2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试上岸题库历年考点含答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试上岸题库（历年考点)含答案（图片大小可自由调整）卷I一.综合考核题库(共80题)1._________是革兰氏阳性细菌，在芽孢形成过程中能产生大量的伴孢晶体。2.核酸分子杂交的探针只能是标记的小片段DNA分子3.用于基因治疗的基因不需要满足A、外源基因能在靶细胞中长期稳定存留B、导入基因的方法及载体对宿主细胞安全无害C、基因需要大量表达才能改善症状D、外源基因可有效导入靶细胞4.同位素标记探针是指在探针上连接下列哪一种物质A、32PB、生物素C、荧光素D、酶5.一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。6.试述影响连接反应的因素？7.基因治疗一般都是通过体内法这一途径进行的。8.抗性基因（Resistant？gene）是目前使用的最广泛的选择标记，常用的抗生素抗性有哪几种？9.最早建立成功的转基因哺乳动物是_________。10.基因治疗研究的基本程序不包括A、目的基因的选择与制备B、靶细胞的选择和培养C、基因的导入和表达D、大肠杆菌的培养11.根据Northern印迹的结果可以说明_________。12.下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA？为什么？13.在_________的作用下，含目的基因的DNA片断与克隆载体连接成为重组DNA分子。14.Nick和Gap的含义是不同的，前者指DNA的单链中有较小的缺失，后者仅是断开了一个磷酸二酯键。15.黏粒(cosmid)质粒中，COS位点的功能是A、限制酶切位点B、参与包装进入病毒外壳C、选择标记D、复制起点16.根据某一感兴趣蛋白质的序列、抗原性以及配基结合性质制备探针，可从DNA文库中筛选到相应的基因。17.Ⅱ型限制性内切核酸酶：A、有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列B、仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供C、限制性识别非甲基化的核苷酸序列D、有外切核酸酶和甲基化酶活性18.最早建立成功的转基因哺乳动物是A、转基因猴B、转基因小鼠C、转基因绵羊D、转基因猪19.用同一种酶切割载体和外源DNA得到黏性末端后，为防止它们自身环化，要用CIP将它们脱磷酸。20.限制性内切酶可特异性识别A、双链DNA的特定碱基对B、双链DNA的特定碱基序列C、单链RNA的特定碱基序列D、单链DNA的特定碱基序列21.试述限制性核酸内切酶的命名原则。22.DNA聚合酶I_________的是用枯草杆菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子质量为76kDa的大片段。23.柯斯质粒是一类人工构建的质粒-噬菌体杂合载体，它的复制子来自_________，cos位点序列来自λ噬菌体。24.PCR反应中引物长度一般是A、5bpB、10bpC、16bpD、20bp25.酵母人工染色体含有下列哪些元件A、酵母染色体的端粒序列B、酵母染色体的复制子C、酵母染色体的中心粒序列D、酵母系统的选择标记E、大肠杆菌的复制子和选择标记26.列举质粒载体必须具备的4个基本特性。27.下列是构建基因组文库的常用载体，哪一种载体需要用的受体细胞和其余三种不一样A、柯斯质粒B、YACC、BACD、噬菌体28.请写出天然DNA提取的三个主要步骤。29.在实验室研究中，重组大肠杆菌的培养基常使用牛肉膏蛋白胨培养基。30.请写出Southern杂交的操作过程。31._________是一种糖蛋白或结合糖的蛋白质，存在于多种植物中，特别是富含于植物种子和储藏器官。32.PCR技术是_________的缩写。33.诱导型启动子34.大肠杆菌聚合酶I具有几种酶活性A、1种B、2种C、3种D、4种35.ES细胞是_________。36.下列哪种酶的发现是PCR反应能迅速发展和广泛应用的主要原因A、TaqDNA聚合酶B、核酸内切酶C、T4多核苷酸激酶D、S1核酸酶37.将含有一个mRNA的DNA拷贝的克隆称作一个cDNA克隆，源于同一批RNA制备物的克隆群则构建了一个______。38.关于回文序列，下列各项中哪些是不正确的？A、是限制性内切核酸酶的识别序列B、是某些蛋白质的识别序列C、是基因的旁侧序列D、是高度重复序列E、有对称轴39.