热。装易燃易爆物的容器应经当地有关消防部门审核批准。严禁用明火直接加热有机溶剂，在大量使用有机溶剂时，室内禁止使用明火。存放乙醚的温度不得超过25认安全后方可离开。严禁私用电炉。走廊、楼梯禁止堆放易燃、易爆物品，试验室内禁止吸烟。使用蚊香时要远离衣服、被褥或其他易燃品。灭火实验室应配备足够扑灭各种火情并协助全体人员从失火现场及其附近撤离的相应消防设备。灭火器根据上级消防部门的规定配备、摆放灭火器，并根据要求对灭火器进行定期检查维修。（1）A类灭火器适用于固体可燃物(如纸、木材、塑料)引起的火灾。A类灭火器多数为消防水栓。B的方法。动灭火系统应建立年度安全检查，及随时检修、维护的制度。不能使用防火毯，在衣服着火后使用防火毯时立即采取“停、倒、滚”动作。从严重火情区撤离时，防火毯可用作个人防护装备。备有防火毯的实验室，防火毯应放在远离出口通道的地方。消防训练应对实验室工作人员进行防火安全训练。所有工作人员必须学会如何发布火警警报，学会遇有失火时应做到：11发出火警警报以求得帮助，并开始从失火区或建筑物撤离。如果可能，立即使用便携式灭火器进行灭火。如果不能扑灭火情，应把所有通向火场的门关紧，并用湿毛巾或床单堵住下面的门缝，以阻止火情的蔓延。（）不同火情采用不同灭火器的知识。（包括夜班和周末加班的人员撤离路线内。撤离时，应关闭所有门窗。七、实验室用电安全制度仪器用电法防止触电，但全部塑封无法接地的仪器例外。新设备在使用前也应进行同样的检查。在空气中存在达到一定数量的易燃气体或蒸汽有可能形成可爆性混合物的危险环境下，应使用指定专门为此设计的防爆电器设备。维修与维护所有电器设备的维修与维护只能由取得正式资格的维修人员进行。仪器的维修：除校准仪器外，仪器不得接电维修。维修时要确保手干燥，取下所有的饰物（表和戒指，然后谨慎操作。高压设备：为保证高压设备（如高压电泳仪等）的安全，要制定具体的详细操作规程。器设备，要安装接地故障断流器。即寻求消防部门援助。9.可燃气体或液体只应存放在经批准的贮藏柜或库中。贮存应符合国家相关的规定和标准。八、感染性废物的处理和处置实验室废弃物处置的管理应符合国家、地区或地方的相关要求。实验室废弃物管理的要求如下：废弃物的收集实验室废弃物应用单独的容器收集，可根据以下来分类：无感染的材料废纸、塑料或纸制品可用单层塑料袋收集；利器包括有针头的注射器、破碎的玻璃、刀片都应装入坚硬的不易刺破的容器中；感染动物的尸体和窝料应用带由生物危险标志的坚实的塑料袋收集。这种塑料袋应耐高压蒸汽消毒，并可保持其固体外形。也可使用不带密封盖子的坚硬容器。对于大量的液体废弃物应作特殊的处理。消毒之后可将有生物危险标志的袋子再装入一般袋中扔掉。混合材料混合废弃物的处理，如具有感染性和放射性污染的废弃物，或具有感染性和化学毒性2种有害物质的处理方式来处理。处理方法：菌运输过程中装在有盖的防渗漏容器中。培养基、组织、体液及其他具有潜在危险性的废弃物必须高压灭菌。实验室高压灭菌后的废弃物由专人收集运送至医院指定场所处理焚烧。(包括针头、小刀、金属和)应直接弃置于耐扎容器内。在去污染或最终处置之前，应存放在指定的安全地方，通常在实验室区内。所有弃置的实验室生物样本、培养物和被污染的废弃物在从实验室中取走之前，应使其达到生实验室废弃物应置于适当的密封且防漏容器中安全运出实验室。有害气体、气溶胶、污水、废液应经适当的无害化处理后排放，应符合国家相关的要求。动物尸体和组织的处置和焚化应符合国家相关的要求。3.废弃物的处置所有含有活微生物的废弃物应选择至少下列一种方式处理：高压蒸汽灭菌；化学消毒剂处理；①涉及到基因调控病原体的废弃物，应根据相关管理机构的要求来处理；②会熔化的废弃物要确保在蒸汽灭菌过程中不会阻塞灭菌器的排水孔；③使用有效的灭菌环境；④化学废弃物的处理要遵循国家相关规定；⑤放射性废弃物的处理要遵循国家相关规定。可寻求放射防护办公室的建议。⑥装利器的容器应用高温焚化来处理。用其他一些可行的方法处理。除上述处理，还可：①液体培养基，不是BSL-1实验室的，在排到下水道前应灭菌，其处理应符合有关规定；②一般无防护实验室废弃物同家庭废弃物处理九、溢出物的处理二级生物安全水平（BSL-2）溢出处理程序生