2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试历年高频考点真题演练附带含答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试历年高频考点真题演练附带含答案（图片大小可自由调整）卷I一.综合考核题库(共70题)1.cDNA克隆较之基因组克隆最重要的优越性就是它们含有一个基因的完整序列。2.质粒载体能够克隆多大的DNA片段A、20kbB、30kbC、40kbD、10Kb3.在______技术中，DNA限制性片段经凝胶电泳分离后，被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上，然后与放射性的DNA探针杂交。4.甲醇酵母表达系统有几个乙醇氧化酶基因A、2个B、3个C、4个D、1个5.质粒具备的特征不包括A、赋予宿主细胞某种可检测的特性B、独立复制的能力C、可复制自身DNA以及插入的外源DNAD、甲基化防止宿主的限制性内切核酸酶对其降解

6.什么是S1核酸酶作图(S1nucleasemapping)？7.YAC载体基本组成元件有_________，着丝粒，端粒，MCS，筛选标记。8.请写出Southern杂交的操作过程。9.在众多的植物转基因方法中，下列哪种方法应用最多、最广泛A、农杆菌介导法B、植物病毒DNA介导法C、基因枪法D、原生质体法10.将携带有外源基因并能持久传递给子代的动物称为_________。11.重组DNA的含义是什么？12.在众多的植物转基因方法中，_________的方法应用最多。13._________是一种借助显微镜将外源DNA直接注入受体细胞的方法。14.______________是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。15.限制性核酸内切酶在基因工程中有何作用？16.连接酶通常使用的连接反应温度是A、37℃B、20℃C、16℃D、50℃17.pSCl01是一种________复制的质粒。18.重组DNA技术中常用的限制性内切酶为A、I类限制性内切酶B、II类限制性内切酶C、III类限制性内切酶D、IV类限制性内切酶19.载体20.用载体制作转基因植物时，最常用的载体是下列哪种质粒。A、pBR322质粒B、pSCl01质粒C、农杆菌Ti质粒D、pUC质粒21.何谓基因工程？22.限制性核酸内切酶一般在多少度下保存A、10℃B、-20℃C、20℃D、0℃23.逆转录病毒载体的优点不包括A、高效感染宿主细胞B、拷贝数高C、侵染范围广D、基因组小并且简单24.末端脱氧核苷酸转移酶起作用时需要A、二价阳离子B、一价阴离子C、二价阴离子D、一价阳离子25.用同一种酶切割载体和外源DNA得到黏性末端后，为防止它们自身环化，要用CIP将它们脱磷酸。26.基因工程中常用的DNA聚合酶有A、大肠柑橘聚合酶IB、Klenow大片段酶C、T4噬菌体聚合酶D、T7噬菌体聚合酶E、逆转录酶27.T4DNA连接酶和E．coli连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。28.限制酶主要是从_________中分离纯化出来的。29.构建cDNA文库的首要步骤是A、分离既定组织或者细胞的DNAB、分离既定组织或者细胞的mRNAC、逆转录合成cDNAD、cDNA的克隆30.没有启动子，基因就不能转录。31.Klenow酶在有_________情况下，呈现DNA聚合酶活性，32.常规PCR反应的循环次数一般为多少个周期A、40B、20C、30D、5033._________是指利用基因工程原理和技术，将感兴趣的基因在植物中表达并实现稳定遗传。34.试述cos质粒载体的特点？35.在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指A、构建重组DNA分子B、无性繁殖DNAC、有性繁殖DNAD、建立单克隆抗体36.主要用来提高扩增特异性的特殊PCR是A、反转录PCRB、Real-TimePCRC、巢式PCRD、反向PCR37.酵母表达系统是最常用的真核表达系统。38.重组体的筛选方法有A、抗性药物标记选择法B、分子杂交法C、蓝白斑法D、免疫印迹法E、插入失活法39.外源基因(或DNA片段)插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。40.植物基因工程的常用方法有哪些？41.分子杂交的化学原理是形成()A、疏水键B、配位键C、氢键D、共价键42.何谓溶原性方式？