大肠杆菌DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，A、将双链DNA分子中的5’磷酸基团同3’羟基基团末端重新形成磷酸二酯键B、作用时不消耗能量C、需要Mn2+等二价辅助离子D、也可以连接RNA分子40.酵母人工染色体要在酵母细胞中稳定存在，必须有哪些基本的结构？41.Ti质粒中能插入到植物基因组DNA区段是A、复制远点区B、毒素蛋白区C、T-DNA区D、冠婴碱代谢区42.Southernblot检测的是RNA分子。43.显性质粒44.M13噬菌体颗粒是_________状的，其基因组为单链DNA。45.Sanger双脱氧末端终止法胶板上的链就是模板链。46.PCR引物常见的长度范围是30bp-45bp。47.Klenow大片段酶具有几种酶活性A、1种B、2种C、3种D、4种48.组成型启动子49.基因工程的设计施工是在什么水平上进行的A、细胞B、组织C、分子D、原子50.限制性核酸内切酶切割DNA后产生A、5’磷酸基和3’羟基基团的末端B、3’磷酸基和5’羟基基团的末端C、5’磷酸基和3’磷酸基团的末端D、5’羟基和3’羟基基团的末端51.基因治疗通常采用哪种载体比较合适A、逆转录病毒B、Ti质粒C、噬菌体D、质粒pBR32252.我国科学家在利用基因工程培育抗虫棉的过程中，重组子导入全部受体细胞占的受体细胞的多少A、大部分B、一半C、很少D、全部53.具平末端的DNA片段的连接方法主要有？54.不同的限制性核酸内切酶都盐离子强度有不同的要求，一般按离子强度不同分为低盐、_________、高盐三类。55.klenow片段聚合酶具有哪些活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端转移酶活性56.基因工程的两个基本特点是分子水平上的操作和_________。57.印迹是如何形成的？58.在生物制药研发方面，下列哪个国家最为领先A、中国B、英国C、美国D、法国59._________的编码产物可用简单的生物化学反应或借助特殊的仪器直接观察。60.表达载体的结构元件包括哪些A、具备与克隆载体相同的复制原点、多克隆位点、筛选标记B、启动子C、转录终止子D、核糖体识别位点E、翻译起始密码子和终止密码子61.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子有A、LacB、TrpC、TacD、RecE、Tra62.一个质粒含有四环素抗性基因(tetr)和LacZ基因，tetr内有一HindIII位点，LacZ中有一EcoRI

位点。如用这两种切割载体一并连接入相应的外源片段，则带有该重组质粒的细胞将A、对四环素敏感，在X-gal平板上呈现蓝色B、有四环素抗陛，在X-gal平板上呈现白色C、对四环素敏感，在X-gal平板上呈现白色D、有四环素抗性，在X-gal平板上呈现蓝色63.下列关于“转基因动物”说法正确的是A、基因组中插入外源基因的动物B、本身具有抗体蛋白类的动物C、能表达基因信息的动物D、含有可利用基因的动物64.DNA沿凝胶平面垂直方向移出并移除到膜上，转移后各个DNA片段在膜上的相对位置与凝胶中的相对位置一样，因此也称为_____________。65.一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，克隆载体的选择与改造，____________的连接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选出转化子。66.下列哪一种方法属于核酸分子杂交A、southernblotB、PCR扩增C、限制图谱分析法D、抗药性标志筛选67.粘粒载体不会使宿主菌裂解。68.PCR循环时按什么方式扩增A、n2B、2nC、2n-1D、2n+169.westernblot杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体70.目的基因通常是指A、拟进行研究或利用的基因B、人工合成的基因C、载体DNA分子D、具有编码序列的DNA分子71.PCR反应中常用的酶是______。72.以病毒为载体产生转基因的动物是_________。73.Muller的PCR反应同大肠杆菌体内的DNA复制有哪些不同？你认为根本的差别在哪里？74.基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的，真正的天然质粒载体很少，在下列载体中只有哪种被视为用作基因工程载体的天然质粒载体。A、pBR322B、pSC101C、pUB110D、pUC1875.不是克隆质粒的是A、pSC101质粒B、pBR322质粒C、M13噬菌体颗粒D、pUCl876.核酸序列测定技术的发展经历了哪几个重要阶段？77.