巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析

（优选）巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析当前第1页\共有60页\编于星期三\3点一、巴比妥类药物的结构分析基本结构：1.环状丙二酰脲类2.R1=R2=H时，为巴比妥酸。3.多为巴比妥酸的5,5-二取代物，少数为1,5,5-三取代物或C2为硫取代。第一节巴比妥类药物的分析当前第2页\共有60页\编于星期三\3点代表药物：5,5-二取代R1R2巴比妥苯巴比妥戊巴比妥

异戊巴比妥司可巴比妥(速可眠)

当前第3页\共有60页\编于星期三\3点1,5,5-三取代甲苯巴比妥当前第4页\共有60页\编于星期三\3点己琐巴比妥

1,5,5-三取代当前第5页\共有60页\编于星期三\3点硫喷妥钠C2上S取代当前第6页\共有60页\编于星期三\3点二、理化性质白色结晶或结晶性粉末；具有一定的熔点；微溶或极微溶于水，易溶于有机溶剂，钠盐则易溶于水，难溶于有机溶剂；六元环结构比较稳定，一般不开环，与碱液共沸则水解开环，产生氨气。当前第7页\共有60页\编于星期三\3点（一）弱酸性当前第8页\共有60页\编于星期三\3点二级电离：++#19.（五）紫外吸收光谱当前第9页\共有60页\编于星期三\3点（二）水解反应红色石蕊试纸变蓝应用：鉴别巴比妥类药物

JP（15）采用此反应鉴别异戊巴比妥和巴比妥1、巴比妥类药物2、巴比妥类药物钠盐+H2O当前第10页\共有60页\编于星期三\3点（三）与重金属离子的反应1.与银盐的反应白色沉淀应用：鉴别、含量测定（Ch.P）巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析.ppt#23.幻灯片23当前第11页\共有60页\编于星期三\3点2.与铜盐的反应(Zwikker试验)

当前第12页\共有60页\编于星期三\3点注意：a.巴比妥类药物呈紫堇色或生成紫色沉淀－－鉴别试验（Ch.P）

b.含S巴比妥类药物显绿色硫喷妥—特征反应

d.吡啶作用：1)吸收H+使巴比妥类易解离2)孤对电子生成配位体

c.可区别巴比妥类与硫代巴比妥类药物；5，5-二取代基不同的巴比妥类药物生成的化合物在氯仿中的溶解度不同，可用于本类药物的鉴别。当前第13页\共有60页\编于星期三\3点3.与钴盐反应(Parri试验)

紫堇色应用：鉴别、含量测定当前第14页\共有60页\编于星期三\3点注意：反应在无水条件下；溶剂：无水乙(甲)醇

b.

钴盐：醋酸钴、硝酸钴或氧化钴

c.碱：以有机碱为好——异丙胺

当前第15页\共有60页\编于星期三\3点4.与汞盐反应当前第16页\共有60页\编于星期三\3点（四）与香草醛反应－－－丙二酰脲基团中的H巴比妥类＋香草醛缩和棕红色化合物浓H2SO4当前第17页\共有60页\编于星期三\3点（五）紫外吸收光谱#10.幻灯片10当前第18页\共有60页\编于星期三\3点当前第19页\共有60页\编于星期三\3点（六）色谱行为1.TLC2.HPLC（七）显微结晶－－－－生物样品中微量巴比妥类药物的检验巴比妥：长方形苯巴比妥：球形花瓣状巴比妥铜吡啶：十字形紫色苯巴比妥铜吡啶：浅紫色细小不规则或类菱形当前第20页\共有60页\编于星期三\3点三、鉴别试验母核的反应－－－本类药物共有的反应取代基的反应－－－类内区别当前第21页\共有60页\编于星期三\3点（一）丙二酰脲类鉴别反应－－母核反应（ChP）1.银盐反应

取供试品约0.1g，加碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2min，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即生成白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。

取供试品约50mg，加吡啶溶液（110）5ml，溶解后加铜吡啶试液1ml，即显紫色或生成紫色沉淀。2.铜盐反应巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析.ppt#12.幻灯片12当前第22页\共有60页\编于星期三\3点（二）特殊取代基或元素的鉴别反应1.芳环反应－－－苯巴比妥及钠盐（1）硝化反应黄色（2）硫酸－亚硝酸钠反应（苯巴比妥及钠盐Ch.P）苯巴比妥＋H2SO4-NaNO2橙黄色