43._________---阿尔茨海默病神经系统疾病模型。44.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的_________。45.大部分限制性核酸内切酶最适反应温度是A、4℃B、37℃C、56℃D、72℃46.什么是动物乳腺生物反应器？47.PCR反应中的复性温度要求高于A、37℃B、55℃C、72℃D、96℃48.根据外源DNA片段的来源不同，可将基因文库分为：基因组DNA文库和cDNA文库。49.一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，克隆载体的选择与改造，____________的连接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选出转化子。50.作为基因工程所用的克隆载体必须具备以下条件A、复制原点B、有一个或多个用于筛选的选择标记C、具备合适的限制性核酸内切酶的单一识别位点D、有较高的拷贝数E、目的基因表达的调控序列51.表达载体和基因工程克隆一般载体在元件构成上有何差别？52.下面关于穿梭质粒载体描述最正确的是A、在不同的宿主中具有不同的复制机制B、在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点C、在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶D、在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率53.用限制性内切核酸酶HaeIII分别切割载体DNA和供体DNA后，可用E.coliDNA连接酶进行连接。54.迄今所发现的限制性内切核酸酶既能作用于双链DNA，又能作用于单链DNA。55.反转录酶能够以单链RNA或单链DNA为模板，在引物的引发下合成一条互补的DNA链。56.应用药物敏感基因转染肿瘤细胞，以提高肿瘤患者细胞对药物的敏感性。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因激活B、基因失活C、免疫调节D、药物敏感疗法57.隐性质粒58.质粒载体的装载容量为10Kb-20Kb。59.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子Trp又称为A、乳糖启动子B、乳糖和色氨酸的杂合启动子C、噬菌体的左向启动子D、色氨酸启动子60.基因重组只能通过人工进行。61.对pBR322描述正确的是()A、经人工改造的酵母质粒B、天然的大肠杆菌质粒C、经人工改造的大肠杆菌质粒D、天然的酵母质粒62.转录水平的鉴定是指_________。63.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子有A、LacB、TrpC、TacD、RecE、Tra64.质粒作为载体使用时必须具备如下条件A、拷贝数较高B、分子量较小C、具有选择标记D、具有较多的限制性酶切位点E、具有复制起始点65.核酸操作的基本技术有哪些？66._________是指转录因子用于识别靶DNA的蛋白结构域。67.为了保证引物有较高的退火温度，要求引物的G+C含量尽量控制在40%-60%之间。68.Northern印迹杂交可用于检测：A、目的基因在转录水平上的变化B、目的基因在翻译水平上的变化C、染色体是否异常D、目的基因在复制水平上的变化69.Amp是（）的表示A、氨苄青霉素B、卡那霉素C、氯霉素D、四环素70.下列哪一项不是逆转录病毒的特点A、基因组很小B、表达时间短C、可感染分裂细胞D、可整合到宿主染色体上卷I参考答案一.综合考核题库1.正确答案:错误2.正确答案:D3.正确答案:Southern杂交4.正确答案:A5.正确答案:D6.正确答案:S1核酸酶作图是一种对RNA转录产物的末端和剪接位点进行作图的方法。7.正确答案:复制起点8.正确答案:基因组DNA提取和限制酶消化；琼脂糖凝胶电泳分离基因组DNA样品及预处理；转膜；探针标记；预杂交、杂交和洗膜；放射性自显影检测。9.正确答案:A10.正确答案:转基因动物11.正确答案:将一个生物的DNA片段插入到一个载体中，并引入到另一生物体中进行繁殖。12.正确答案:农杆菌介导13.正确答案:显微注射法14.正确答案:基因15.正确答案:扮演了如裁缝的“剪刀”的角色，它使研究人员可以按照预期目标将核酸分子切割开来，获取所需要的核酸序列片段。16.正确答案:C17.正确答案:严紧型18.正确答案:B19.正确答案:基因工程中，携带外源目的基因或DNA片段进入宿主细胞进行复制和表达的工具。