“基因表达”是指该基因在大肠杆菌内A、能进行自我复制B、能进行转录C、能控制合成生长抑制素释放因子D、能合成人的生长激素78.PCR反应中的G+C含量要尽量控制在A、40%-60%之间B、10%-20%之间C、30%-40%之间D、50%-60%之间79.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子Tac又叫A、乳糖启动子B、乳糖和色氨酸的杂合启动子C、噬菌体的左向启动子D、色氨酸启动子80.反转录酶能够以单链RNA或单链DNA为模板，在引物的引发下合成一条互补的DNA链。卷I参考答案一.综合考核题库1.正确答案:Bt2.正确答案:错误3.正确答案:C4.正确答案:A5.正确答案:错误6.正确答案:DNA末端的形式；DNA分子浓度的影响；连接反应温度与时间的影响；连接缓冲液的影响；酶浓度的影响；ATP浓度的影响。7.正确答案:错误8.正确答案:氨苄青霉素抗性基因、四环素抗性基因、氯霉素抗性基因、卡那霉素和新霉素抗性基因以及琥珀突变抑制基因。9.正确答案:转基因小鼠10.正确答案:D11.正确答案:外源基因是否进行了转录12.正确答案:GATATC；AAATTT；因为它们是回文序列。13.正确答案:DNA连接酶14.正确答案:错误15.正确答案:B16.正确答案:正确17.正确答案:B18.正确答案:B19.正确答案:错误20.正确答案:B21.正确答案:以酶来源的生物体属名的第一个大写字母和种名的前两个小写字母构成酶的基本名称。22.正确答案:Klenow片段23.正确答案:质粒24.正确答案:D25.正确答案:A,B,C,D,E26.正确答案:（1）独立复制；（2）有选择标记；（3）有独特的酶切位点；（4）能转化但不扩散。27.正确答案:B28.正确答案:（1）准备生物材料；（2）裂解细胞；（3）分离和抽提DNA。29.正确答案:错误30.正确答案:基因组DNA提取和限制酶消化；琼脂糖凝胶电泳分离基因组DNA样品及预处理；转膜；探针标记；预杂交、杂交和洗膜；放射性自显影检测。31.正确答案:植物凝集素32.正确答案:聚合酶链式反应33.正确答案:在一定的诱导剂作用下，才能启动基因的转录与表达。34.正确答案:C35.正确答案:胚胎干细胞36.正确答案:A37.正确答案:cDNA文库38.正确答案:A,B,C39.正确答案:A40.正确答案:(1)着丝粒；(2)端粒；(3)ARS序列。41.正确答案:C42.正确答案:错误43.正确答案:指宿主细胞由于含有某种质粒而呈现出新的性状。44.正确答案:丝45.正确答案:错误46.正确答案:错误47.正确答案:B48.正确答案:指该启动子指导的基因表达于各个组织。49.正确答案:C50.正确答案:A51.正确答案:A52.正确答案:C53.正确答案:直接连接法；同聚物加尾法；衔接物连接法。54.正确答案:中盐55.正确答案:B,D56.正确答案:细胞水平上的表达57.正确答案:DNA沿凝胶平面垂直方向移出并转移到膜上，转移后各个DNA片段在膜上的相对位置与凝胶中的相对位置一样。58.正确答案:C59.正确答案:显色或发光报告基因60.正确答案:A,B,C,D,E61.正确答案:A,B,C,D,E62.正确答案:C63.正确答案:A64.正确答案:印迹65.正确答案:目的基因与克隆载体66.正确答案:A67.正确答案:正确68.正确答案:B69.正确答案:C70.正确答案:A71.正确答案:TaqDNA聚合酶72.正确答案:病毒载体法73.正确答案:PCR用双引物，体内复制用单引物。74.正确答案:B75.正确答案:C76.正确答案:经典的手工测序；第一代测序技术；第二代测序技术；第三代测序技术。77.正确答案:C78.正确答案:A79.正确答案:B80.正确答案:正确卷II一.综合考核题库(共80题)1.分离既定组织或者细胞的_____________是构建cDNA文库的首要步骤。2.M13噬菌体属于A、双链噬菌体B、单链噬菌体C、质粒D、亚病毒3.连接反应中，为了维持还原环境，稳定酶活性，需在连接缓冲液中添加A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP4.第一个作为重组DNA载体的质粒A、ColElB、pSCl01C、pUCl8D、pBR3225.II型限制性核酸内切酶的识别位点是回文对称结构。6.巴斯德毕赤酵母表达系统优于酿酒酵母表达系统。7.EcoRI的识别序列是A、5-GATTC-3B、5-CTGGCAG-3C、5-CCCGGG-3;D、5-GGATCC-38.基因工程药物的特点是高技术，短周期，高投入，高风险，高收益。9.如果知道某一基因的功能及其相应的蛋白质的氨基酸序列组成，可以通过何种方法克隆该基因？10.真核生物基因组上有些DNA序列能将基因及基因簇隔开，阻止邻近基因之间的相互作用，这些功能序列被称为_________。11.下面关于松弛型质粒(relaxedplasmid)性质的描述不正确的是A、质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数B、可以在氯霉素作用下进行扩增C、通常具有较少的拷贝数D、同严紧型质粒整合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子

