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文档简介
第一章蛋白质的结构与功能
1.20种基本氨基酸中,除甘氨酸外,其余都是L-a一氨基酸.
2.支链氨基酸(人体不能合成:从食物中摄取):缀氨酸亮氨酸异亮氨酸
3.两个特殊的氨基酸:脯氨酸:唯一一个亚氨基酸甘氨酸:分子量最小,a-C原子不是
手性C原子,无旋光性.
4.色氨酸:分子量最大
5.酸性氨基酸:天冬氨酸和谷氨酸碱性氨基酸:赖氨酸、精氨酸和组氨酸
6.侧链基团含有苯环:苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸
7.含有一OH的氨基酸:丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸
8.含有一S的氨基酸:蛋氨酸和半胱氨酸
9.在近紫外区(220-300mm)有吸收光能力的氨基酸:酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸
10.肽键是由一个氨基酸的a—竣基与另•个氨基酸的a—氨基脱水缩合形成的酰胺键
11.肽键平面:肽键的特点是N原子上的孤对电子与碳基具有明显的共扰作用。使肽键中的
C-N键具有部分双键性质,不能自由旋转,因此。将C、H、0、N原子与两个相邻的a-C
原子固定在同一平面上,这一平面称为肽键平面
12.合成蛋白质的20种氨基酸的结构上的共同特点:氨基都接在与竣基相邻的a一原子上
13.是天然氨基酸组成的是:羟脯氨酸、羟赖氨酸,但两者都不是编码氨基酸
14.蛋白质二级结构的主要形式:①a一螺旋②B一折叠片层③B一转角④无规卷曲。a-
螺旋特点:以肽键平面为单位,a—C为转轴,形成右手螺旋,每3.6个氨基酸残基螺旋
上升一圈,螺径为0.54nm,维持a一螺旋的主要作用力是氢键
15.举例说明蛋白质结构与功能的关系
①蛋白质的一级结构决定它的高级结构
②以血红蛋白为例说明蛋白质结构与功能的关系:镰状红细胞性贫血患者血红蛋白中有一
个氨基酸残基发生了改变。可见••个氨基酸的变异(•级结构的改变),能引起空间结构改
变,进而影响血红蛋白的正常功能。但一级结构的改变并不一定引起功能的改变。
③以蛋白质的别构效应和变性作用为例说明蛋白质结构与功能的关系:a,别构效应、某物
质与蛋白质结合,引起蛋白质构象改变,导致功能改变。协同作用,•个亚基的别构效应
导致另一个亚基的别构效应。氧分子与Hb-个亚基结合后引起亚基构象变化的现象即为
Hb的别构(变构)效应。蛋白质空间结构改变随其功能的变化,构象决定功能。b.变性作
-1-
府,在某些物理或者化学因素的作用下,蛋白质特定的空间构象被破坏本质:破坏非共价
键和二硫键,不改变一级结构
以酶原激活为例说明蛋白质结构与功能的关系
©Anfinsen实验:可逆抑制剂以非共价键与酶或酶一底物复合物的特殊区域可逆结合成复
合物,并使酶活性暂时降低或消失;采用透析或超滤将未结合抑制剂除去,则抑制剂和酶
蛋白复合物解离,同时酶活性逐步恢复
⑤综上,•级结构决定蛋I白质的构象,构象决定功能,若级结构改变并不引起构象改变,
则功能不变,若一级结构改变引起构象改变,则功能改变。
16.蛋白质一级结构:氨基酸序列,化学键:肽键、二硫键
蛋白质二级结构:蛋白质分子中局部肽段主链原子的相对空间位置,化学键:氢键
蛋白质三级结构:在二级结构和模体等结构层次的基础上,由于侧链R基团的相互作用,
整条肽链进行范围广泛的折叠和盘曲,化学键:疏水键、离子键、氢
键、范德华力
蛋白质四级结构:蛋白质分子中各个亚基的空间排布及亚基接触部位的布局,化学键:
疏水键、氢键、离子键
17.在某一pH下,氨基酸解离成阴离子和阳离子的趋势及程度相同,成为兼性离子,成电
中性,此时的pH值为该氨基酸的等电点。
18.蛋白质胶体稳定的因素:①颗粒表面电荷②水化膜
19、蛋白质的分离和纯化
1、沉淀,见六、2
2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极
或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。
3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。
4、层析:
a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定PH时,各蛋白质的电荷量及性
质不同,故可以通过离子交换层析得以分离。如阴离子交换层析,含负电量小的蛋白质首
先被洗脱下来。
b.分子筛,又称凝胶过滤。小分子蛋白质进入孔内,滞留时间长,大分子蛋白质不能时入孔
内而径直流出。
5、超速离心:既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质的分子量。不同蛋白
-2-
质其密度与形态各不相同而分开。
第一章蛋白质的结构与功能测试题
一、名词解释
1.必需氨基酸
2.等电点
3.稀有氨基酸
4.非蛋白质氨基酸
5.蛋白质的一级结构
6.蛋白质的二级结构
7.结构域
8.蛋白质的三级结构
9.蛋白质的四级结构
10.超二级结构)
11.蛋白质的变性
12.蛋白质的复性
13.电泳
二、单项选择题
1.测得某一蛋白质样品的氮含量为0.40g,此样品约含蛋白质多少?