20.正确答案:C21.正确答案:一般指利用分子生物学的手段，将不同生物的遗传物质按人们的意志或需要，进行基因的定向改造、突变与重组，从而使生物体的遗传性状发生变异。22.正确答案:B23.正确答案:B24.正确答案:A25.正确答案:错误26.正确答案:A,B,C,D,E27.正确答案:错误28.正确答案:原核生物29.正确答案:B30.正确答案:正确31.正确答案:Dntp32.正确答案:B33.正确答案:转基因植物34.正确答案:具有质粒的性质；含有cos位点；能承载较大的外源DNA片段。35.正确答案:B36.正确答案:C37.正确答案:正确38.正确答案:A,B,C,D,E39.正确答案:错误40.正确答案:农杆菌介导法；原生质体法；植物病毒DNA介导法；基因枪法；显微注射法；脂质体介导法；电穿孔法；微激光束法；花粉管导入法。41.正确答案:C42.正确答案:进入细菌的λDNA可整合入细菌的染色质DNA中，随细菌染色体DNA复制，传给细菌后代。43.正确答案:小鼠44.正确答案:限制性酶切图谱45.正确答案:B46.正确答案:能够分泌乳汁的转基因动物生产其他来源的基因产品，并通过乳腺分泌出来。47.正确答案:B48.正确答案:正确49.正确答案:目的基因与克隆载体50.正确答案:A,B,C,D51.正确答案:表达载体：启动子、终止子、核糖体结合位点（SD序列）、筛选标记、复制子、多克隆位点；克隆载体：筛选标记、复制子、多克隆位点。52.正确答案:B53.正确答案:错误54.正确答案:错误55.正确答案:正确56.正确答案:D57.正确答案:指宿主细胞含有某种质粒，但无异样性状表现，目前的检测手段还未能检测出因含该基因而导致性状、宿主代谢物等的改变。58.正确答案:错误59.正确答案:D60.正确答案:错误61.正确答案:C62.正确答案:mRNA检测63.正确答案:A,B,C,D,E64.正确答案:A,B,C,D,E65.正确答案:（1）核酸提取与纯化；（2）核酸的检测与保存；（3）核酸的凝胶电泳；（4）核酸分子杂交。66.正确答案:锌指结构域67.正确答案:正确68.正确答案:A69.正确答案:A70.正确答案:B卷II一.综合考核题库(共70题)1.切口平移法标记DNA探针时，需用的酶是：A、DNaseIB、RnaseC、DNA连接酶D、限制酶2.波莉绵羊的诞生是通过体细胞核移植法制备的。3._________是利用同源重组去改变内源性基因，通过基因打靶可以成功剔除一个基因外显子，增加一个基因和引起点突变。4.迄今发现的质粒DNA都是环状的。5.PCR反应中DNA模板量一般为A、100-10000拷贝B、100-100000拷贝C、1000-10000拷贝D、10-100拷贝6.II型限制性核酸内切酶的基本特征是A、既有内切酶活性又有甲基化酶活性B、识别非对称序列C、有特异的识别序列D、识别序列具有回文对称结构E、在识别序列内或两侧特异位点切割7.逆转录合成第一条链时一般采用下列哪一种酶A、鼠源反转录酶B、鸡源反转录酶C、兔源反转录酶D、禽源反转录酶8.标记灵敏度高效果好的探针是A、32PB、地高辛C、生物素D、荧光素9.下列哪一种酶作用时需要引物?A、限制性核酸内切酶B、末端转移酶C、反转录酶D、DNA连接酶10.基因工程的三大基本元件是供体基因、受体细胞、_____________。11.下列哪一项不属于遗传表型检测法A、抗药性标记基因B、LacZ基因蓝白斑筛选C、GFPD、核酸分子杂交12.末端脱氧核苷酸转移酶在基因工程的操作中主要是防止载体自连。13.关于宿主控制的限制修饰现象的本质描述不太恰当的是A、由作用于同一DNA序列的两种酶构成B、这一系统中的核酸酶都是II类限制性内切核酸酶C、这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA

进行修饰D、不同的宿主系统具有不同的限制--修饰系统14.PCR技术是_________的缩写。15.下列哪一种结构形态的外源蛋白表达量高A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白16.以mRNA为模板合成CDNA时，所用的工具酶是A、DNA聚合酶IB、DNA连接酶C、逆转录酶D、核酸内切酶17.Sanger双脱氧末端终止法胶板上的链就是模板链。18.重组DNA技术领域常用的质粒DNA是A、细菌染色体DNA的一部分B、细菌染色体外的独立遗传单位C、病毒基因组DNA的一部分D、真核细胞染色体DNA的一部分19.转基因技术导致的生物安全威胁属于生态环境破坏。20.