12.含有多种限制性内切核酸酶识别序列的DNA片段称为_________。13.关于限制性内切核酸酶的来源及其天然存在的意义，下列哪种说法是正确的?A、来自噬菌体，具有抗微生物作用B、来自酵母菌，参与DNA复制C、来自细菌，有防御病毒侵染的意义D、来自噬菌体，用于复制病毒DNA14.下列哪一种限制性核酸内切酶的酶蛋白分子组成只有一单一亚基A、II型B、III型C、IV型D、I型15.下列哪一种测序方法不需要跑胶A、化学降解法B、自动测序法C、胶磷酸测序法D、双脱氧末端终止法16.基因工程诞生的三大理论基础是什么？17.基因工程中的工具酶有哪些A、限制性核酸内切酶B、DNA连接酶C、DNA聚合酶D、碱性磷酸酶E、末端核苷酸转移酶18.下列属于基因克隆载体所必须具有的条件是①具有某些标志基因②具有环状的DNA分子③能够在宿主细胞内复制④具有多种限制性内切酶A、①②B、③④C、①③D、②④19.双酶切或多酶切时，一般先用低盐浓度的酶切，再用高盐浓度的酶切。20.什么是S1核酸酶作图(S1nucleasemapping)？21.受体细胞的_________是接受外源DNA的生理状态_。22.何谓星活性？23.下面哪一项不是产生星号活性的主要原因A、甘油含量过高B、反应体系中含有有机溶剂C、含有非Mg2+的二价阳离子D、酶切反应时酶浓度过低24.HIV为逆转录病毒。25.最早被研制成功的两个基因工程激素药物是______________和生长激素。26.所谓引物就是同DNA互补的一小段RNA或DNA分子。27.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫基因库。28.在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指A、构建重组DNA分子B、无性繁殖DNAC、有性繁殖DNAD、建立单克隆抗体29.pGEM质粒有几个启动子A、0个B、2个C、3个D、4个30.用人工合成的含有所需碱基变化的寡聚核苷酸，可以将特殊突变引入克隆的基因。31.λ噬菌体载体根据外源基因整合的方式不同，分为____________和置换型载体两大类。32.融合蛋白实际上就是杂合蛋白，含有两个或多个蛋白质的氨基酸序列。33.YAC载体基本组成元件有_________，着丝粒，端粒，MCS，筛选标记。34.Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是A、用RNA探针检测RNA片段B、用DNA探针检测RNA片段C、用DNA探针检测蛋白质片段D、用RNA探针检测DNA片段35._________是指利用基因工程技术，将人们想要研究的基因在动物体实现表达。36.对pBR322描述正确的是()A、经人工改造的酵母质粒B、天然的大肠杆菌质粒C、经人工改造的大肠杆菌质粒D、天然的酵母质粒37.westernblot是属于下列哪一种检测方法A、表型检测法B、蛋白质杂交检测法C、序列鉴定法D、物理特性检测法38.什么是动物乳腺生物反应器？39.现在最常用的pUC载体是pUC18，这种载体可在辅助质粒的帮助下合成单链DNA。40.核酸操作的基本技术有哪些？41.下列哪一种限制性核酸内切酶是单功能酶A、I型B、II型C、III型D、IV型42.带有多个不同类型的复制起始区的质粒是A、表达质粒B、整合质粒C、多拷贝质粒D、穿梭质粒43.转基因植物技术在农业领域主要有哪些应用？就其中一方面应用进行举例说明。44.重组DNA的含义是什么？45.T4DNA连接酶和E．coli连接酶都能催化双链DNA和单链DNA的连接。46.pSCl01是一种________复制的质粒。47.重组DNA技术领域常用的质粒DNA是A、细菌染色体DNA的一部分B、细菌染色体外的独立遗传单位C、病毒基因组DNA的一部分D、真核细胞染色体DNA的一部分48.大部分限制性核酸内切酶最适反应温度是A、4℃B、37℃C、56℃D、72℃49.YAC是至今最大容量的克隆载体。50.何谓溶原性方式？51.非接合质粒52.基因工程中使用的II类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。53.Cre-loxP系统中两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相反，Cre重组酶诱导loxP间的序列翻转54.BergP的创造性的工作是在体外构建了重组DNA分子，所用的载体是一种具有复制能力的细胞质质粒。