A.2.00gB.2.50gC.6.40gD.3.00gE.6.25g
2.下列含有两个竣基的氨基酸是:
A.精氨酸B.赖氨酸C.甘氨酸D.色氨酸E.谷氨酸
3.维持蛋白质二级结构的主要化学键是:
A.盐键B.疏水键C.肽键D.氢键E.二硫键
4.关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的是:
A.天然蛋白质分子均有的这种结构
B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性
C.三级结构的稳定性主要是次级键维系
D.亲水基团聚集在三级结构的表面biooo
-3-
E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基
5.具有四级结构的蛋白质特征是:
A.分子中必定含有辅基
B.在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上,肽链进一步折叠,盘曲形成
C.每条多肽链都具有独立的生物学活性
D.依赖肽键维系四级结构的稳定性
E.由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成
6.蛋白质所形成的胶体颗粒,在下列哪种条件下不稳定:
A.溶液pH值大于pl
B.溶液pH值小于pl
C.溶液pH值等于pl
D.溶液pH值等于7.4
E.在水溶液中
7.蛋白质变性是由于:biooo
A.氨基酸排列顺序的改变B.氨基酸组成的改变C.肽键的断裂D.蛋白质空间
构象的破坏E.蛋白质的水解
8.变性蛋白质的主要特点是:
A.粘度下降B.溶解度增加C.不易被蛋白酶水解
D.生物学活性丧失E.容易被盐析出现沉淀
9.若用重金属沉淀pl为8的蛋白质时,该溶液的pH值应为:
A.8B.>8C.<8D.<8E.>8
10.蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸?
-4-
A.半胱氨酸B.蛋氨酸C.胱氨酸D.丝氨酸E.瓜氨酸
1.下列氨基酸中哪一种是非必需氨基酸?
A.亮氨酸B.酪氨酸C.赖氨酸
D.蛋氨酸E.苏氨酸
2.下列哪种氨基酸属于亚氨基酸?
A.丝氨酸B.脯氨酸C.亮氨酸D.组氨酸
3.下列哪一项不是蛋白质a-螺旋结构的特点?
A.天然蛋白质多为右手螺旋B.肽链平面充分伸展
C.每隔3.6个氨基酸螺旋上升一圈。D.每个氨基酸残基上升高度为0.15nm.
4.下列氨基酸中哪一种不具有旋光性?
A.LeuB.AlaC.GlyD.SerE.Vai
5.下列关于蛋白质结构的叙述,哪一项是错误的?
A.氨基酸的疏水侧链很少埋在分子的中心部位
B.电荷的氨基酸侧链常在分子的外侧,面向水相
C.蛋白质的一级结构在决定高级结构方面是重要因素之一
D.蛋白质的空间结构主要靠次级键维持
6.持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是:
A.盐键B.疏水键C.氢键D.二硫键
7.维持蛋白质三级结构稳定的因素是:
A.肽键B.二硫键C.离子键D.氢键E.次级键
8.下列哪项与蛋白质的变性无关?
A.肽键断裂B.氢键被破坏
C.离子键被破坏D.疏水键被破坏
9.蛋白质的一级结构是指:
A.蛋白质氨基酸的种类和数目B.蛋白质中氨基酸的排列顺序
C.蛋白质分子中多肽链的折叠和盘绕D.包括A,B和C
三、多项选择题
(在备选答案中有二个或二个以上是正确的,错选或未选全的均不给分)
1.含硫氨基酸包括:
A.蛋氨酸B.苏氨酸C.组氨酸D.半胖氨酸
2.下列哪些是碱性氨基酸:
A.组氨酸B.蛋氨酸C,精氨酸D.赖氨酸
3.芳香族氨基酸是:
A.苯丙氨酸B.酪氨酸C.色氨酸D.脯氨酸
-5-
4.关于a-螺旋正确的是:
A.螺旋中每3.6个氨基酸残基为一周
B.为右手螺旋结构
C.两螺旋之间借二硫键维持其稳定
D.氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧
5.蛋白质的二级结构包括:
A.a-螺旋B.0-片层C.B-转角D.无规卷曲
6.下列关于小片层结构的论述哪些是正确的:
A.是一种伸展的肽链结构
B.肽键平面折叠成锯齿状
C.也可由两条以上多肽链顺向或逆向平行排列而成
D.两链间形成离子键以使结构稳定
7.维持蛋白质三级结构的主要键是:
A.肽键B.疏水键C.离子键D.范德华引力
8.下列哪种蛋白质在pH5的溶液中带正电荷?
A.pl为4.5的蛋白质B.pl为7.4的蛋白质
C.pl为7的蛋白质D.pl为6.5的蛋白质
9.使蛋白质沉淀但不变性的方法有:
A.中性盐沉淀蛋白B.糅酸沉淀蛋白
C.低温乙醇沉淀蛋白D.重金属盐沉淀蛋白
10.变性蛋白质的特性有:
A.溶解度显著下降B.生物学活性丧失
-6-
C.易被蛋白酶水解D.凝固或沉淀
四、填空题
1.组成蛋白质的主要元素有,,,.