________主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计一组混合引物来合成相应的基因。21.你在做Southern印迹分析，并且刚完成了凝胶电泳这一步。根据方案，下面一步骤是用NaOH溶液浸泡凝胶，使DNA变性为单链。为了节省时间，你略过了这一步，直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上。然后用标记探针杂交，最后发现放射自显影片是空白。错在哪里？22.质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A、①③⑤⑦B、②④⑥C、①③⑥⑦D、②③⑥⑦23._________是指真核生物基因组中能特异与核基质结合并富含AT的DNA序列。24.核酸杂交的原理是根据RNA分子间互补。25.某限制性内切核酸酶按GGCCGCCC方式切割，产生的末端突出部分含A、3个核苷酸B、4个核苷酸C、5个核苷酸D、2个核苷酸26.基因治疗研究的基本程序不包括A、目的基因的选择与制备B、靶细胞的选择和培养C、基因的导入和表达D、大肠杆菌的培养27.YAC载体具有什么样的功能性DNA序列？为什么在克隆大片段时，YAC具有优越性？28.克隆的进行依赖于各种参与DNA新陈代谢的_________的使用。29.基因治疗是把健康的外源基因导入A、有基因缺陷的染色体中B、有基因缺陷的细胞器中C、有基因缺陷的DNA分子中D、有基因缺陷的细胞中30.在分离DNA时，要戴手套操作，原因是手上常有________。31.下列哪一种测序方法不需要跑胶A、化学降解法B、自动测序法C、胶磷酸测序法D、双脱氧末端终止法32.下列哪种病不可以进行遗传病的基因治疗A、血友病BB、艾滋病C、囊性纤维化D、心血管疾病33.基因工程在食品工业上有何应用发展？34.写出动物基因工程的常用方法？35.基因表达载体中启动子的本质是_________。36.下列属于基因工程步骤的是（）A、提取目的基因B、目的基因与运载体结合C、目的基因导入受体细胞D、目的基因的表达37.构建GST蛋白表达系统的载体是为了使目标蛋白以哪种方式表达?A、融合表达B、分泌表达C、独立表达D、包涵体表达38.受体细胞的_________是接受外源DNA的生理状态_。39.基因组文库的构建一般包括下列基本步骤A、细胞染色体大分子DNA的提取和大片段DNA的制备B、载体DNA的准备C、载体与外源大片段DNA的连接D、体外包装机基因组DNA文库的扩增E、重组DNA的筛选和鉴定40.基因治疗的载体只有病毒载体系统。41.以RNA为模板，用反转录酶可同时产生单链和双链的cDNA，双链DNA是由自身引物引导合成，但这种自身引物引导的合成效率远低于外加寡核苷酸引物引导的合成。42.不同的表达载体需要不同的受体系统进行基因表达，受体系统根据宿主细胞的性质可以分为两大类：________________和真核表达系统。43.任何一种质粒都可以用氯霉素扩增的方法，增加它的拷贝数。44.对DNA变性描述正确的是：A、包括DNA双螺旋的解链B、可以由低温产生C、是可逆的D、是磷酸二酯键的断裂E、包括氢键的断裂45.T4DNA聚合酶具有几种酶活性A、2种B、3种C、4种D、1种46.核酸杂交探针就是带有放射性标记的DNA分子。47.基因工程药物的特点是高技术，短周期，高投入，高风险，高收益。48.大肠杆菌作为外源基因表达系统的优点是A、繁殖迅速B、操作方便C、基因克隆机表达系统成熟完善D、全基因组测序完成E、被美FDA批准为安全的基因工程受体生物49.首例细胞基因治疗方案是对哪一种病的基因治疗A、血友病BB、艾滋病C、囊性纤维化D、重症联合免疫缺陷50.westernblot是属于下列哪一种检测方法A、表型检测法B、蛋白质杂交检测法C、序列鉴定法D、物理特性检测法51.单个细胞中所含有的质粒DNA分子数目即为质粒的_________。52.关于重组体的叙述，下列哪项不正确：A、重组体可直接表达外源基因B、重组体只能在宿主细胞或体外表达系统中表达外源基因C、重组体是由目的基因和载体通过连接酶连接而成的D、重组体中含有外源基因53.限制性核酸内切酶切割DNA后产生A、5’磷酸基和3’羟基基团的末端B、3’磷酸基和5’羟基基团的末端C、5’磷酸基和3’磷酸基团的末端D、5’羟基和3’羟基基团的末端54.下列哪一种方法属于核酸分子杂交A、southernblotB、PCR扩增C、限制图谱分析法D、抗药性标志筛选55.不是基因工程载体中的报告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori56.