55.关于重组体的叙述，下列哪项不正确：A、重组体可直接表达外源基因B、重组体只能在宿主细胞或体外表达系统中表达外源基因C、重组体是由目的基因和载体通过连接酶连接而成的D、重组体中含有外源基因56.下列哪一项不是逆转录病毒的特点A、基因组很小B、表达时间短C、可感染分裂细胞D、可整合到宿主染色体上57.Southern印迹的DNA探针()杂交。A、可与任何含有相同序列的DNA片段B、可与任何含有互补序列的DNA片段C、可与用某些限制性内切核酸酶切成的DNA片段D、只与完全相同的片段58.基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。59.以mRNA为模板合成CDNA时，所用的工具酶是A、DNA聚合酶IB、DNA连接酶C、逆转录酶D、核酸内切酶60.迄今发现的质粒DNA都是环状的。61.Westernblot又称为RNA印迹法。62.质粒具有____________，它是指在自然条件下，很多质粒可以通过称为细菌接合的作用转移到新宿主内。63.关于黏粒载体的描述错误的是A、是由λ噬菌体与质粒DNA重组的载体B、既有质粒的特性，又有噬菌体DNA的特性(如可体外包装)C、可插入大片段的外源DNA片段D、可像YAC载体那样构建大片段的基因组文库

64.在cDNA的合成中要用到_________，其作用是切除在第二链合成时形成的发夹环。65.影响连接反应的因素有A、DNA末端的形式B、DNA分子浓度的影响C、连接反应温度与时间的影响D、连接缓冲液的影响E、酶浓度的影响66.动脉硬化属于（）类型的疾病A、心血管疾病B、恶性肿瘤C、血友病D、艾滋病67.1986年第一例植物基因工程产品----_________问世。68.现在科研人员又开发了红色荧光蛋白、黄色荧光蛋白、_________等新型的荧光蛋白。69.荧光定量PCR一般分为______________与探针法。70.基因工程的操作程序可简单地概括为A、载体和目的基因的分离、提纯与鉴定B、分、切、接、转、筛C、将重组体导人宿主细胞，筛出含目的基因的阳性株D、将载体和目的基因接合成重组体71.DNA聚合酶I在基因工程中有哪些主要用途？72.克隆即无性繁殖的意思，通过克隆可以在无性的条件下获得遗传结构和表型完全相同的一群个体。73.经典的DNA测序方法有两种，即Sanger双脱氧末端终止法和_______________。74.你在做Southern印迹分析，并且刚完成了凝胶电泳这一步。根据方案，下面一步骤是用NaOH溶液浸泡凝胶，使DNA变性为单链。为了节省时间，你略过了这一步，直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上。然后用标记探针杂交，最后发现放射自显影片是空白。错在哪里？75.连接反应中，下列哪项物质是T4DNA连接酶所必须的辅助因子A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP76.隐性质粒77.DNA连接酶根据来源不同，可以分为三类，即_________和T4DNA连接酶及热稳定的DNA连接酶。78.限制性内切核酸酶的星号活性是指A、在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性B、活性大大提高C、切割速度大大加快D、识别序列与原来的完全不同79.切口平移法标记DNA探针时，需用的酶是：A、DNaseIB、RnaseC、DNA连接酶D、限制酶80.欲将一真核生物的结构基因克隆后转移到原核生物(如E．coli)中进行表达，克隆时应注意哪些问题？卷II参考答案一.综合考核题库1.正确答案:mRNA2.正确答案:B3.正确答案:A4.正确答案:B5.正确答案:正确6.正确答案:正确7.正确答案:A8.正确答案:错误9.正确答案:可以通过合成核苷酸探针或设计简并PCR引物从cDNA文库或基因组文库中筛选。或者利用相应的抗体从cDNA表达文库中筛选相应的克隆。10.正确答案:绝缘子11.正确答案:C12.正确答案:多克隆位点13.正确答案:C14.正确答案:B15.正确答案:C16.正确答案:（1）DNA是遗传物质被证实；（2）DNA双螺旋模型的提出？；（3）“中心法则”和“操纵子学说”的提出。17.正确答案:A,B,C,D,E18.正确答案:C19.正确答案:正确20.正确答案:S1核酸酶作图是一种对RNA转录产物的末端和剪接位点进行作图的方法。21.正确答案:感受态22.正确答案:在非最适反应条件下，有些限制性核酸内切酶能切割和识别与特定识别序列相似的序列，这种改变的特殊活性叫做星活性。23.