2.不同蛋白质的含______量颇为相近,平均含量为%„
3.蛋白质具有两性电离性质,大多数在酸性溶液中带电荷,在碱性溶液中带电荷。当蛋
白质处在某一pH值溶液中时,它所带的正负电荷数相待,此时的蛋白质成为该溶液的pH值
称为蛋白质的0
4.蛋白质的一级结构是指在蛋白质多肽链中的。
5.在蛋白质分子中,一个氨基酸的a碳原子上的与另一个氨基酸a碳原子上的脱去一分
子水形成的键叫它是蛋白质分子中的基本结构键。
6.蛋白质颗粒表面的和是蛋白质亲水胶体稳定的两个因素。
7.蛋白质变性主要是因为破坏了维持和稳定其空间构象的各种键使天然蛋白质原有的
与性质改变。
8.按照分子形状分类,蛋白质分子形状的长短轴之比小于10的称为蛋白质分子形状的长短轴
之比大于10的称为o按照组成分分类,分子组成中仅含氨基酸的称,分子组成中除
了蛋白质部分还分非蛋白质部分的称其中非蛋白质部分称。
1.蛋白质多肽链中的肽键是通过一个氨基酸的基和另一氨基酸的___基连接而形成的。
2.大多数蛋白质中氮的含量较恒定,平均为—%加测得1克样品含氮量为10mg,则蛋白质含量为一%o
3.在20种氨基酸中,酸性氨基酸有和2种,具有羟基的氨基酸是和,
含硫的氨基酸有和»能形成二硫键的氨基酸是.
4.蛋白质中的、和3种氨基酸具有紫外吸收特性因而使蛋白质在280nm
处有最大吸收值。
5.精氨酸的pl值为10.76,将其溶于pH7的缓冲液中,并置于电场中,则精氨酸应向电场的方向
-7-
移动。
6.蛋白质的二级结构最基本的有两种类型,它们是和o
7.a-螺旋结构是由同一肽链的和间的一键维持的,螺距为每圈螺旋含
个氨基酸残基,每个氨基酸残基沿轴上升高度为。天然蛋白质分子中的a-螺旋大都属于
一手螺旋。
8.在蛋白质的a-螺旋结构中,在环状氨基酸______存在处局部螺旋结构中断。
9.维持蛋白质的一级结构的化学键有和;维持二级结构靠键;维持三级结构和四
级结构靠键,其中包括和.
10.今有甲、乙、丙三种蛋白质,它们的等电点分别为8.0、4.5和10.0,当在pH8.0缓冲液中,它们在电
场中电泳的情况为:甲乙丙O
11.谷氨酸的pK1(a-COOH)=2.19,pK2(a-NH+3)=9.67,pKR(R基尸4.25,谷氨酸的等电点为
12.一个a-螺旋片段含有180个氨基酸残基,该片段中有圈螺旋,该a-螺旋片段的轴长为.
五、判断题
()1.因为竣基碳和亚氨基氮之间的部分双键性质,所以肽键不能自由旋转。
()2.所有的蛋白质都有酶活性。
()3.蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序在很大程度上决定了它的构象。
()4.一氨基一段基氨基酸的pl为中性,因为-COOH和-NH2的解离度相同。
()5.蛋白质的变性是蛋白质立体结构的破坏,因此涉及肽键的断裂。
()6.蛋白质是生物大分子,但并不都具有四级结构。
()7.蛋白质是两性电解质,它的酸碱性质主要取决于肽链上可解离的R基团。
()8.在具有四级结构的蛋白质分子中,每个具有三级结构的多肽链是一个亚基。
()9.蛋白质的空间结构就是它的三级结构。
-8-
()10.具有四级结构的蛋白质,它的每个亚基单独存在时仍能保存蛋白质原有的生物活性。
六、简答题
1.蛋白质的a—螺旋结构有何特点?
2.什么是蛋白质的变性作用和复性作用?蛋白质变性后哪些性质会发生改变?
参考答案
一、名词解释
1.两性离子:指在同一氨基酸分子上含有等量的正负两种电荷,又称兼性离子或偶极离子。
2.必需氨基酸:指人体(和其它哺乳动物)自身不能合成,机体又必需,需要从饮食中获得的氨基酸。
3.氨基酸的等电点:指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值,用符号pl表示。
4.稀有氨基酸:指存在于蛋白质中的20种常见氨基酸以外的其它罕见氨基酸,它们是正常氨基酸的衍生
物。
5.非蛋白质氨基酸:指不存在于蛋白质分子中而以游离状态和结合状态存在于生物体的各种组织和细胞的
氨基酸。
6.构型:指在立体异构体中不对称碳原子上相连的各原子或取代基团的空间排布。构型的转变伴随着共价
键的断裂和重新形成。
7.蛋白质的一级结构:指蛋白质多肽捱中氨基酸的排列顺序,以及二硫键的位置。
8.构象:指有机分子中,不改变共价键结构,仅单键周围的原子旋转所产生的原子的空间排布。一种构象
改变为另一种构象时,不涉及共价键的断裂和重新形成。构象改变不会改变分子的光学活性。
9.蛋白质的二级结构:指在蛋白质分子中的局部区域内,多肽链沿一定方向盘绕和折叠的方式。
10.结构域:指蛋白质多肽链在二级结构的基础上进一步卷曲折叠成几个相对独立的近似球形的组装体。
11.蛋白质的三级结构:指蛋白质在二级结构的基础上借助各种次级键卷曲折叠成特定的球状分子结构的
构象。
