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天然药物化学课程项目五黄酮类成分提取分离任务5鉴别方法-色谱法色谱法（一）纸色谱（二）硅胶薄层色谱（三）聚酰胺薄层色谱（一）纸色谱（一）纸色谱适用于鉴别各种天然黄酮类化合物及其苷类混合物。混合物的鉴定常采用双向色谱法。以黄酮苷类来说，一般第一向展开采用某种醇性溶剂，如正丁醇-醋酸-水（4∶1∶5，上层）等，主要是根据分配作用原理进行分离。第二向展开溶剂则用水或其他含水溶液，如2%～6%醋酸等，主要是根据吸附作用原理进行分离。（一）纸色谱黄酮类化合物苷元中，平面性分子如黄酮、黄酮醇、查耳酮等，用含水溶剂如3%～5%醋酸溶液展开时，几乎停留在原点不动（Rf＜0.02）；而非平面性分子如二氢黄酮、二氢黄酮醇、二氢查耳酮等，因亲水性较强，Rf值较大（0.10～0.30）。（一）纸色谱黄酮类化合物分子中羟基苷化后，极性随之增大，在醇性展开剂中Rf值相应降低，同一类型苷元，Rf值依次为：苷元＞单糖苷＞双糖苷。但在用水或2%～8%醋酸、3%氯化钠水溶液或1%盐酸展开时，则苷元几乎停留在原点不动，Rf值大小顺序为：苷元＜单糖苷＜双糖苷。（二）硅胶薄层色谱（二）硅胶薄层色谱用于分离和鉴定弱极性黄酮类化合物。分离黄酮苷元常用的展开剂是甲苯-甲酸乙酯-甲酸（5∶4∶1）。可根据待分离成分的极性大小适当调整甲苯与甲酸的比例。分离苷类时可用正丁醇-乙酸-水（3∶1∶1）、甲酸-乙酸乙脂-水（9∶1∶1）、三氯甲烷-醋酸乙脂-丙酮（5∶1∶4）和三氯甲烷-甲醇-水（65∶45∶12）等。分离二氢类黄酮苷类的溶剂系统有三氯甲烷-乙酸（100∶4）、苯-乙酸（100∶4）或三氯甲烷-乙酸-甲醇（90∶5∶5）等。（三）聚酰胺薄层色谱（三）聚酰胺薄层色谱特别适合于分离含游离酚羟基的黄酮及其苷类。展开剂中多含有醇、酸和水。鉴定苷元常用的展开剂有三氯甲烷-甲醇（94∶6），三氯甲烷-甲醇-丁酮（12∶2∶1），苯-甲醇-丁酮（4∶3∶3）等。鉴定黄酮苷类需要极更强的展开剂，常用甲醇-水（1∶1），甲醇-乙酸-水（90∶5∶5）等。聚酰胺薄层色谱中，各

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