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文档简介
高效液相色谱简介第1页,共16页,2023年,2月20日,星期四论文内容色谱分析方法发展概述分类基本原理流出曲线及有关术语高效液相色谱简介第2页,共16页,2023年,2月20日,星期四1903年Tswett创立色谱法(在碳酸钙上分离了叶绿素)20世纪四五十年代出现了纸色谱(PC)和薄层色谱法(TLC)1952年James和Martin提出了气相色谱法(GC)20世纪60年代后期液相色谱法得到了快速发展论文内容第3页,共16页,2023年,2月20日,星期四第4页,共16页,2023年,2月20日,星期四第5页,共16页,2023年,2月20日,星期四
分配系数K和分配比kK=(溶质在固定相中的浓度)/(溶质在流动相中的浓度)=Cs/CmK为每一溶质的特征值,仅为固定相和温度有关,与两相体积论文内容、柱管特性及仪器无关。k=(组分在固定相中的质量)/(组分在流动相中的质量)=Ms/Mm两峰间的距离由组分在两相间的分配系数决定;峰宽由组分在色谱柱中传质和扩散行为决定。 两个理论(塔板理论和速率理论)论文内容第6页,共16页,2023年,2月20日,星期四色谱流出曲线示意图第7页,共16页,2023年,2月20日,星期四有关术语1)色谱流出曲线和色谱峰2)基线3)峰高4)保留值(死时间、保留时间、调整保留时间、死体积、保留体积、调整保留体积、相对保留值)
5)区域宽度(标准偏差σ,半峰宽W1/2,峰底宽度W)第8页,共16页,2023年,2月20日,星期四样品所含组分的最少个数;定性分析(保留值);定量分析(峰高或面积);分离效能(保留值及区域宽度);两相选择的依据(峰间距离)论文内容从色谱流出曲线中可以得出许多重要信息:第9页,共16页,2023年,2月20日,星期四高效液相色谱(HPLC)流程示意图第10页,共16页,2023年,2月20日,星期四HPLC组成图第11页,共16页,2023年,2月20日,星期四HPLC组成示例第12页,共16页,2023年,2月20日,星期四
高效液相色谱法的特点高压:一般可以达到150~300kg/cm2高速:一般可以达到1~10mL/min高效:一般可以达到60000理论塔板/米高灵敏度
:微升数量级的就可以进行全分析第13页,共16页,2023年,2月20日,星期四分类:液—液分配色谱液—固分配色谱离子交换色谱排斥色谱
选择:样品的分子量范围溶解度分子结构第14页,共16页,2023年,2月20日,星期四高效液相色谱的应用高效液相色谱,特别适用于分离沸点高和热稳定性差的物质,目前已广泛应用于化工、食品、医药、生化、卫生、环境保护和高能化合物等生产和科研工作中。
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