实验室相关性感染预防培训教材

实验室相关性感染预防2013年10月22日第一页，共四十八页。实验室安全内容生物安全防火防爆安全化学安全·····第二页，共四十八页。培训的内容及目标1、实验室相关感染流行病学2、实验室相关感染预防措施相关指南介绍3、血源性病原体职业暴露处理流程4、手卫生要求评估我们目前的管理状况（设施、操作规程、工作人员的意识和技能），做我们能够做到的，保护我们自身的安全

实验室安全是大家的事！第三页，共四十八页。实验室相关感染流行病学定义：又称实验室获得性感染，是指实验室工作人员因直接或间接操作病原微生物而获得的感染。发生率：Sulkin和Pike的研究：3921例感染者中，不到20%的感染与已知事件有关，不明原因感染中有65%是由微生物气溶胶引起的。志贺氏菌、布鲁菌和沙门菌为最常见的感染病原菌。感染率最高的为布鲁菌病（651/10万，普通人群为0.08例/10万）和脑膜炎奈瑟菌（25.3例/10万，普通人群为0.62例/10万）第四页，共四十八页。感染传播是如何发生的任何感染的传播必须有完整的感染链，包括传染源、传播途径和易感人群，切断任何一环就可以阻断疾病的传播。控制传染源：致病菌的毒力、数量和抵抗力切断传播途径：一种或几种保护易感人群：抵抗力第五页，共四十八页。感染源病原体：《人间传染的病原微生物名录》第一类（危险度4级）：29种，全为病毒第二类（危险度3级）：病毒48种，细菌8种，真菌4种，Prion（瘙痒病因子除外）第三类（危险度2级）：病毒74种，细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体145种；真菌55种、瘙痒病因子第四类（危险度1级）：6种，全为病毒注意：微生物危险等级≠实验室生物安全等级例如：结核分枝杆菌，对其进行离心、冻干等操作，在BSL-3实验室内进行；进行涂片、显微镜检查等检测是可在BSL-2实验室内进行第六页，共四十八页。感染途径呼吸道吸入—吸入感染性的气溶胶产生气溶胶的操作：离心、溢出或溅出、混合、搅拌、碾磨和捣碎、超声处理、打开容器消化道摄入—用嘴吸吸管、标本溅入口中、在实验室内吃、喝、吸烟，咬手指等皮肤黏膜沾染—标本溢出、喷溅沾染，或与污染的表面和物品直接接触接种—锐器刺伤、割伤、蚊虫叮咬，搔抓第七页，共四十八页。哪些工作人员容易感染？？很少发生感染的人的特征：1、遵守生物安全规程2、重视感染因子3、具备“防御性”工作习惯4、能够认识到潜在的感染危险容易发生感染的人的特征：1、对生物安全规程主观能动性差2、动作太快3、不太注意所操作物质的感染性危险4、过度保护：使用双层手套、面罩和防护服，灵活性降低第八页，共四十八页。其他原因：个人防护培训不充分个人防护装置使用不当安全设施故障，特别是不易察觉的故障，如：BSC安装不合格、高效过滤网漏气、操作窗口抬高、工作台拥挤个人微生物操作技术差第九页，共四十八页。实验室相关性感染预防实验室生物安全是复杂的系统工程对要开展的实验工作进行风险评估，确定危险等级根据危险等级和防护需要建造标准的生物安全实验室对实验室实施规范化的管理完善实验室的生物安全防护设施提高实验室工作人员的生物安全防护意识和能力更新安全防护理念，改变不规范的行为方式加强人员培训，完善健康监测机制第十页，共四十八页。预防措施之一：

建造标准的生物安全实验室生物安全实验室组成：软件：生物安全管理体系（组织结构、程序、职责、过程和资源）硬件：防护屏障（一级防护屏障、二级防护屏障）一级防护屏障：包括一级防护装置和个人防护用品，如离心机安全杯、密闭运输箱、手套、防护衣、防护口罩、护目器、防护面罩、鞋套等二级防护屏障：实验室的建筑、结构和装修等设施（区域划分和平面布局、污染空气和废水的处理、电气自动控制系统等）第十一页，共四十八页。实验室生物安全等级基础实验室：BSL-1、BSL-2（病理科取材室达P2）防护实验室：BSL-3最高防护实验室BSL-4，BSL-2与BSL-1的区别：A、实验室工作人员操作病原微生物前须经特殊培训，并接受具有操作感染性微生物能力的专业人员的监督；B、实验室以外的人员严格限制进入实验室C、所有造成感染性气溶胶或泼溅的操作应在生物安全柜或其他物理围护结构中进行第十二页，共四十八页。BSL-2的基本要求