橙红色当前第23页\共有60页\编于星期三\3点（3）与甲醛－硫酸反应（苯巴比妥及钠盐ChP）2.不饱和取代基的鉴别反应－－司可巴比妥钠加成加成氧化当前第24页\共有60页\编于星期三\3点3.硫元素的反应－－硫喷妥钠（Ch.P）硫喷妥钠应用：区别硫代巴比妥与巴比妥类（四）IR巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析.ppt#43.幻灯片43（三）测定熔点当前第25页\共有60页\编于星期三\3点四、特殊杂质检查（一）苯巴比妥的特殊杂质检查1.酸度－－－副产物苯基丙二酰脲2.溶液澄清度－－－乙醇不溶性杂质3.中性或碱性物质－－－副产物、分解产物4.有关物质---HPLC主成分自身对照（二）司可巴比妥钠的特殊杂质检查1.溶液澄清度－－－水不溶性杂质2.中性或碱性物质－－－副产物、分解产物当前第26页\共有60页\编于星期三\3点五、含量测定（一）银量法1.原理白色当前第27页\共有60页\编于星期三\3点2.测定方法

取供试品用甲醇溶解，加入碳酸钠，照电位法，用硝酸银滴定液滴定。3.终点指示

稍过量的Ag+与巴比妥类药物生成白色浑浊银－玻璃电极电位法

当前第28页\共有60页\编于星期三\3点4.举例异戊巴比妥的测定方法（ChP）取本品约0.2g，精密称定，加甲醇40ml使溶解，再加新鲜配制的3%无水碳酸钠溶液15ml，照电位滴定法，用硝酸银滴定液（0.1mol/L）滴定，即得。每1ml硝酸银滴定液（0.1mol/L）相当于22.63mg的C11H18N2O3。当前第29页\共有60页\编于星期三\3点5.讨论（1）化学计量关系：1:1（2）优点:操作简便、专属性强（3）缺点:a.以浑浊指示终点难于观察

b.温度影响大

c.解决方法:以甲醇为溶剂电位法指示终点（4）Na2CO3的作用当前第30页\共有60页\编于星期三\3点(二)溴量法1.原理＋Br2

(定量过量)1C12H17N2NaO3～1Br2当前第31页\共有60页\编于星期三\3点

司可巴比妥钠（ChP）取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水l0ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液(0.05mol/L)25m1，再加盐酸5m1，立即密塞并振摇1min，在暗处静置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液l0ml，立即密塞，摇匀后用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每lml溴滴定液(0.05mol/L)相当于13.01mg的C12H17N2NaO3。2.测定方法当前第32页\共有60页\编于星期三\3点3.讨论

（1）化学计量关系：1:1（2）密塞目的（3）为何在近终点时加指示剂（4）空白试验校正当前第33页\共有60页\编于星期三\3点（三）酸碱滴定法1.原理++2.测定方法（1）水－乙醇混合溶剂滴定剂：氢氧化钠指示剂：麝香草酚酞终点颜色：淡蓝色电位法指示终点当前第34页\共有60页\编于星期三\3点（2）胶束水溶液－－－表面活性剂使巴比妥类药物的酸性增强滴定剂：氢氧化钠溶剂：有机表面活性剂：溴化十六烷基三甲基苄铵指示剂：麝香草酚酞电位法指示终点（3）非水溶液－－－巴比妥类药物的酸性增强有机溶剂：二甲基甲酰铵、甲醇、丙酮等滴定剂：甲醇钾（钠）、氢氧化四丁基铵指示剂：麝香草酚蓝电位法指示终点当前第35页\共有60页\编于星期三\3点（四）紫外分光光度法1.原理巴比妥类药物在碱性介质中电离为具有紫外吸收的结构2.特点（1）专属性强，灵敏度高（2）用于巴比妥类药物原料及制剂的含量测定（3）体内药物的检测当前第36页\共有60页\编于星期三\3点3.测定方法（1）直接紫外分光光度法a.根据样品溶液的pH值，选用对应的max

b.采用对照品法，计算药物含量当前第37页\共有60页\编于星期三\3点

取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于硫喷妥钠0.25g），置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，量取此溶液用0.4%氢氧化钠溶液定量稀释制成每1ml中约含5μg的溶液；另取硫喷妥对照品，加0.4%氢氧化钠溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含5μg的溶液。照分光光度法，在304nm波长处测定吸收度，根据每支的平均装量计算。每1mg硫喷妥相当于1.091mg的C11H17N2NaS。c.举例：当前第38页\共有60页\编于星期三\3点(2)提取分离后紫外分光光度法－－－苯巴比妥钠【USP(24)】可消除干扰物质对测定的影响当前第39页\共有60页\编于星期三\3点（五）HPLCRP-HPLCHPLC测定苯巴比妥片的含量（ChP）当前第40页\共有60页\编于星期三\3点六、体内药物分析RP-HPLC同时测定血清中巴比妥类的浓度GC-MS同时测定人体液中巴比妥药物HPCE法测定体内尿液中巴比妥和苯巴比妥两种药物LC-MS联用技术监测巴比妥类药物当前第41页\共有60页\编于星期三\3点巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析.ppt#26.幻灯片26苯巴比妥当前第42页\共有60页\编于星期三\3点