12.氢键:指负电性很强的氧原子或氮原子与N-H或O-H的氢原子间的相互吸引力。
13.蛋白质的四级结构:指多亚基蛋白质分子中各个具有三级结构的多肽域以适当方式聚合所呈现的三维
结构。
14.离子键:带相反电荷的基团之间的静电引力,也称为静电键或盐键。
15.超二级结构:指蛋白质分子中相邻的二级结构单位组合在一起所形成的有规则的、在空间上能辨认的
二级结构组合体。
16.疏水键:非极性分子之间的一种弱的、非共价的相互作用。如蛋白质分子中的疏水侧链避开水相而相
互聚集而形成的作用力。
17.范德华力:中性原子之间通过瞬间静电相互作用产生的一种弱的分子间的力。当两个原子之间的距离
为它们的范德华半径之和时,范德华力最强。
18.盐析:在蛋白质溶液中加入一定一的高浓度中性盐(如硫酸氨),使蛋白质溶解度降低并沉淀析出的现
象称为盐析。
19.盐溶:在蛋白质溶液中加入少量中性盐使蛋白质溶解度增加的现象。
-9-
20.蛋白质的变性作用:蛋白质分子的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象。蛋白质在受到光照、
热、有机溶剂以及一些变性剂的作用时,次级键遭到破坏导致天然构象的破坏,但其一级结构不发生改
变。
21.蛋白质的复性:指在一定条件下,变性的蛋白质分子恢复其原有的天然构象并恢复生物活性的现象。
22.蛋白质的沉淀作用:在外界因素影响下,蛋白质分子失去水化膜或被中和其所带电荷,导致溶解度降
低从而使蛋白质变得不稳定而沉淀的现象称为蛋白质的沉淀作用。
23.凝胶电泳:以凝胶为介质,在电场作用下分离蛋白质或核酸等分子的分离纯化技术。
24.层析:按照在移动相(可以是气体或液体)和固定相(可以是液体或固体)之间的分配比例将混合成
分分开的技术。
二、单项选择题
1.B2,E3.D4.B5.E6.C7.D8.D9.B10.E
三、多项选择题
1.AD2.ACD3.ABD4.ABD5.ABCD
6.ABC7.BCD8.BCD9.AC10.ABC
四、填空题
1.碳氢氧氮
2.氮16
3.正负两性离子(兼性离子)等电点
4.氨基酸排列顺序
5.氨基较基肽键
6.电荷层水化膜
7.次级键物理化学生物学
8.球状蛋白质纤维状蛋白质单纯蛋白质结合蛋白质辅基
1.氨;较基;
2.16;6.25
3.谷氨酸;天冬氨酸;丝氨酸;苏氨酸
4.苯丙氨酸;酪氨酸;色氨酸;紫外吸收
5.负极
6.组氨酸;半胱氨酸;蛋氨酸
7.a-螺旋结构;即折叠结构
8.C=O;N=H;氢;0.54nm;3.6;0.15nm;右
9.脯氨酸;羟脯氨酸
10.极性;疏水性
11.蓝紫色;脯氨酸
12.肽键;二硫键;氢键;次级键;氢键;离子键;疏水键;范德华力
13.表面的水化膜;同性电荷
-10-
14.谷胱甘肽;疏基
15.增加;盐溶;减小;沉淀析出;盐析;蛋白质分离
16.带电荷量;分子大小;分子形状;方向;速率
17.两性离子;最小
18.FDNB法(2,4-二硝基氟苯法);Edman降解法(苯异硫氨酸酯法)
19.沉降法;凝胶过滤法;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS法)
20.不动;向正极移动;向负极移动;
21.两性离子;负;
22.3.22
23.氢键;
24.C;a;b
25.16672;66687;
26.50K;27nm
五、判断题
1.错:脯氨酸与苗三的反应产生黄色化合物,其它氨基酸与苗三明反应产生蓝色化合物。
2.对:在肽平面中,竣基碳和亚氨基缎之间的键长为0.132nm,介于C—N单键和C=N双键之间,具
有部分双键的性质,不能自由旋转。
3.错:蛋白质具有重要的生物功能,有些蛋白质是病,可催化特定的生化反应,有些蛋白质则具有其它的
生物功能而不具有催化活性,所以不是所有的蛋白质都具有酶的活性。
4.错:a-碳和较基碳之间的键是C-C单键,可以自由旋转。
5.对:在20种氨基酸中,除甘氨酸外都具有不对称碳原子,所以具有L-型和D-型2种不同构型,这两
种不同构型的转变涉及到共价键的断裂和从新形成。
6.错:由于甘氨酸的a-碳上连接有2个氢原子,所以不是不对称碳原子,没有2种不同的立体异构体,所
以不具有旋光性。其它常见的氨基酸都具有不对称碳原子,因此具有旋光性。
7.错:必需氨基酸是指人(或哺乳动物)自身不能合成机体又必需的氨基酸,包括8种氨基酸。其它氨基
酸人体自身可以合成,称为非必需氨基酸。
8.对:蛋白质的一级结构是蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序,不同氨基酸的结构和化学性质不同,因而
决定了多肽链形成二级结构的类型以及不同类型之间的比例以及在此基础上形成的更高层次的空间结
构。如在脯氨酸存在的地方a-螺旋中断,R侧链具有大的支链的氨基酸聚集的地方妨碍螺旋结构的形成,
