病原性球菌及杆菌课件

二、实验内容1.示教观察葡萄球菌、链球菌的形态2.观察肠道杆菌在SS培养基的生长情况及菌落特征，以及肠道杆菌的双糖发酵3.化脓性球菌的鉴定⑴三种葡萄球菌的色素观察⑵甲、乙型链球菌的溶血现象观察4.甘露醇发酵实验5.血浆凝固酶实验1.葡萄球菌、链球菌的培养物示教

普通琼脂平板血平板

菌落形状色素溶血性

金葡圆形凸起光滑中等大小金黄色+柠葡同上柠檬色-白葡同上白色-

表1葡萄球菌分类按照色素不同金黄色葡萄球菌（金黄色）表皮葡萄球菌（白色）腐生葡萄球菌（柠檬色）三种葡萄球菌的主要性状性状金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素

金黄色

白色白色或柠檬色血浆凝固酶+--甘露醇+--溶血性

β溶血--SPA+--耐热核酸酶+--致病性

强

弱

无

血平板甲型链球菌针尖小菌落、草绿色狭窄溶血环

(α溶血即不完全溶血）乙型链球菌针尖小菌落、透明宽大溶血环（β溶血即完全溶血）

巧克力血平板脑膜炎双球菌菌落透明似露滴状

表2

表3（伤寒杆菌、痢疾杆菌）（β溶血即完全溶血）若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁呈黑色。配合半固体培养基可观察肠道杆菌中的细菌动力。葡萄球菌、链球菌的培养物(α溶血即不完全溶血）柠葡同上柠檬色-配合半固体培养基可观察肠道杆菌中的细菌动力。Salmonella-ShigellaMediun++兔血浆兔血浆巧克力血平板原理：能产生血浆凝固酶的菌株倾入机体后使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白导致血浆凝固（致病性葡萄球菌产生血浆凝固酶）原理：能产生血浆凝固酶的菌株倾入机体后使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白导致血浆凝固（致病性葡萄球菌产生血浆凝固酶）SS平板：为强选择性培养基，内含胆盐、枸橼酸钠和煌绿，可抑制大肠杆菌和非肠道杆菌的生长；还含有乳糖和中性红，一般肠道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，产生碱性物质，故菌落呈淡黄色。普通琼脂平板血平板++甲型链球菌针尖小菌落、草绿色狭窄溶血环若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖,分解葡萄糖后所生成的少量酸可使底层pH降低；草绿色链球菌不溶血链球菌溶血性链球菌多为条件致病菌致病力强无致病性α溶血(狭窄草绿色溶血环

)β溶血（宽大透明溶血环）乙型溶血性链球菌溶血环大肠杆菌（非致病菌）在SS培养基上可形成相对较大，不透明，红色的菌落。伤寒杆菌在SS培养基上形成相对较小，半透明，无色或淡黄色的菌落，产生硫化氢的细菌菌落中心呈黑色。痢疾杆菌在SS培养基上形成的菌落与伤寒杆菌菌落相似。SS平板：为强选择性培养基，内含胆盐、枸橼酸钠和煌绿，可抑制大肠杆菌和非肠道杆菌的生长；还含有乳糖和中性红，一般肠道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，产生碱性物质，故菌落呈淡黄色。大肠杆菌发酵乳糖，产酸使指示剂变红，故菌落呈红色。大肠杆菌痢疾杆菌双糖铁培养基含葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁。指示剂为酚红。葡萄糖与乳糖的比例为1:10。若细菌分葡萄糖、乳糖产酸产气，使斜面与底层均呈黄色，且有气泡。（大肠杆菌)

若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖,分解葡萄糖后所生成的少量酸可使底层pH降低；而上层少量酸因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物，呈红色。（伤寒杆菌、痢疾杆菌）若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁呈黑色。（伤寒杆菌）配合半固体培养基可观察肠道杆菌中的细菌动力。

Salmonella-ShigellaMediun主要成分基础营养乳糖指示剂抑制剂分解乳糖不分解乳糖产酸PH指示剂变红色红色大菌落大肠杆菌等无明显变化无色半透明小菌落志贺菌等甘露醇发酵试验（示教）分别取金葡、白葡菌落接种到甘露醇发酵培养基中，置37℃培养箱，培养24h。金黄色葡萄球菌应能发酵甘露醇产酸。血浆凝固酶试验--玻片法（操作，1人/组）原理：能产生血浆凝固酶的菌株倾入机体后使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白导致血浆凝固（致病性葡萄球菌产生血浆凝固酶）方法：