正确答案:D24.正确答案:正确25.正确答案:胰岛素26.正确答案:正确27.正确答案:错误28.正确答案:B29.正确答案:B30.正确答案:正确31.正确答案:插入型载体32.正确答案:正确33.正确答案:复制起点34.正确答案:B35.正确答案:转基因动物36.正确答案:C37.正确答案:B38.正确答案:能够分泌乳汁的转基因动物生产其他来源的基因产品，并通过乳腺分泌出来。39.正确答案:错误40.正确答案:（1）核酸提取与纯化；（2）核酸的检测与保存；（3）核酸的凝胶电泳；（4）核酸分子杂交。41.正确答案:B42.正确答案:D43.正确答案:抗虫转基因作物；抗病毒转基因作物；抗菌转基因植物；抗逆转基因植物；抗除草剂转基因植物；改良作物品质。具体实例可以从这几个方面挑一项进行说明，比如：抗除草剂转基因植物，这类植物转入了抗除草剂基因，表现出抗不同类型除草剂的性状，目前已获得了一些抗除草剂作物，如抗草丁膦转基因作物冬油菜，抗草甘膦转基因作物大豆、玉米、棉花、油菜、向日葵、甜菜，抗磺酰脲类除草剂转基因作物大豆，棉花。44.正确答案:将一个生物的DNA片段插入到一个载体中，并引入到另一生物体中进行繁殖。45.正确答案:错误46.正确答案:严紧型47.正确答案:B48.正确答案:B49.正确答案:正确50.正确答案:进入细菌的λDNA可整合入细菌的染色质DNA中，随细菌染色体DNA复制，传给细菌后代。51.正确答案:指不含nic/born基因，不能自我转移的质粒。52.正确答案:错误53.正确答案:正确54.正确答案:错误55.正确答案:A56.正确答案:B57.正确答案:B58.正确答案:20世纪70年代59.正确答案:C60.正确答案:错误61.正确答案:错误62.正确答案:转移性63.正确答案:D64.正确答案:S1核酸酶65.正确答案:A,B,C,D,E66.正确答案:A67.正确答案:除草剂耐受烟草68.正确答案:蓝色荧光蛋白69.正确答案:荧光染料法70.正确答案:B71.正确答案:用切口平移法标记DNA；利用其5'-3'核酸外切酶活性降解寡核苷酸作为合成cDNA第二链的引物；用于对DNA分子的3'突出末端进行末端标记，用于DNA序列分析。72.正确答案:错误73.正确答案:化学降解法74.正确答案:如果你的杂交探针是双链的，可能因为在加入杂交混合物之前忘记将探针变性而得到空白的放射自显影结果。75.正确答案:D76.正确答案:指宿主细胞含有某种质粒，但无异样性状表现，目前的检测手段还未能检测出因含该基因而导致性状、宿主代谢物等的改变。77.正确答案:大肠杆菌的DNA连接酶78.正确答案:A79.正确答案:A80.正确答案:应注意的问题有：启动子、密码子、剪接、分泌。卷III一.综合考核题库(共80题)1._________让外源DNA沿着花粉管经过珠心进入尚未形成正常细胞壁的卵子、合子或早期胚胎细胞中，从而实现基因的转移。。2.波莉绵羊的诞生是通过体细胞核移植法制备的。3.基因工程中常作为基因的运载体的一组结构是A、质粒、线粒体、噬菌体B、染色体、叶绿体、线粒体C、质粒、噬菌体、动植物病毒D、细菌、噬菌体、动植物病毒4.EcoRI切割载体DNA和供体DNA所产生的片段在用于重组连接前要A、用CIP处理载体DNA防止自身环化B、进行琼脂糖凝胶电泳检测C、上述说法都正确D、用65℃处理5～10min使限制性内切核酸酶失活5.限制性内切核酸酶BsuRI和HaeIII的来源不同，但识别的序列都是GGCC，因此他们属于_________。6.基因组文库的构建一般包括下列基本步骤A、细胞染色体大分子DNA的提取和大片段DNA的制备B、载体DNA的准备C、载体与外源大片段DNA的连接D、体外包装机基因组DNA文库的扩增E、重组DNA的筛选和鉴定7.在整个基因治疗领域内（）开展的研究最为深入和广泛A、日本B、英国C、美国D、中国8.基因克隆中低拷贝数的质粒载体是不起作用的。9.甲醇酵母表达系统具有的抗药性基因是A、氨苄青霉素和卡那霉素B、四环素和氨苄青霉素C、氨苄青霉素和庆大霉素D、四环素和庆大霉素10.采用原核细胞表达系统的优点之一是可以与下面什么过程直接相连A、发酵工程B、转基因动物C、转基因植物D、基因治疗11.染色质免疫沉淀技术是检测（)的技术A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用12.何谓cDNA文库？13.________主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计一组混合引物来合成相应的基因。14.第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是____。15.