---WHO《实验室生物安全手册》第三版应用类型：临床、诊断、一般性研究、危险度2级病原体研究程序/措施：微生物技术规范、准入规定、加强培训要求、推荐进行职业健康检查个人防护用品：实验服、手套、呼吸防护器以备需要安全设备：生物安全柜（Ⅱ级）用于可能产生的气溶胶设施：推荐：通风设施第十三页，共四十八页。BSL-2基本要求健康监测：所有工作人员录用前或上岗前必须体检，记录病史并对其进行职业健康评估；工作人员发生疾病及其缺勤记录需保存；育龄期妇女应了解某些微生物对胎儿的危害，并根据不同微生物采取相应的保护措施培训：必须入口：经允许后进入清洁消毒：每天，完成高危工作后和有溅出时标本运输：两层密封器饮食：仅允许在清洁区域第十四页，共四十八页。BSL-2基本要求洗手装置：要求工作服：要求，离开实验室时脱去开放式工作台：低危险操作时允许可开启的窗户：允许，装纱窗表面：容易清洗，不允许使用地毯，工作台防酸、碱、热护眼装置：BSC外可能的飞溅第十五页，共四十八页。预防措施之一：

一级防护屏障和个人防护用品1、下列情况必须适当维护BSC、个人防护用品或其他防护装置：1）进行可能产生气溶胶或喷溅的操作如移液、离心、碾磨、搅拌、震荡、混匀、超声、打开装有感染性材料的容器等；2）处理高浓度或大容量感染性微生物，可在开放的实验室里用密封的转头或在离心安全罩内离心。第十六页，共四十八页。预防措施之一：

一级防护屏障和个人防护用品2、在操作危害性材料时，必须传保护性实验服、隔离衣、工作服或指定的实验室制服。离开实验室进入非实验区域如办公室、餐厅、图书馆时，必须脱去工作服。工作服应定期清洗。实验服不能带回家。第十七页，共四十八页。预防措施之一：

一级防护屏障和个人防护用品3、当微生物必须在BSC或防护结构之外处理时，应使用眼部、面部防护罩，防止喷溅污染。重复使用的防护面罩等用后应清洁消毒。戴隐形眼镜的也要戴眼部面部防护用品。4、必须戴手套，且根据不同的危险度选择适当的手套，实验室外不能佩戴手套。BSL-2实验室工作人员还应做到：1）当手套破损时，应立即更换，保证手套的完整性2）完成操作和离开实验室，应脱去手套并洗手3）一次性手套严禁清洗和重复使用，严格执行手卫生。第十八页，共四十八页。预防措施之一：

二级防护（安全设施）1、实验室门应自动关闭并带锁2、实验室必须有洗手池，安装在实验室入口。3、实验室设计应便于清洁和消毒，室内禁止使用地毯和脚垫4、实验室家具能够承受预期负荷和使用，工作台、柜子和设备间留有间隙，应便于清洁。工作台面必须防水耐热、酸、碱等，工作椅子必须覆盖无孔材料，便于清洁和消毒。5、不建议实验室有向外打开的窗户，如有，应安装纱窗等防蚊蝇第十九页，共四十八页。预防措施之一：

二级防护（安全设施）6、正确安装BSC，应安装在远离门、可打开的窗、实验室内走动较多和其他可能破坏气流的地方7、真空管道应用消毒剂积液器进行保护8、对通风系统没有要求，但建议安装机械送风系统，使气流由外向内流动，但不直接排出体外。9、洗眼装置应即时可用第二十页，共四十八页。预防措施之一：

二级防护（安全设施）10、从Ⅱ级BSC中排出的废气经高效过滤器过滤，再循环或通过管道排出室外，BSC应运转正常且每年检测和认证。（注意检测BSC的运行状态）11、应具备对废弃物进行消毒灭菌的设备第二十一页，共四十八页。预防措施之二：标准的微生物操作美国《微生物与生物医学实验室生物安全》第五版实验室主管必须执行实验室门禁制度（落实？？）在操作潜在危害性材料后和离开实验室前必须洗手不允许在实验室内吸烟、饮食、处理隐形眼镜、化妆和储存食物。食物必须储存在实验室外指定的地点禁止用嘴吸移液管，必须用移液装置第二十二页，共四十八页。预防措施之二：