对柯斯质粒(cosmid)描述正确的是A、它具有COS位点，因而可进行体外包装B、它具有质粒DNA的复制特性C、进入受体细胞后，可引起裂解反应D、进入受体细胞后，可引起溶源化反应E、能与有同源序列的质粒进行重组57.可识别并切割特异DNA序列的称A、限制性核酸外切酶B、限制性核酸内切酶C、非限制性核酸外切酶D、非限制性核酸内切酶58.PCR技术的应用在哪些方面？59.在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么？60.质粒生物学特性不包括A、自我复制B、转移性C、相容性D、高拷贝数61.基因打靶包括基因敲除和_________。62.构建基因组文库的关键一步是A、制备高分子质量的基因组DNAB、载体的选择C、DNA片段与载体的连接D、重组体转化宿主细胞63.基因治疗一般都是通过体内法这一途径进行的。64.Southern印迹的DNA探针()杂交。A、可与任何含有相同序列的DNA片段B、可与任何含有互补序列的DNA片段C、可与用某些限制性内切核酸酶切成的DNA片段D、只与完全相同的片段65.限制性内切核酸酶BsuRI和HaeIII的来源不同，但识别的序列都是GGCC，因此他们属于_________。66.能防止载体自连的酶是A、T4噬菌体DNA连接酶B、逆转录酶C、碱性磷酸酶D、末端脱氧核苷酸转移酶67.pUC质粒包括哪些组成部分A、复制起点B、氨苄青霉素抗性基因C、lacZ的启动子D、多克隆位点E、潮霉素抗性基因68.限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是A、修复自身的遗传缺陷B、促进自身的基因重组C、强化自身的核酸代谢D、提高自身的防御能力69.Sanger双脱氧末端终止法和化学降解法的应用原理是一样的。70.下面有关限制酶的叙述正确的是（）A、限制酶是外切酶而不是内切酶B、限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割C、同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D、一些限制酶在识别位点内稍有不同的位置切割双链DNA，产生黏末端E、一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端卷II参考答案一.综合考核题库1.正确答案:A2.正确答案:正确3.正确答案:基因打靶技术4.正确答案:错误5.正确答案:B6.正确答案:C,D,E7.正确答案:A8.正确答案:C9.正确答案:C10.正确答案:载体11.正确答案:D12.正确答案:错误13.正确答案:B14.正确答案:聚合酶链式反应15.正确答案:C16.正确答案:C17.正确答案:错误18.正确答案:B19.正确答案:错误20.正确答案:简并引物PCR21.正确答案:如果你的杂交探针是双链的，可能因为在加入杂交混合物之前忘记将探针变性而得到空白的放射自显影结果。22.正确答案:C23.正确答案:核基质附着区24.正确答案:错误25.正确答案:A26.正确答案:D27.正确答案:YAC带有天然染色体所有的功能元件，包括一个着丝粒，一个DNA复制起点，两个端粒。YAC能够容纳长达几百kb的外源DNA，这是质粒和黏粒办不到的。大片段的插入更有可能包含完整的基因，在染色体步移中每次允许更大的步移距离，同时能够减少完整基因组文库所需的克隆数目。28.正确答案:酶29.正确答案:D30.正确答案:核酸酶31.正确答案:C32.正确答案:B33.正确答案:主要是通过基因重组，使各种转基因生物提高生产谷氨酸、调味剂、酒类和油类等有机物的产率；或者改良这些有机物组成成分，提高利用价值。34.正确答案:显微注射技术构建转基因小鼠；基因打靶策略；病毒载体法；精子载体法；ZFN介导转基因；TALEN技术。35.正确答案:一段DNA片段36.正确答案:A,B,C,D37.正确答案:A38.正确答案:感受态39.正确答案:A,B,C,D,E40.正确答案:错误41.正确答案:正确42.正确答案:原核表达系统43.正确答案:错误44.正确答案:A,C,E45.正确答案:A46.正确答案:错误47.正确答案:错误48.正确答案:A,B,C,D,E49.正确答案:D50.正确答案:B51.正确答案:拷贝数52.正确答案:A53.正确答案:A54.正确答案:A55.正确答案:D56.正确答案:A,B,D,E57.正确答案:B58.正确答案:遗传疾病的诊断、传染病的诊断、基因的快速克隆、基因突变、序列分析、检测基因表达、进化分析。59.