作为基因工程所用的克隆载体必须具备以下条件A、复制原点B、有一个或多个用于筛选的选择标记C、具备合适的限制性核酸内切酶的单一识别位点D、有较高的拷贝数E、目的基因表达的调控序列16.常规Sanger双脱氧链终止法标记的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP17.用_________表达乳铁蛋白可谓是乳腺生物反应器的典型代表。18.T4DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E．coli中分离的，这种连接酶A、催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源B、既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接C、是一种单肽酶，分子质量为74kDaD、既能催化单链DNA

连接又能催化双链DNA

连接

19.用蓝白斑筛选重组子时，白斑表示外源基因插入到载体中了。20.基因组文库和cDNA文库的区别？21._________是一种借助显微镜将外源DNA直接注入受体细胞的方法。22.关于宿主控制的限制修饰现象的本质描述不太恰当的是A、由作用于同一DNA序列的两种酶构成B、这一系统中的核酸酶都是II类限制性内切核酸酶C、这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA

进行修饰D、不同的宿主系统具有不同的限制--修饰系统23.试述基因敲除技术的原理？24.在微生物遗传学和分子遗传学研究领域中的理论上的三大发现对基因工程的诞生起到了决定性的作用，这三大发现是下列哪些A、发现了生物的遗传物质是DNA而不是蛋白质B、明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机制C、遗传密码子的破译D、质粒改造成载体以携带DNA片段克隆E、逆转录酶的使用25.什么是荧光定量PCR?26.根据外源DNA片段的来源不同，可将基因文库分为：基因组DNA文库和cDNA文库。27.试述分子杂交技术的原理？28.原位杂交是指A、菌落杂交B、液相杂交C、直接对染色体或组织杂交D、转膜杂交29._________是指利用基因工程原理和技术，将感兴趣的基因在植物中表达并实现稳定遗传。30.没有启动子，基因就不能转录。31.一般来说，完全切割质粒或病毒DNA，要比切割线状DNA需要更多的酶，最高的需要20倍。32.下列哪一种酶不能标记DNA分子探针A、Klenow片段B、T4DNA聚合酶C、DNA连接酶D、大肠杆菌聚合酶I33.基因治疗是把健康的外源基因导入A、有基因缺陷的染色体中B、有基因缺陷的细胞器中C、有基因缺陷的DNA分子中D、有基因缺陷的细胞中34.蓝白斑筛选是A、表型检测法B、核酸杂交检测法C、序列鉴定法D、物理特性检测法35.被FDA批准为安全的基因工程受体生物的细菌是A、金黄色葡萄球菌B、蜡样芽孢杆菌C、大肠杆菌D、变形杆菌36.核酸分子杂交时，用于标记的探针可以是A、DNAB、RNAC、抗原D、抗体E、DNA连接酶37.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子Lac又叫A、色氨酸启动子B、乳糖启动子C、乳糖和色氨酸的杂合启动子D、噬菌体的左向启动子38.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用S1核酸酶切割或_________ 。39.II型限制酶识别位点一般长度为______个核苷酸对。40.启动子从转录模式上可分为哪两种？表达系统常选用哪一种？其机理是什么？41.下面关于细菌人工染色体(BAC)的特征描述，不正确是（）。A、BAC载体在细菌中以环形超螺旋状态存在，使分离操作起来相对容易B、BAC载体在大肠杆菌宿主保持高拷贝C、克隆到BAC载体上的外源片段可以直接进行测序以获得末端序列

D、通过电激法将大质粒转化到大肠杆菌比酵母的转化率提高了10~100

倍42.个体之间DNA限制性片段长度的差异叫_________。43.质粒作为载体使用时必须具备如下条件A、拷贝数较高B、分子量较小C、具有选择标记D、具有较多的限制性酶切位点E、具有复制起始点44.从E.coli中分离的连接酶A、需要NAD作辅助因子B、可以进行平末端和黏性末端连接C、作用时不需要模板D、需要ATP