所以一级结构在很大程度上决定了蛋白质的空间构象。
9.错:一氨基一竣基氨基酸为中性氨基酸,其等电点为中性或接近中性,但氨基和竣基的解离度,即pK
值不同。
10.错:蛋白质的变性是蛋白质空间结构的破坏,这是由于维持蛋白质构象稳定的作用力次级键被破坏所
造成的,但变性不引起多肽链的降解,即肽链不断裂。
11.对:有些蛋白质是由一条多肽链构成的,只具有三级结构,不具有四级结构,如肌红蛋白。
12.对:血红蛋白是由4个亚基组成的具有4级结构的蛋白质,当血红蛋白的一个亚基与弱结合后可加速
其它亚基与氧的结合,所以具有变构效应。肌红蛋白是仅有一条多肽链的蛋白质,具有三级结构,不具
有四级结构,所以在与氧的结合过程中不表现出变构效应。
-11-
13.错:Edman降解法是多肽链N端氨基酸残基被苯异硫氢酸酯修饰,然后从多肽链上切下修饰的残基,
经层析鉴定可知N端氨基酸的种类,而余下的多肽链仍为一条完整的多肽链,被回收后可继续进行下
一轮Edman反应,测定N末端第二个氨基酸。反应重复多次就可连续测出多肽链的氨基酸顺序。FDNB
法(Sanger反应)是多肽链N末端氨基酸与FDNB(2,4-二硝基氟苯)反应生成二硝基苯衍生物(DNP-
蛋白),然后将其进行酸水解,打断所有肽键,N末端氨基酸与二硝基苯基结合牢固,不易被酸水解。
水解产物为黄色的N端DNP-氨基酸和各种游离氨基酸。将DNP-氨基酸抽提出来并进行鉴定可知N端
氨基酸的种类,但不能测出其后氨基酸的序列。
14.对:大多数氨基酸的a-碳原子上都有一个自由氨基和一个自由较基,但脯氨酸和羟脯氨酸的a-碳原子
上连接的氨基氮与侧模的末端碳共价结合形成环式结构,所以不是自由氨基。
15.对:蛋白质是由氨基酸组成的大分子,有些氨基酸的R侧链具有可解离基团,如竣基、氨基、咪理基
等等。这些基团有的可释放H+,有的可接受H+,所以使得蛋白质分子即是酸又是碱,是两性电解质。
蛋白质分子中可解离R基团的种类和数量决定了蛋白质提供和接受H+的能力,即决定了它的酸碱性
质。
16.对:在具有四级结构的蛋白质分子中,每个具有三级结构的多肽链是一个亚基。
17.错:具有两个或两个以上肽键的物质才具有类似于双缩版的结构,具有双缩服反应,而二肽只具有一
个肽键,所以不具有双缩版;反应。
18.错:二硫键是由两个半胱氨酸的疏基脱氢融化而形成的,所以两个半胱氨酸只能形成一个二硫键。
19.对:盐析引起的蛋白质沉淀是由于大量的中性盐破坏了蛋白质胶体的稳定因素(蛋白质分子表面的水
化膜及所带同性电荷互相排斥),从而使蛋白质溶解度降低并沉淀,但并未破坏蛋白质的空间结构,所
以不引起变性。根据不同蛋白质盐析所需的盐饱和度分段盐析可将蛋白质进行分离和纯化。
20.错:蛋白质的空间结构包括二级结构、三级结构和四级结构三个层次,三级结构只是其中一个层次。
21.错:维持蛋白质三级结构的作用力有氢键、离子键、疏水键、范德华力以及二硫键,其中最重要的是
疏水键。
22.错:具有四级结构的蛋白质,只有所有的亚基以特定的适当方式组装在一起时才具有生物活性,缺少
一个亚基或单独一个亚基存在时都不具有生物活性。
23.错:蛋白质变性是由于维持蛋白质构象稳定的作用力(次级键和而硫键)被破坏从而使蛋白质空间结
构被破坏并山个丧失生物活性的现象。次级键被破坏以后,蛋白质结构松散,原来聚集在分子内部的疏
水性氨基酸侧链伸向外部,减弱了蛋白质分子与水分子的相互作用,因而使溶解度将低。
24.错:蛋白质二级结构的稳定性是由钱内氢键维持的,如a-螺旋结构和0-折叠结构中的氢键均起到稳定
结构的作用。但并非肽链中所有的肽键都参与氢键的形成,如脯氨酸与相邻氨基酸形成的肽键,以及自
由回转中的有些肽键不能形成链内氢键。
六、解答题
1.答:蛋白质一级结构指蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序。因为蛋白质分子肽链的排列顺序包含了
自动形成复杂的三维结构(即正确的空间构象)所需要的全部信息,所以一级结构决定其高级结构。
2.答:蛋白质的空间结构是指蛋白质分子中原子和基团在三维空间上的排列、分布及肽链走向。蛋白质的
空间结构决定蛋白质的功能。空间结构与蛋白质各自的功能是相适应的。
3.答。)多肽链主链绕中心轴旋转,形成棒状螺旋结构,每个蝶旋含有3.6个氨基酸残基,螺距为0.54nm,
氨基酸之间的轴心距为0.15nm.。
-12-
(2)a-螺旋结构的稳定主要靠链内氢键,每个氨基酸的N-H与前面第四个氨基酸的C=0形成氢键。
(3)天然蛋白质的a-螺旋结构大都为右手螺旋。
4.答:如折叠结构又称为小片层结构,它是肽隹主链或某一肽段的一种相当伸展的结构,多肽链呈扇面状
折叠。
(1)两条或多条几乎完全伸展的多肽鞋(或肽段)侧向聚集在一起,通过相邻肽链主链上的氨基和班基之
间形成的氢键连接成片层结构并维持结构的稳定。
