色谱分离的依据

药物分离与纯化技术课程色谱分离技术-色谱分离的依据色谱分离的依据-色谱分离技术大纲1.阻滞因数或比移值Rf2.新型分离与纯化技术的研究和开发色谱分离的依据-色谱分离技术依据混合物中各组分物理化学性质（如吸附力、分子形状及大小、分子的荷电性、溶解度及亲和力等）的差异，通过物质在两相间反复多次的平衡过程，使各组分在两相中的移动速度或分布程度不同，表现为各组分的流出次序不同，而使各组分分离的技术。

色谱分离一般属于物理分离方法，其最基本的特征是有一个固定相和一个流动相，各组分的分离发生在两相进行相对运动的过程中。1.色谱分离技术色谱分离的依据-色谱分离技术在定温定压条件下，当色谱分离过程达到平衡状态时，某种组分在固定相S和流动相m中含量（浓度）C的比值，称为平衡系数K（也可是分配系数、吸附系数、选择性系数等）。1.色谱分离技术色谱分离的依据-色谱分离技术平衡系数K主要与下列因素有关：

①被分离物质本身的性质；

②固定相和流动相的性质；

③色谱柱的操作温度。

一般情况下，温度与平衡系数成反比，各组分平衡系数K的差异程度决定了色谱分离的效果，K值差异越大，色谱分离效果越理想。1.色谱分离技术色谱分离的依据-色谱分离技术柱色谱分离过程如图所示。当混合物被流动相带入色谱柱并在柱中移动时，由于各组分在固定相中的分配系数或溶解、吸附、交换、渗透或亲和能力的差异，使各组分随流动相移动的速率不同；

因此当流动相移动一定柱长后，使各组分在色谱柱内分层，从而达到各组分分离的目的。2.色谱分离过程色谱分离的依据-色谱分离技术混合液中各组分对固定相的吸附能力的大小次序为：白球分子〇＞黑球分子●＞三角形分子△。将三种组分的混合物加入色谱柱的顶端（图(a)），然后加入流动相（展开剂、洗脱剂），在重力或压力差的作用下，流动相向下移动，各组分在两相间不断地发生吸附、解吸、再吸附、再解吸…的过程，连续多次的吸附平衡过程是吸附色谱分离的基础。2.色谱分离过程色谱分离的依据-色谱分离技术如果各组分与固定相的吸附力相同，则各组分以相同的速率随流动相一起向下移动，而不能被分离。如果混合物中各组分与色谱柱中固定相的吸附力大小不同，通过在柱中反复多次地吸附和解吸，使各组分间不断地发生差速迁移（如图(b)～(g)所示2.色谱分离过程色谱分离的依据-色谱分离技术最后，作用力最弱的“△”分子随流动相的移动速率快，最先从色谱柱中流出（图(h)），中等吸附力的“●”分子在中间流出，吸附力最大的“〇”分子最后从柱中流出，实现了各组分的分离。2.色谱分离过程色谱分离的依据-色谱分离技术从色谱分离过程可看出，差速迁移是色谱分离的基础，混合物中各组分理化性质的差异、固定相的吸附能力和流动相的解吸（洗脱）能力是产生差速迁移的三个最重要的因素。

2.色谱分离过程色谱分离的依据-色谱分离技术在色谱分离操作中，将加入流动相使各组分分层的操作过程，称为展开操作。

展开后各组分的分布情况，称为色谱图。

加入洗脱剂，使各组分分别从色谱柱中流出的操作过程，称为洗脱操作。

从柱中流出的含有某一组分的溶液，称为洗脱液。

在实际的色谱分离操作中，有时展开与洗脱合并为一个操作过程。2.色谱分离过程色谱分离的依据-色谱分离技术色谱分离的检测控制一般采用某种形式的电讯号，电讯号的大小反映了物质的量的多少，因色谱