正确答案:回文序列是：5'-CATATG-3'。60.正确答案:C61.正确答案:基因敲入62.正确答案:A63.正确答案:错误64.正确答案:B65.正确答案:同裂酶66.正确答案:C67.正确答案:A,B,C,D68.正确答案:D69.正确答案:错误70.正确答案:B,C,D,E卷III一.综合考核题库(共70题)1.cDNA文库包括该种生物的A、某些结构基因B、内含子C、所有的结构基因D、内含子和调控区2.将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个基因组DNA克隆,各种此类质粒的集合体称之为构建了一个_______.3.既能在E．coli又能在S．cerevisiae中自我复制的载体DNA称为_________。4.EcoRI的识别序列是A、5-GATTC-3B、5-CTGGCAG-3C、5-CCCGGG-3;D、5-GGATCC-35.试述分子杂交技术的原理？6.染色质免疫沉淀技术是研究生命体组织或细胞内蛋白质与DNA相互作用的一种技术方法7.________________是一种耐热的依赖DNA的DNA聚合酶。8.第一个作为重组DNA载体的质粒A、ColElB、pSCl01C、pUCl8D、pBR3229.动脉硬化属于（）类型的疾病A、心血管疾病B、恶性肿瘤C、血友病D、艾滋病10._________质粒是目前使用较为广泛的载体。11.pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于_______。12._________让外源DNA沿着花粉管经过珠心进入尚未形成正常细胞壁的卵子、合子或早期胚胎细胞中，从而实现基因的转移。。13.被FDA批准为安全的基因工程受体生物的细菌是A、金黄色葡萄球菌B、蜡样芽孢杆菌C、大肠杆菌D、变形杆菌14.噬菌体能够克隆多大的DNA片段A、5KbB、20kbC、30kbD、40kb15.最早建立成功的转基因哺乳动物是_________。16.只能从DNA分子的末端开始水解磷酸二酯键，使核苷酸解离下来的酶是A、核酸外切酶B、核酸内切酶C、DNA连接酶D、末端转移酶17.连接反应中，哪一种组分的作用是激活连接酶反应A、Tris-HCLB、MgCl2C、ATPD、DTT18.EGTA是_________离子螯合剂。19.接合质粒20.说明SangerDNA测序法的原理。21.限制性内切核酸酶的星号活性是指A、在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性B、活性大大提高C、切割速度大大加快D、识别序列与原来的完全不同22.何谓cDNA文库？23.Cre-loxP系统两个loxP位点位于不同的DNA链或染色体上，Cre重组酶诱导loxP间的序列互换。24.将抗体、抗原或细胞因子的基因导入病人体内，改变病人免疫状态，从而达到预防和治疗疾病的目的。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因增补B、基因激活C、基因失活D、免疫调节25.利用反义RNA、核酶等反义技术及RNA干扰技术等能特异地封闭基因表达的特性，抑制一些有害基因的表达，以达到治疗疾病的目的。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因修正B、基因增补C、基因激活D、基因失活26.一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。27.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫基因库。28.Southernblot检测的是RNA分子。29.BAC载体的最大容载能力是_______。30.已知某一内切核酸酶在一环状DNA上有三个切点，因此，用此酶切割该环状DNA，可得到三个片段。31.II型限制酶识别位点一般长度为______个核苷酸对。32.PCR特异性与模板特异性成反比。33.用下列方法进行重组体的筛选可以说明外源基因进行了表达。A、Southern印迹杂交B、Northern印迹杂交C、Western印迹D、原位菌落杂交34.完成DNA分子重组的主要酶是A、限制性核酸内切酶和DNA连接酶B、大肠杆菌聚合酶和DNA连接酶C、核酸外切酶和核酸内切酶D、碱性磷酸酶和T4多核苷酸激酶35.具有EcoRI末端的外源DNA片段可以以两个方向插入到EcoRI末端的载体中。36.在基因工程的DNA分子连接，最合适连接的末段是A、相同黏性末端B、不同黏性末端C、平末端D、不同限制性核酸内切酶形成的DNA分子末端37.