(2)氨基酸之间的轴心距为0.35nm(反平行式)和0.325nm(平行式卜
(3)p•折叠结构有平行排列和反平行排列两种。
5.答:蛋白质的生物学功能从根本上来说取决于它的一级结构。蛋白质的生物学功能是蛋白质分子的天然
构象所具有的属性或所表现的性质。一级结构相同的蛋白质,其功能也相同,二者之间有统一性和相适
应性。
6.答:蛋白质变性作用是指在某些因素的影响下,蛋白质分子的空间构象被破坏,并导致其性质和生物活
性改变的现象。蛋白质变性后会发生以下几方面的变化:
(1)生物活性丧失;
(2)理化性质的改变,包括:溶解度降低,因为疏水侧链基团暴露;结晶能力丧失;分子形状改变,由球
状分子变成松散结构,分子不对称性加大;粘度增加;光学性质发生改变,如旋光性、紫外吸收光谱等均
有所改变。
(3)生物化学性质的改变,分子结构伸展松散,易被蛋白酶分解。
7.答:维持蛋白质空间构象稳定的作用力是次级键,此外,二硫键也起一定的作用。当某些因素破坏了这
些作用力时,蛋白质的空间构象即遭到破坏,引起变性。
8.答:蛋白质的重要作用主要有以下几方面:
(1)生物催化作用酶是蛋白质,具有催化能力,新陈代谢的所有化学反应几乎都是在酶的催化下进行
的。
(2)结构蛋白有些蛋白质的功能是参与细胞和组织的建成。
(3)运输功能如血红蛋白具有运输氧的功能。
(4)收缩运动收缩蛋白(如肌动蛋白和肌球蛋白)与肌肉收缩和细胞运动密切相关。
(5)激素功能动物体内的激素许多是蛋白质或多肽,是调节新陈代谢的生理活性物质。
(6)免疫保护功能抗体是蛋白质,能与特异抗原结合以清除抗原的作用,具有免疫功能。
(7)贮藏蛋白有些蛋白质具有贮藏功能,如植物种子的谷蛋白可供种子萌发时利用。
(8)接受和传递信息生物体中的受体蛋白能专一地接受和传递外界的信息。
(9)控制生长与分化有些蛋白参与细胞生长与分化的调控。
(10)毒蛋白能引起机体中毒症状和死亡的异体蛋白,如细菌毒素、蛇毒、蝎毒、葭麻毒素等。
9.答:(a)异硫氨酸苯酯;(b)丹黄酰氯;(c)服、p•范基乙醇;(d)胰凝乳蛋白酶;(e)CNBr;(f)
胰蛋白酶。
10.答:(1)可能在7位和19位打鸾,因为脯氨酸常出现在打弯处。
(2)13位和24位的半胱氨酸可形成二硫键。
(3)分布在外表面的为极性和带电荷的残基:Asp、Gin和Lys;分布在内部的是非极性的氨基酸残基:
Try、Leu和Vai;Thr尽管有极性,但疏水性也很强,因此,它出现在外表面和内部的可能性都有。
-13-
第二章核酸的结构与功能
核酸的分子组成:基本组成单位是核甘酸,而核甘酸则由碱基、戊糖和磷酸三种成分连接而成。
两类核酸:脱氧核糖核酸(DNA),存在于细胞核和线粒体内。
核糖核酸(RNA),存在于细胞质和细胞核内。
1>碱基:
NH2
NH20CH300
000NH2
胞口密咤胸腺喀碇尿口密咤鸟噂吟腺口票
吟
噂吟和喀噬环中均含有共辄双键,因此对波长260nm左右的紫外光有较强吸收,这-■重要的理化性质被
用于对核酸、核昔酸、核普及碱基进行定性定量分析。
2、戊糖:DNA分子的核甘酸的糖是P-D-2-脱氧核糖,RNA中为P-D-核糖。
3、磷酸:生物体内多数核甘酸的磷酸基团位于核糖的第五位碳原子上。
核酸的一级结构
核甘酸在多肽链上的排列顺序为核酸的级结构,核甘酸之间通过3',5'磷酸二酯键连接。
1.DNA主要存在与细胞核内,是遗传信息的携带者;RNA主要分布在细胞质中,主要参与
蛋白质的合成.核酸的基本组成单位是核苜酸,核甘酸山碱基、戊糖、磷酸组成。DNA碱基:
AGCT,RNA碱基:AGCU腺甘酸(AMP)鸟甘酸(GMP)胞昔酸(CMP)尿甘酸(UMP)
脱氧腺甘酸(dAMP)脱氧鸟甘酸(dGMP)脱氧胞甘酸(dCMP)脱氧胸甘酸(dTMP)
NMP:一磷酸NDP:二磷酸NTP:三磷酸
2.核甘(脱氧核甘)中戊糖的自由羟基与磷酸通过磷酸酯键连接成核甘酸,核甘酸之间以磷
酸二酯键连接形成核酸
3.核酸的一级结构:核甘酸的排列顺序
DNA的二级结构:MDNA的双螺旋结构①DNA两条链反向平行,形成右手螺旋结构②磷
酸核糖链在螺旋外部,碱基在螺旋内部③螺旋形成大小沟,相间排列④碱基平面与螺旋中心
轴垂直A=T,G三C配对,每10个碱基对,螺旋上升一圈,螺距为3.4nm1氢键维持双螺旋
横向稳定性,碱基堆积力维持双螺旋的纵向稳定性。
DNA的三级结构”DNA超螺旋a.负超螺旋:顺时针右手螺旋的DNA双螺旋b.正超螺旋:
反方向围绕它的轴扭转而成*DNA在真核细胞内的组装:①核小体:是染色质丝的最基本
单位②核小体的组成:组蛋白、DNA③核小体由核心颗粒、连接区DNA两部分组成:核心
-14-
颗粒包括组蛋白H2A,H2B,H3,H4各两分子构成的致密八聚体以及缠绕其上的7/4圈的
DNA链
4.RNA
HmRNA(半衰期最短)
