急性白血病的系别判断 王卉 河北燕达陆道培医院

急性白血病的系别判断王卉河北燕达陆道培医院检验科副主任ꢀ

流式细胞室主任（副院级）信纳克实验室主任，内容FCM判断AL的系别特殊情况下的系别判断1FCM判断AL系别做免疫分型的基本思路根据与正常标本的对比，找出幼稚细胞群根据该群细胞表达的标志，判断细胞性质：系别、阶段根据其他系别标志的表达情况，做鉴别诊断髓系要看其他髓系亚群的比例根据血液病诊断标准，做出疾病诊断2流式细胞术判断急性白血病

急性白血病：

20%或者25%以上细胞

表达早期标志(CD34,HLA-DR,TdT)或者不表达成熟标志

系别标志

髓系：MPO,CD13,CD33,CD117,CD15,CD11b,CD14,CD64,CD36,CD11c,CD61,CD41a,CD42a

B系cCD79a,CD19,CD22,CD10,cIgM,CD20,kappa,lambda

T系CD2,cCD3ε,CD5,CD7,CD1a,CD4,CD8,TCR,CD3AML

M4Eo3特殊情况下的系别判断急性白血病中伴系标志表达MPO73%0CD1429%0CD1390%25%32%CD1551%21%9%CD3385%2%CD65sCD117AML57%79%ALL-TALL-B14%11%0030%11%2.4%CD2cCD30-1.2%100%0CD4CD54%CD7CD5613%22%6%TdT18%69%86%AML18%57%6%63%47%ALL-TALL-B61.1%19%90%2%100%2.4%CD218%57%6%cCD30-1.2%100%0CD4CD54%CD7CD5613%22%6%TdT18%69%86%AML63%47%ALL-TALL-B61.1%19%90%2%100%2.4%4欧洲白血病免疫分型研究组（EGIL）积分系统积分B细胞系cCD79acIgMT细胞系髓系2CD3(c/m)

MPO抗TCRcCD22CD191CD2CD5CD8CD10TdTCD117CD20CD13CD33CD65CD14CD15CD64CD100.5TdTCD24CD7CD1a2008年WHO细胞系别确定标准：髓系MPO（流式细胞术、免疫组化或者细胞化学）或单核系分化（非特异性酯酶弥漫性阳性，或者CD11c、CD14、CD36、CD64、溶酶体，两个及以上阳性）T系胞浆CD3

（流式抗体，PE或APC等强荧光素，强度接近正常T）或胞膜CD3（MPAL中比较罕见）B系CD19强表达加下述标志中至少一个强表达：CD79a、胞浆CD22、CD10或CD19弱表达加下述标志中至少两个强表达：CD79a、胞浆CD22、CD1052008

WHO附加注意事项cCD3最好选用强荧光素PE或者APC，强度要和标本中剩余的正常T细胞一样或者接近罕见情况下，CD19阴性也可以归为B系，但必须小心，因为CD79a和CD10都缺乏特异性两个诊断标准谁优谁劣？6MPAL预后更差，EGIL分类比WHO分类OS更显著。21岁以下MPAL预后好，EGIL评分更明显WHO与EGILOS无差别72016WHO附加注意事项有些流式的MPO抗体与B淋母有非特异性结合，少数真的MPO阳性，这类病例意义不明。ALL-B如果髓系成分只有MPO阳性，诊断需谨慎。这种情况下其他指标如细胞化学POX，流式的其他髓系标志CD117,CD13,CD33有助于帮助判断。MPAL中，系别标志的荧光强度，FSC也有助于诊断：如淋系成分会强表达淋系标志，弱表达髓系标志，FSC偏小；髓系成分反之亦然。急性系列不清白血病（ALAL)

