加味五味消毒饮对中重度痤疮的疗效及其作用机制,皮肤病学论文

加味五味消毒饮对中重度痤疮的疗效及其作用机制,皮肤病学论文Th17细胞是一类新近发现的CD4+T细胞,研究发现,Th17细胞在防御细菌感染、介导慢性炎症以及本身免疫病中发挥重要作用.寻常性痤疮,十分是中重度痤疮,临床表现为大量的丘疹、脓疱甚至结节、囊肿,明显的炎性皮损.本研究通过研究中重度痤疮患者外周血IL-17水平以及Th17细胞占外周血CD4+细胞比例,讨论Th17细胞在中重度痤疮发病及治疗中的作用,并讨论加味五味消毒饮治疗中重度痤疮的疗效及可能机制.1材料与方式方法1.1研究对象随机选取2020年7月-2020年8月我院门诊寻常性痤疮[2]患者77例.根据Pillsbury法[2]分为轻度痤疮组32例,男14例,女18例,年龄14.2~38.3岁,平均(22.55.2)岁;病程3个月~8年,平均(2.30.6)年.中重度痤疮组45例,男20例,女25例,年龄14.5~35.5岁,平均(21.34.2)岁;病程3个月~9年,平均(2.60.9)年.中重度痤疮组患者随机分为治疗组25例,男12例,女13例,年龄13.6~36.2岁,平均(23.16.2)岁;病程6个月~6年,平均(2.50.8)年.对照组20例,男8例,女12例,年龄(15.6~40.3)岁,平均(22.55.2)岁;病程8个月~9年,平均(2.61.1)年.无痤疮正常体检者30名为健康对照组,男15名,女15名,年龄16.4~40.6岁,平均(22.55.2)岁.所有研究对象2个月内均未使用皮质类固醇激素、免疫抑制剂、抗生素治疗.本研究经温州医学院附属第二医院伦理委员会批准,并同研究对象签署知情同意书.各组年龄、性别、病程差异均无统计学意义(P0.05).1.2主要试剂培养基RPMI1640购自Hyclone公司;灭活胎牛血清,购自晶美生物公司;人IL-17ELISA试剂盒为美国Rapidbio公司产品;淋巴细胞分离液购自由上海华精生物公司;人Th17Flow试剂盒为美国eBioscience产品.1.3治疗方式方法治疗组内服中药方剂加味五味消毒饮:金银花30g,紫花地丁、野菊花各15g,蒲公英、白花蛇舌草、海藻各30g,昆布15g,陈皮10g,青皮6g,当归、川芎各10g,1天1剂,水煎服,治疗8周.对照组予异维A胶丸(商品名:泰尔丝)10mg,口服,1天3次,疗程8周.所有患者均外用夫西地酸软膏(商品名:奥络),1天2次.1.4实验方式方法1.4.1血清样本以及细胞准备抽取研究对象外周血3mL,室温静置30min,以1500r/min离心15min,取其上清液,于-20℃保存备用,剩余样本加PBS液稀释1倍混匀后参加分离液Ficoll-Hypaque,以1500r/min离心10min,收集单个核细胞,用RPMI1640培养液重悬细胞,调整细胞浓度为2106/mL.1.4.2IL-17检测上清液用人IL-17ELISA试剂盒,以及多功能微孔板分析仪,检测出各血清吸光度,通过绘制标准曲线计算出标本中IL-17浓度.1.4.3流式细胞术检测Th17细胞按人Th17Flow试剂盒操作讲明书,参加浸透洗脱缓冲液重悬细胞,分别参加FICT标记的人CD4抗体和PE标记的人IL-17A抗体,作流式细胞术分析,用Th17细胞占外周血CD4+细胞比例评价Th17细胞水平.1.5统计学方式方法应用SPSS13.0统计软件,计量资料数据以(xs)表示,采用单因素方差分析和配对资料t检验,计数资料采用Radit分析.以P0.05为差异具有统计学意义.2结果2.1疗效标准痊愈:治疗前后皮损总数减少90%以上;显效:治疗后皮损总数减少60%~89%;好转:治疗后皮损总数减少30%~59%;无效:治疗后皮损减少30%下面或加重.2.2三组Th17细胞相关指标比拟中重度痤疮组IL-17与Th17细胞均高于健康对照组和轻度痤疮组,差异有统计学意义(P0.05).轻度痤疮组与健康对照组间差异无统计学意义(P0.05),见表1.2.3中重度痤疮患者两组疗效比拟治疗组25例中痊愈7例(28.0%),显效9例(36.0%),好转5例(20.0%),无效4例(16.0%),总有效率84.0%.对照组20例中痊愈6例(30.0%),显效7例(35.0%),好转4例(20.0%),无效3例(15.0%),总有效率85.0%.两组疗效差异无统计学意义(P0.05).2.4中重度痤疮患者Th17细胞相关指标比拟中重度痤疮患者治疗后IL-17、Th17细胞均明显下降(P0.05),见表2.2.5不良反响治疗组25例出现轻度腹泻3例,停药后异常感觉和状态消失;对照组20例出现口唇枯燥脱屑17例,血甘油三酯增高3例,谷丙转氨酶轻度增高2例,停药1个月后,异常感觉和状态消失,血液检查恢复正常.3讨论轻度痤疮病理表现为毛囊漏斗内的角化细胞潴留及毛囊漏斗部囊状扩张,炎性细胞浸润较少.中重度痤疮病理表现为毛囊漏斗上皮破裂,中性粒细胞、淋巴细胞、巨嗜细胞、异物巨细胞聚集,明显的炎症临床及病理表现.我们研究发现,寻常性痤疮患者皮损炎症程度与外周血Th17细胞和IL-17有相关性,中重度痤疮患者外周血Th17细胞和IL-17明显高于健康对照组以及轻度痤疮患者(P0.05),而轻度痤疮患者与正常对照组之间无显着差异.这些结果提示,Th17细胞可能在中重度痤疮炎症性的皮疹构成中发挥重要作用[4].加味五味消毒饮由五味消毒饮合海藻、昆布、陈皮、当归、川芎、青皮组成,具有清热解毒,凉血清肿,活血祛瘀,软坚散结成效.维甲酸类药物具有抗炎活性,抑制皮脂腺活性、减少皮脂分泌、减慢上皮细胞角化、抑制痤疮丙酸杆菌的作用.临床用于痤疮十分是中重度痤疮治疗[5].本组结果显示,加味五味消毒饮和异维A酸治疗中重度痤疮,外周血IL-17和外周血中Th17细胞占CD4+细胞的比例均下降.显示异维A酸有抑制炎症反响的作用.而加味五味消毒饮治疗后外周血Thl7细胞及其效应因子IL-17明显降低,可能与该方剂抑制炎症作用机制有关.但加味五味消毒饮对中重度痤疮的治疗机制以及下调Th17细胞及其细胞因子的机制还有待进一步研究.参考文献[1]BettelliE,KornT,KuchrooVK.Th17:thethirdmemberoftheeffectorTcelltrilogy[J].CurrOpinImmunol,2007,19(6):652-657.[2]赵辨.中国临床皮肤病学[M].南京:江苏科学技术出版社,2018:1165-1169.[3]中国卫生部.中药新药临床研究指导原则(第三辑)[S].北京:中国医药科技出版