ImRNA结构特点:从5,末端3,末端的结构依次是5,帽子结构、5,末端非编码区、决定多
肽氨基酸序列的编码区、3,末端非编码区和多聚腺昔酸尾巴。帽子和多聚尾A的功能:mRNA
核内向胞质的转化、mRNA的稳定性维系、翻译起始的调控
HmRNA功能:从DNA转录遗传信息,是蛋白质合成的模板把核内DNA的碱基顺序,按照碱
基互补的原则,抄录并转送至胞质,以决定蛋白质合成的氨基酸排列顺序。mRNA分子上每3个核甘酸为一
组,决定肽链上某一个氨基酸,为三联体密码。
(二)tRNA(在蛋白质的模板mRNA和原料氨基酸间起桥梁作用)(分子量最小)包括双氢尿嗑咤,
假尿嚏咤和甲基化的噂吟等。
ItRNA一级结构特点:①含10%—20%稀有碱基,②3味端为一CCA—OH,③5沫端大多
为G,④具有TWC环,⑤小分子核酸每分子含有60-120个核甘酸
HtRNA二级结构特点:三叶草结构,①氨基酸臂,②DHU环,③反密码子环,④TWC环
⑤额外环
IIItRNA三级结构特点:倒L形
㈢tRNA所携带的特定的氨基酸是反密码子所识别的密码子所编码的氨基酸
㈣tRNA功能:转运、活化氨基酸,反密码子识别密码子,参与蛋白质翻译
㈤rRNA:参与组成核蛋白体,作为提供蛋白质合成的场所
中问其一,答三者:1.DNA变性:某些理化因素作用下,碱基对间的氢键被打断,DNA双
链解开成两条单链的过程2.增色效应:变性后DNA溶液的紫外吸收作用增强的效应3.Tm
(溶解温度):DNA变性是在一个很窄的温度范围内发生的,这一范围内紫外吸收光值达
到最大值。通常将核酸加热变性过程中50%DNA变性时的温度称为该核酸的解链温度,又
称Tm。
5.核能的化学本质:核酸
6、DNA是遗传信息的载体,而遗传作用是由蛋白质功能来体现的,在两者之间RNA起着中
介作用。其种类繁多,分子较小,•般以单链存在,可有局部二级结构,各类RNA在遗传
信息表达为氨基酸序列过程中发挥不同作用。如:
名称功能
-15-
核蛋白体RNA(rRNA)核蛋白体组成成分
信使RNA(mRNA)蛋白质合成模板
转运RNA(tRNA)转运氨基酸
不均一核RNA(HnRNA)成熟mRNA的前体
小核RNA(SnRNA)参与HnRNA的剪接、转运
小核仁RNA(SnoRNA)rRNA的加工和修饰
第二章核酸化学测试题
一、单项选择题
1.自然界游离核苦酸中,磷酸最常见是位于:
A.戊糖的C-5'上
B.戊糖的C-2'上
C.戊糖的C-3'上
D.戊糖的C-2'和C-5'上
E.戊糖的C-2'和C-3'上
2.可用于测量生物样品中核酸含量的元素是:
A.碳
B.氢
C.氧
D.磷
E.氮
3.下列哪种碱基只存在于RNA而不存在于DNA:
A.尿噫嚏
B.腺喋吟
C.胞喳嚏
-16-
D.鸟噤吟
E.胸腺噫嚏
4.核酸中核苦酸之间的连接方式是:
A.2',3磷酸二酯键
B.糖昔键
C.2",5,磷酸二酯键
D.肽键
E.3),5磷酸二酯键
5.核酸对紫外线的最大吸收峰在哪一波长附近?
A.280nm
B.260nm
C.200nm
D.340nm
E.220nm
6.有关RNA的描写哪项是错误的:
A.mRNA分子中含有遗传密码
B.tRNA是分子量最小的一种RNA
C.胞浆中只有mRNA
D.RNA可分为mRNA、tRNA、rRNA
-17-
E.组成核糖体的主要是rRNA
7.大部分真核细胞mRNA的3'-末端都具有:
A.多聚A
B.多聚U
C.多聚T
D.多聚C
E.多聚G
8.DNA变性是指:
A.分子中磷酸二酯键断裂
B.多核甘酸链解聚
C.DNA分子由超螺旋一双链双螺旋
D.互补碱基之间氢键断裂
E.DNA分子中碱基丢失
9.DNATm值较高是由于下列哪组核昔酸含量较高所致?
A.G+A
B.C+G
C.A+T
D.C+T
E.A+C
-18-
10.某DNA分子中腺噂吟的含量为15%,
则胞喀嚏的含量应为:
A.15%
B.30%
C.40%
D.35%
E.7%
1.决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是:
A.-XCCA3'末端B."C环;
C.DHU环D.额外环E.反密码子环
2.根据Watson-Crick模型,求得每一微米DNA双螺旋含核昔酸对的平均数为::
A.25400B.2540C.29411D.2941E,3505
3.与片段TAGA互补的片段为:
A.AGATB.ATCTC.TCTAD.UAUA
4.含有稀有碱基比例较多的核酸是:
A.胞核DNAB.线粒体DNAC.tRNAD.mRNA
5.双链DNA的Tm较高是由于下列哪组核甘酸含量较高所致:
A.A+GB.C+TC.A+TD.G+CE.A+C
6.密码子GipA,所识别的密码子是:
A.CAUB.UGCC.CGUD.UACE.都不对
7.下列对于环核甘酸的叙述,哪一项是错误的?