标准的微生物操作5.建立和执行锐器安全使用制度：1）严格管理枕头和其他锐器，针头不能折弯、破坏或回套针帽2）使用锐器盒收集锐器，锐器盒放置在便利的地方3）重复使用的锐器必须使用耐刺的容器转运到供应室处理4）不能徒手拿取锐器，破碎的玻璃应用镊子或扫把来处理。尽量采用塑料器皿代替玻璃器皿第二十三页，共四十八页。预防措施之二：标准的微生物操作6.执行所有减少喷溅和产生气溶胶的操作7.在工作结束后或发生标本溢出或泼溅时，使用适当的消毒剂去污染。8.培养物、菌种和其他潜在的感染性材料灭菌后方可运出医院。灭菌地点在实验室外时，必须放入双层防渗漏容器内运送。9.在实验室入口处张贴生物危害标识，标识必须包含以下信息：实验室安全等级、负责人姓名、电话号码和出入实验室的手续第二十四页，共四十八页。预防措施之二：标准的微生物操作10.建立完整有效的有害物质管理计划11.实验室负责人必须确保实验室人员接受相应的生物安全培训，内容包括：职责、防护措施、暴露评估程序。每年强化培训一次。第二十五页，共四十八页。预防措施之二：特殊操作防护所有进入实验室是人员被告知存在的危害，符合要求的人员才可进入开展实验室工作人员适当的健康监测应考虑收集和保存高危人员的血清样本使用实验室手册，手册方便拿到负责人确保工作人员上岗前掌握操作标准保存和转运潜在性感染性材料需用双层防漏容器实验室应进行常规消毒，发生泼溅等意外后应消毒第二十六页，共四十八页。预防措施之二：生物安全柜的使用Ⅰ级BSC：保护人员和环境，不保护样本Ⅱ级BSC：保护人员、环境、工作台面的物品A1/A2型：不可以使用于放射性和有毒物质B1型：可使用于少量放射性和挥发性物质B2型：可使用于大量放射性和挥发性物质Ⅲ级BSC：彻底封闭不泄露第二十七页，共四十八页。预防措施之二：生物安全柜的使用生物安全柜安全吗？？？第二十八页，共四十八页。要点：保持气幕屏障的完整性1、操作时室内尽量减少人员流动2、不要遮挡进风和出风格栅3、本次实验所需的物品器材才可放入BSC内4、物品器材尽可能放在工作台后部后缘处5、含有生物危害性的实验物品应收集放在BSC内一侧，不能放在BSC外面。不能直接拿出来，应密闭并消毒容器外表面后拿出6、竖直放置的移液管容器不能在BSC内使用第二十九页，共四十八页。要点：保持气幕屏障的完整性7、双手进入BSC内让气流扫过片刻（1min）后方可开始试验8、BSC的操作流程应由洁到污9、BSC内不需要明火，如需要可使用一次性接种环或带有指示灯的触控板微型燃烧器10、实验结束BSC应继续运行片刻（4min）后方可关闭，用适当的消毒剂消毒BSC内工作台和其他表面第三十页，共四十八页。预防措施之三：环境清洁消毒先清洁后消毒？还是先消毒后清洁？？是随时消毒还是终末消毒？？1、必须终末消毒，特殊情况随时污染随时消毒（喷溅、撒泼时等等）2、没有明确污染的（预防性消毒）的先清洁后消毒；明确污染的先消毒后清洁3、根据消毒目的（消毒还是灭菌）、病原体抵抗力和物品器材的耐受性选择合适的消毒灭菌方法第三十一页，共四十八页。预防措施之三：环境清洁消毒4、紫外线消毒适合于无人状态下的消毒；含氯消毒剂可杀灭细菌真菌病毒等，但达不到灭菌，且应考虑腐蚀性5、清洁消毒时注意个人防护，防止化学伤、物理伤6、注意：电话、电脑键盘、频繁接触的表面每天都要清洁消毒第三十二页，共四十八页。实验室应急状态的处理BSC突然停机：1、所有人员必须撤离相关区域，报告负责人2、1h内任何人不得进入事发实验室3、室内通风不良，应处理空气后再进入4、由专业人员对事发实验室进行消毒处理5、暴露人员应进行必要的医学观察，必要时就医第三十三页，共四十八页。实验室应急状态的处理