用Sanger双脱氧链终止法进行DNA测序时，必须具有几个反应系统A、5个B、2个C、3个D、4个38.向有功能缺陷的细胞补充相应功能基因，以纠正或补偿其基因缺陷，达到治疗的目的。这个过程叫做A、基因治疗B、基因置换C、基因修正D、基因激活39.基因工程中所用的大肠杆菌菌株是__________的菌株，这样可以避免从中分离出来的DNA，不被限制性核酸内切酶完全消化或完全不被消化。40.用蓝白斑筛选重组子时，白斑表示外源基因插入到载体中了。41.克隆羊多利是用的________________法制备的。42.核酸杂交探针可分为两大类：DNA探针和_______。43.II类限制酶反应中必须添加的阳离子是A、Na+B、Ca2+C、Mg2+D、Mn2+44.蓝白斑筛选重组子时，白色菌落不一定就是阳性克隆。45.何谓星活性？46.通过基因敲除技术使生物体缺失一个或更多基因，从而判断这些被敲掉基因的功能，常称之为_______________。47.pGEM质粒与pUC质粒的区别主要在于A、抗药性基因的不同B、复制起点不同C、MCS不同D、前者有启动子48.PCR循环时按什么方式扩增A、n2B、2nC、2n-1D、2n+149.试述理想质粒载体的构建原理？50._________是一种最为普遍的与年龄相关的认知障碍退行性疾病。51.关于黏粒载体的描述错误的是A、是由λ噬菌体与质粒DNA重组的载体B、既有质粒的特性，又有噬菌体DNA的特性(如可体外包装)C、可插入大片段的外源DNA片段D、可像YAC载体那样构建大片段的基因组文库

52.下面关于细菌人工染色体(BAC)的特征描述，不正确是（）。A、BAC载体在细菌中以环形超螺旋状态存在，使分离操作起来相对容易B、BAC载体在大肠杆菌宿主保持高拷贝C、克隆到BAC载体上的外源片段可以直接进行测序以获得末端序列

D、通过电激法将大质粒转化到大肠杆菌比酵母的转化率提高了10~100

倍53.基因组文库中包括有内含子和外显子，而cDNA文库中则不含_________。54.在长模板链的指导下，引物延伸合成长的DNA互补链时应选用A、T4DNA聚合酶B、Klenow酶C、大肠杆菌DNA聚合酶ID、T7DNA聚合酶55.何谓基因组文库？56.如果PCR的每一次循环都把上一次循环中合成的DNA增加了1倍，那么10个循环就扩增了1000 倍，20个循环就扩增了100万倍，30个循环就扩增了10亿倍。57.在微生物遗传学和分子遗传学研究领域中的技术上的三大发明对基因工程的诞生起到了决定性的作用，这三大发明是下列哪些A、利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶体外切割和连接DNA片段B、遗传密码子的破译C、质粒改造成载体以携带DNA片段克隆D、逆转录酶的使用E、明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机制58.进行体外重组时，外源片段和载体分子之间的物质的量比值一般为A、（1-5）:1B、（3-10）:1C、1：（3-10）D、1：（1-5）59.PCR反应中Taq酶常常没有错配碱基纠错功能，因为它没有A、5’－3’聚合酶活性B、5’－3’外切酶活性C、3’－5’外切酶活性D、3’－5’聚合酶活性60.下列用于Southern印迹转移的是：A、首先用限制性内切酶处理DNAB、酶切片段经琼脂糖电泳C、将DNA进行碱变性D、将DNA转移至硝酸纤维素膜E、硝酸纤维素膜经80℃真空干燥2-3小时61.λ噬菌体载体根据外源基因整合的方式不同，分为____________和置换型载体两大类。62.基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。63.大肠杆菌DNA聚合酶I是一种多功能酶，具有哪些酶活性A、3’-5’聚合酶活性B、5’-3’聚合酶活性C、5’-3’DNA外切酶活性D、3’-5’外切酶活性E、末端转移酶活性64.催生基因工程技术诞生的关键技术是DNA转化技术的突破。65.基因工程诞生的三大理论基础是什么？66.真核生物基因组上有些DNA序列能将基因及基因簇隔开，阻止邻近基因之间的相互作用，这些功能序列被称为_________。67.在利用LacZ失活的显色反应筛选法中，IPTG的作用是A、诱导宿主的ω肽的合成B、作为酶的作用底物C、作为显色反应的指示剂D、诱导宿主的α肽的合成68.在LacI标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显_________色，为阳性克隆。69.用不同的产生黏性末端的限