A.cAMP与cGMP的生物学作用相反
B.重要的环核甘酸有cAMP与cGMP
C.cAMP是一种第二信使
D.cAMP分子内有环化的磷酸二酯键
二、多项选择题
(在备选答案中有二个或二个以上是正确的,错选或未选全的均不给分)
1.DNA分子中的碱基组成是:
A.A+C=G+T
-19-
B.C=G
C.A=T
D.C+G=A+T
2.含有腺甘酸的辅酶有:
A.NAD+
B.NADP+
C.FAD
D.FMN
3.DNA水解后可得到下列哪些最终产物:
A.磷酸
B.核糖
C.腺喋吟、鸟喋吟
D.胞喀嚏、尿喀嚏
4.关于DNA的碱基组成,正确的说法是:
A.腺嚓吟与鸟嚓吟分子数相等,胞嗜嚏与胸喷嚏分子数相等
B.不同种属DNA碱基组成比例不同
C.同一生物的不同器官DNA碱基组成不同
D.年龄增长但DNA碱基组成不变
-20-
5.DNA二级结构特点有:
A.两条多核甘酸链反向平行围绕同一中心轴构成双螺旋
B.以A-T,G-C方式形成碱基配对
C.双链均为右手螺旋
D.链状骨架由脱氧核糖和磷酸组成
6.tRNA分子二级结构的特征是:
A.3,端有多聚A
B.5端有C-C-A
C.有密码环
D.有氨基酸臂
7.DNA变性时发生的变化是:
A.链间氢链断裂,双螺旋结构破坏
B.高色效应
C.粘度增加
D.共价键断裂
8.mRNA的特点有:
A.分子大小不均一
B.有3'-多聚腺甘酸尾
C.有编码区
-21-
D.有5'C-C-A结构
9.影响Tm值的因素有:
A.一定条件下核酸分子越长,Tm值越大
B.DNA中G,C对含量高,则Tm值高
C.溶液离子强度高,则Tm值高
D.DNA中A,T含量高,则Tm值高
10.真核生物DNA的高级结构包括有:
A.核小体
B.环状DNA
C.染色质纤维
D.a-螺旋
三、填空题
1.核酸完全的水解产物是、和»其中又可分为碱和
__________碱。
2.体内的瞟吟主要有和;嗡咤碱主要有和。某些RNA
分子中还含有微量的其它碱基,称为=
3.喋吟环上的第位氮原子与戊糖的第位碳原子相连形成键,通过这种键相连而
成的化合物叫O
4.体内两种主要的环核昔酸是和。
5.写出下列核昔酸符号的中文名称:ATPbCDPo
-22-
6.RNA的二级结构大多数是以单股的形式存在,但也可局部盘曲形成结构,典型
的tRNA结构是结构。
7.tRNA的三叶草型结构中有环环环及环,还有.
8.tRNA的三叶草型结构中,其中氨基酸臂的功能是反密码环的功能是o
四、判断题
()1.DNA是生物遗传物质,RNA则不是。
()2.脱氧核糖核昔中的糖环3'位没有羟基。
()3.核酸中的修饰成分(也叫稀有成分)大部分是在tRNA中发现的。
()4.真核生物mRNA的5'端有一个多聚A的结构。
()5.DNA的Tm值随(A+T)/(G+C)比值的增加而减少。
()6.B-DNA代表细胞内DNA的基本构象,在某些情况下,还会呈现A型、Z型和三股螺旋的局部构
象。
()7.生物体内,天然存在的DNA分子多为负超螺旋。
()8.mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。
()9.tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。
五、简答题
1.将核酸完全水解后可得到哪些组分?DNA和RNA的水解产物有何不同?
2.计算下列各题:
(1)T7噬菌体DNA,其双螺旋链的相对分子质量为2.5x107。计算DNA链的长度(设一对核甘酸的平
均相对分子质量为650卜
(2)相对分子质量为130x106的病毒DNA分子,每微米的质量是多少?
(3)编码88个核甘酸的tRNA的基因有多长?
3.核酸分子中是通过什么键连接起来的?
-23-
4.DNA分子二级结构有哪些特点?
5.在稳定的DNA双螺旋中,哪两种力在维系分子立体结构方面起主要作用?
参考答案
一、单项选择题
1.A2.D3.A4.E5.B6.C7.A8.D9.B10.D
二、多项选择题
1.ABC2.ABC3.AC4.BD5.ABCD
6.DE7.AB8.ABC9.ABC10.AC
三、填空题
1.磷酸含氮碱戊糖含如碱瞟吟嗡院
2.腺嘎吟鸟喙吟胞噂咤尿喽症胸腺噂咤稀有碱基
3.91糖昔键噪吟核音
4.cAMPcGMP
5.三磷酸腺昔脱氧二磷酸胞昔
6.多核苦酸链双螺旋三叶草
7.二氧尿嗡淀反密码T<pC额外氨基酸膏
8.与氨基酸结合辨认密码子
四、判断题
1.错:RNA也是生命的遗传物质。
2.错:脱氧核糖核昔中的糖环2'位没有羟基。
-24-
3.错:真核生物的染色体为DNA与组蛋白的复合体,原核生物的染色体为DNA与碱性精胺、亚精胺结
合。
4.错:核酸的紫外吸收与溶液的pH值有关。
5.错:生物体的不同组织中的DNA,其碱基组成也不同。
6.对:核酸中的修饰成分(也叫稀有成分)大部分是在tRNA中发现的。
7.错:DNA的Tm值和GC含量有关,GC含=高则Tm高。
8.错:真核生物mRNA的3.端有一个多聚A的结构。
9.对:(G+C)含量减少,DNA的Tm值减少,(A+T)/(G+C)比值的增加。
10.对:在细胞内,B-DNA代表DNA的基本构象,但在不同某些情况下,也会呈现
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