兔血浆兔血浆12金葡白葡++凝集颗粒（+）不凝集（-）4、血浆凝固酶试验（试管法）

金葡菌白葡菌

++

兔血浆兔血浆

37℃30′水浴观察

凝集为阳性（胶冻样凝固状态）不凝集为阴性示教凝固酶实验（试管法）1.葡萄球菌、链球菌的培养物示教

普通琼脂平板血平板

菌落形状色素溶血性

金葡圆形凸起光滑中等大小金黄色+柠葡同上柠檬色-白葡同上白色-

表1

血平板甲型链球菌针尖小菌落、草绿色狭窄溶血环

(α溶血即不完全溶血）乙型链球菌针尖小菌落、透明宽大溶血环（β溶血即完全溶血）

巧克力血平板脑膜炎双球菌菌落透明似露滴状

表2

表3还含有乳糖和中性红，一般肠道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，产生碱性物质，故菌落呈淡黄色。++葡萄球菌、链球菌的培养物血浆凝固酶试验--玻片法而上层少量酸因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物，呈红色。甲型链球菌针尖小菌落、草绿色狭窄溶血环而上层少量酸因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物，呈红色。SS平板：为强选择性培养基，内含胆盐、枸橼酸钠和煌绿，可抑制大肠杆菌和非肠道杆菌的生长；伤寒杆菌在SS培养基上形成相对较小，半透明，无色或淡黄色的菌落，产生硫化氢的细菌菌落中心呈黑色。Salmonella-ShigellaMediun柠葡同上柠檬色-脑膜炎双球菌菌落透明似露滴状大肠杆菌发酵乳糖，产酸使指示剂变红，故菌落呈红色。三种葡萄球菌的主要性状中，置37℃培养箱，若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁呈黑色。葡萄球菌、链球菌的培养物配合半固体培养基可观察肠道杆菌中的细菌动力。普通琼脂平板血平板白葡同上白色-双糖铁培养基含葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁。（伤寒杆菌、痢疾杆菌）若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁呈黑色。金葡圆形凸起光滑中等大小金黄色+脑膜炎双球菌菌落透明似露滴状若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖,分解葡萄糖后所生成的少量酸可使底层pH降低；⑴三种葡萄球菌的色素观察柠葡同上柠檬色-⑵甲、乙型链球菌的溶血现象观察金葡圆形凸起光滑中等大小金黄色+4、血浆凝固酶试验（试管法）Salmonella-ShigellaMediun(α溶血即不完全溶血）大肠杆菌发酵乳糖，产酸使指示剂变红，故菌落呈红色。白葡同上白色-白葡同上白色-还含有乳糖和中性红，一般肠道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，产生碱性物质，故菌落呈淡黄色。金葡白葡葡萄球菌、链球菌的培养物若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖,分解葡萄糖后所生成的少量酸可使底层pH降低；抑制剂柠葡同上柠檬色-（伤寒杆菌、痢疾杆菌）金葡圆形凸起光滑中等大小金黄色+还含有乳糖和中性红，一般肠道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，产生碱性物质，故菌落呈淡黄色。而上层少量酸因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物，呈红色。白葡同上白色-血平板大肠杆菌（非致病菌）在SS培养基上可形成相对较大，不透明，红色的菌落。Salmonella-ShigellaMediun原理：能产生血浆凝固酶的菌株倾入机体后使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白导致血浆凝固（致病性葡萄球菌产生血浆凝固酶）菌落形状色素溶血性葡萄球菌、链球菌的培养物Salmonella-ShigellaMediun++Salmonella-ShigellaMediun柠葡同上柠檬色-SS平板：为强选择性培养基，内含胆盐、枸橼酸钠和煌绿，可抑制大肠杆菌和非肠道杆菌的生长；菌落形状色素溶血性（伤寒杆菌、痢疾杆菌）双糖铁培养基含葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁。双糖铁培养基含葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁。大肠杆菌发酵乳糖，产酸使指示剂变红，故菌落呈红色。（β溶血即完全溶血）Salmonella-ShigellaMediun巧克力血平板++凝固酶实验（试管法）Salmonella-ShigellaMediun兔血浆兔血浆兔血浆兔血浆三种葡萄球菌的主要性状柠葡同上柠檬色-大肠杆菌发酵乳糖，产酸使指示剂变红，故菌落呈红色。若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁呈黑色。菌落形状色素溶血性若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁呈黑色。⑵甲、乙型链球菌的溶血现象观察4、血浆凝固酶试验（试管法）乙型链球菌针尖小菌落、透明宽大溶血环若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁呈黑色。葡萄球菌、链球菌的培养物普通琼脂平板血平板血平板37℃30′水浴观察（β溶血即完全溶血）还含有乳糖和中性红，一般肠道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，产生碱性物质，故菌落呈淡黄色。还含有乳糖和中性红，一般肠道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，产生碱性物质，故菌落呈淡黄色。脑膜炎双球菌菌落透明似露滴状普通琼脂平板血平板血平板基础营养(α溶血即不完全溶血）乙型链球菌针尖小菌落、透明宽大溶血环普通琼脂平板血平板兔血浆兔血浆示教观察葡萄球菌、链球菌的形态若细菌只