主要包括三种：

急性未分化型白血病（AUL）：缺乏足够的形态学、细胞化学、免疫分型证据表明原始细胞为髓系或者淋系

急性无法分类白血病

急性混合细胞白血病：

急性双克隆白血病：两群以上细胞，分别有髓系和/或T、B系的形态学和/或免疫表型特征

急性双表型白血病：一群细胞同时有B、T系或者髓系的形态学和/或免疫表型特征

其他罕见：三系白血病(T/B/M)8ALAL主要鉴别点

系别抗体的数量、质量（表达强度）、特异性系别抗体数量与质量AUL1个非特异性抗体急性无法分类白血病2个非特异性，或者1个特异性弱表达MPAL1个特异性+1个非特异性或者三个非特异性

注意：荧光强度很重要，伴随表达往往弱表达，排除细胞本底的影响，高表达往往提示有此系别系别标志

特异性高的系别标志：

髓系：MPO、CD64、CD14、CD61、CD42b、CD41a、CD235a

T系：cCD3、CD3、TCRab,TCRrd

B系：c/sIgH、c/skappa、c/slambda、CD79b（cCD79a、CD22分病种相对特异性高）

特异性不高的系别标志

髓系：CD117、CD13、CD33、CD15、CD11b、CD11c

T系：CD2、CD7、CD5、CD8、CD1a

B系：CD19、CD10、CD209系别标志表达过少：AUL（注意排除红系、巨核系、BPDCN、浆细胞肿瘤、转移癌）1011系别标志表达过多：急性双表型白血病急性双克隆白血病12重要系别抗体一定要做患者女，61岁07年7月某医院检测骨髓免疫分型结果：R3占全部有核细胞：50％，细胞表达CD7,CD33,CD123,HLA-DR+,CD38+.

部分表达CD56,不表达CD117,CD19,

CD10,

CD34,CD64,

CD14,CD13,

怀疑为AML-M4/5,形态POX(+).

糖原弱阳性，诊断AML-M2。RT-PCR:

ETO/AML1(+)。最后诊断AML-M21314文献中有ETO+的急性系别不清白血病报道因首次医院检测无MPO,

cCD3结果，所以不详。虽然不能排除最初为AML，治疗后系别转换，但是从数次免疫分型检测结果来看，考虑为T急淋伴髓系表达或者T/髓双表型白血病可能性大。问题：1、初诊和复发病例必须做胞浆抗体2、cCD3的荧光强度？15cCD3的荧光强度会随着治疗改变何时诊断ALL伴髓系表达？ETP？ALAL（急性无法分类、MPAL？）16例117ALL-B伴髓系表达例218ETP-ALL19例320免疫分型报告•

结果：63.09%细胞（占有核细胞）表达CD19,CD34，HLA-DR，cTdT，cIgM，CD22，cCD79a，CD15，CD9，CD10，CD13，CD138，部分表达CD33，不表达CD96，CD117，CD11b，MPO，cCD3，kappa，lambda，CD25，CD64，CD11c，CD7，CD56，CD20，ki67，TSLPR，CD36,

为恶性原始细胞，表达B系为主及较多髓系标志。•

诊断？B-ALL伴髓系表达？MPAL（B/M）？21免疫分型报告•

结论：63.09%细胞（占全部有核细胞）

为恶性原始细胞，表达B系为主及较多髓系标志。按EGIL诊断标准为急性B、髓双表型白血病，按照2008WHO诊断标准为B-ALL（Pre-B）伴髓系表达。因CD15,CD13,CD33,常见于MLL基因或BCR-ABL基因重排的B-ALL,

该患者未检测出这些基因异常，故可疑为急性双表型白血病（B/髓双表型）。22POXPAS23例424免疫分型报告•

结果：50.41%细胞（占全部有核细胞）表达CD56，CD7，CD34,

CD33，部分表达CD117，少量表达cCD3，不表达HLA-DR，

CD19,

CD11b，MPO，

CD22，CD2,

CD3，CD4，CD8，CD15，CD13，CD64，CD5,CD14,

CD61，CD36,

为恶性原始细胞，表达髓系、T系标志。•

50.41%细胞（占全部有核细胞）为恶性原始细胞，表达髓系、T系标志。考虑为急性无法分类细胞白血病可能性大。25POX26PAS例527•

急性三系白血病？28急性三系白血病（双克隆+双表型）29