第二节苯并二氮卓类药物的分析一、基本结构与主要化学性质1.结构与典型药物：苯并二氮杂卓类药物为含氮杂原子、六元和七元环双并合而成的有机化合物。其中1,4-苯并二氮杂卓类药物是目前临床应用最广泛的镇静剂。当前第43页\共有60页\编于星期三\3点

地西泮（1959年合成）氯氮卓（1955年合成）当前第44页\共有60页\编于星期三\3点奥沙西泮当前第45页\共有60页\编于星期三\3点2.主要化学性质（1）二氮杂卓环为七元环，环上氮原子具有碱性，苯基的取代使碱性降低，可进行非水滴定法测定；（2）环一般比较稳定，可在强酸性下水解，形成相应的二苯甲酮衍生物，可用于鉴别和比色测定。（地西泮水解生成芳仲胺基和甘氨酸）（3）UV吸收，用于含量测定；（4）本品多为游离碱，不溶于水，而溶于甲醇、乙醇和氯仿中。当前第46页\共有60页\编于星期三\3点二、鉴别试验（一）化学鉴别1.沉淀反应－生物碱性质

a.氯氮卓和阿普唑仑的盐酸液(9→1000)，遇碘化铋钾试液，生成橙红色沉淀。b.盐酸氟西泮的水溶液和氯硝西泮的稀盐酸溶液遇碘化铋钾试液，也生成橙红色沉淀。c.阿普唑仑的盐酸溶液(9→1000)，遇硅钨酸试液，生成白色沉淀。当前第47页\共有60页\编于星期三\3点2.硫酸－荧光反应苯并二氯杂卓类药物溶于硫酸后，在紫外光(365nm)下，呈现不同颜色的荧光。

地西泮

黄绿色黄色氯氮卓黄色紫色艾司唑仑+H2SO4亮绿色+稀硫酸天蓝色硝西泮淡蓝色蓝绿色奥沙西泮

淡黄绿色当前第48页\共有60页\编于星期三\3点3.水解后呈芳伯胺反应氯氮卓、艾司唑仑和奥沙西泮的盐酸溶液(1→2)，缓缓加热煮沸，放冷，加亚硝酸钠和碱性β-萘酚试液，生成橙红色沉淀，而后者放置色渐变暗。当前第49页\共有60页\编于星期三\3点4.分解产物的反应有机氯化合物，用氧瓶燃烧法破坏，生成氯化氢，以5％氢氧化钠溶液吸收，加硝酸酸化，显氯化物反应。5.氯化铜焰色反应含氯的药物，在铜网上燃烧发出氯化铜的绿色火焰。此反应药典未用于本类药物鉴别。

当前第50页\共有60页\编于星期三\3点（二）紫外特征吸收和红外吸收光谱当前第51页\共有60页\编于星期三\3点（三）色谱法TLCHPLC当前第52页\共有60页\编于星期三\3点三、特殊杂质的检查（一）有关物质检查

1.氯氮卓中有关物质的检查USP(24):薄层色谱法（杂质对照品法）BP（2003）:薄层色谱法（高低浓度对比法、杂质对照品法）ChP：HPLC法（杂质对照品法、主成分自身对照法）溶液的澄清度控制中间体等水不溶性杂质2.三唑仑中有关物质的GC法（USP）当前第53页\共有60页\编于星期三\3点（一）非水溶液滴定法是国内外药典采用较多的含量测定方法。对于：a.在水溶液中不能滴定的化合物，一些很弱的酸、碱以及某些盐类，在水溶液中进行滴定时，没有明显的滴定突跃，终点难于掌握；b.在水溶液中不溶的化合物，有些有机化合物在水中溶解度很小，以水作为滴定介质受到一定的限制。

四、含量测定当前第54页\共有60页\编于星期三\3点1.定义非水滴定：在水以外的溶剂中进行的酸碱滴定分析方法。（1）酸性溶剂：有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强相对碱度。（2）碱性溶剂：有机弱酸在碱性溶剂中可显著地增强相对酸度。（3）两性溶剂：具有酸、碱性能，如methanol。（4）惰性溶剂：没有酸、碱性的溶剂，丙酮、氯仿。当前第55页\共有60页\编于星期三\3点2.应用讨论（1）适用范围

pKb为8～13的弱碱性药物可用本法滴定。一般来说，当Kb为10－8～10－10时，宜选冰醋酸作溶剂；Kb为10－10～10－12时，宜选用冰醋酸与醋酐的混合溶剂作溶剂；Kb＜10－12时，应用醋酐作溶剂。另外