菌种毒种外溢菌种毒种外溢（潜在感染性因容器破裂）：1、外溢到地面、台面和其他物体表面：1）戴手套、穿防护服，必要时用面罩2）用布或纸巾覆盖吸收溢出物3）用消毒液由外围向中心进行消毒，作用30-60min，有碎玻璃等锐器时严禁徒手操作4）将污染物用防漏、耐穿刺容器密闭包装运出5）再次清洁和消毒污染区域6）污染处理结束，报告实验室负责人第三十四页，共四十八页。2、菌种在BSC内外溢：1）少量的外溢：按照上述处理措施消毒即可2）大量外溢时：停止工作；在风机运行状态下对台面、内壁、受污染的器材表面进行消毒，然后打开操作台面板，对积液槽进行消毒，再用紫外线灯对BSC进行空气消毒实验室应急状态的处理

菌种毒种外溢第三十五页，共四十八页。3、在BSC之外的污染区、半污染区外溢（潜在感染性气溶胶释放）：1）停止工作，在加强个人防护的条件下进行消毒2）洒溢污染防护服：立即对污染局部进行消毒、手消毒，再到缓冲区脱掉防护服，再洗手和手消毒，如同时污染到其他表面，也应进行处理3）喷溅到皮肤黏膜：停止工作，立即（10秒之内）用喷淋或洗眼装置冲洗，报告院感科，进行风险评估、咨询、预防和跟踪检测实验室应急状态的处理

菌种毒种外溢第三十六页，共四十八页。实验室应急状态的处理

1、锐器伤：立即停止工作，由伤口旁端向中心轻轻挤压出血液、在流动水下冲洗15-20min，碘伏消毒，必要时包扎伤口，报告院感科进行进一步的处理2、食入感染性材料：停止工作，报告实验室负责人和生物安全委员会，由后者评估后作出预防、医学隔离观察等第三十七页，共四十八页。实验室应急状态的处理3、离心管破裂：1）无安全罩的离心管破裂：在离心过程中发生破裂，应关闭电源让仪器密闭30min带气溶胶沉积后，在加强个人防护的条件下打开容器进行处理；如离心结束打开盖子才发现破裂，应立即关闭盖子，密闭30min后再处理2）有安全罩的离心管破裂：按说明书要求，在BSC内拆卸安全罩处理，或消毒灭菌后在打开安全罩处理第三十八页，共四十八页。2013职业暴露情况汇总科室人数部位器械伤口处理时机伤口处理方法<24h报告检验科4手4空心针2，其他2正确4人正确4人3人核医学1手1其他1正确1人正确1人1人全院78手70空心针51正确67人正确48人62人职业医师17人，护士43人，实习医师5人，实习护士9人，清洁工8人第三十九页，共四十八页。职业暴露处理流程：立即局部处理（最关键）尽快报告院感科或疾控中心到院感科备案、进行风险评估、必要时采取预防措施本底调查和跟踪检测第四十页，共四十八页。生物安全监测方法生物安全设施与装备的监测：BSC性能检测洗眼器/紧急冲淋装置监测防护设备气密性的检测依从性监测：对工作人员执行安全工作程序的监测生物安全委员会工作监测健康监测：包括岗前体检、疫苗接种、定期体检、疾病和缺勤记录、职业暴露医疗评估、育龄期妇女对微生物的评估第四十一页，共四十八页。手是医院感染传播的主要媒介1999~2004年间，美国纽约州4个实验室人员发生大肠杆菌O157：H7感染，调查结果：1、所感染的大肠杆菌与工作人员感染前操作的大肠杆菌基因型相同2、1名感染者每次在实验室打电话都不摘手套，脱手套后有时不洗手；1名感染者有时脱手套后不洗手，他的同事用电脑、接触水龙头不脱手套第四十二页，共四十八页。手卫生

手卫生指征：

清洁操作之前、污染操作之后1、直接接触每个患者前、后，从同一患者身体的污染部位移动到清洁部位时。2、接触患