作辅助因子45.迄今所发现的限制性内切核酸酶既能作用于双链DNA，又能作用于单链DNA。46.基因工程中常用的DNA聚合酶有哪些？47.不同的表达载体需要不同的受体系统进行基因表达，受体系统根据宿主细胞的性质可以分为两大类：________________和真核表达系统。48.________________是一种耐热的依赖DNA的DNA聚合酶。49.关于转化的叙述中错误的是A、处于感受态的细菌易于吸收外源性DNAB、常用的制备感受态的方法是用冰冷的CaCl2溶液处理C、细菌吸收外源性DNA，遗传性状可发生改变D、感受态在细菌生长的任何时期都可出现50.一个带有反向重复序列的双链DNA经变性后，复性时其单链可形成发夹环。51.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子Trp又称为A、乳糖启动子B、乳糖和色氨酸的杂合启动子C、噬菌体的左向启动子D、色氨酸启动子52.下面关于穿梭质粒载体描述最正确的是A、在不同的宿主中具有不同的复制机制B、在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点C、在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶D、在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率53.Southern杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体54.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫做A、基因文库B、基因库C、基因组文库D、cDNA文库55.Bal31核酸酶是Ca2+依赖性的，在反应混合物中加入EDTA便可抑制它的活性。56.只能从DNA分子的末端开始水解磷酸二酯键，使核苷酸解离下来的酶是A、核酸外切酶B、核酸内切酶C、DNA连接酶D、末端转移酶57.常用的DNA探针标记方法是切口平移法和随机引物法。58.扩增外源基因时需要DNA载体中的（）性质A、青霉素抗性B、卡那霉素抗性C、自我复制能力D、自我转录能力59.外源基因(或DNA片段)插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。60.反向PCR是以mRNA为模板进行的一类特殊PCR。61.具有EcoRII末端的外源片段只能以一个方向插入到EcoRII末端的载体中。62.分子杂交的化学原理是形成()A、疏水键B、配位键C、氢键D、共价键63.质粒载体能够克隆多大的DNA片段A、20kbB、30kbC、40kbD、10Kb64.克隆羊多利是用的________________法制备的。65.miRNA的检测方法A、Northern印迹杂交B、基因芯片C、qRT-PCR技D、原位杂交66.下面有关限制酶的叙述正确的是（）A、限制酶是外切酶而不是内切酶B、限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割C、同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D、一些限制酶在识别位点内稍有不同的位置切割双链DNA，产生黏末端E、一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端67.常规PCR反应程序中，高温变性一般设置多高的温度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃68.通常可在三种温度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以_________最好。69.某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因？70.关于多克隆位点，下列叙述正确的是A、是外源基因的插入部位B、由许多酶切位点组成C、是宿主细胞上的一段特殊序列D、是人工合成的一段DNA序列E、含有药物抗性基因71.在非最适反应条件下，有些限制性核酸内切酶能切割和识别与特定识别序列相似的序列，这种改变的特殊活性叫做______。72.甲醇酵母表达系统有几个乙醇氧化酶基因A、2个B、3个C、4个D、1个73.常用载体质粒的本质是_________。74.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的_________。75.在基因工程中，可用碱性磷酸酶A、防止DNA的自身环化B、同多核苷酸激酶一起进行DNA的5’端标记C、制备突出的3’端D、催化DNA连接E、上述说法都正确76.pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于_______。77.对松弛型质粒描述正确的是A、在寄主细胞中拷贝数较多B、可用氯霉素扩增C、一般没有选择标记D、上述A、B

两项正确78.下列哪种病不可以进行遗传病的基因治疗A、血友病BB