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文档简介

酶类药物酶的分类酶类药物的提取和纯化

原料选择生物材料的预处理☆提取浓缩☆纯化结晶☆动物材料的预处理：（1）机械法：有绞碎、刨碎、匀浆、研磨、超声波、挤压等方法，有些酶用机械法处理后仍不能有效的提取，可结合其他处理法。（2）冻融：冷到-10℃左右，再缓慢溶解至室温，如此反复多次。由于细胞中冰晶的形成，及剩下液体中盐浓度的增高，能使细胞中颗粒及整个细胞破碎，使酶释放出来。（3）丙酮粉：组织经丙酮迅速脱水干燥制成丙酮粉，不仅可以减少酶的变性，同时因细胞结构成分的破碎使蛋白质与脂质结合的某些化学键打开，促使某些结酶释放到溶液中。材料的预处理

酶的浓缩（1）工业上：超滤、真空减压浓缩、薄膜浓缩、冷冻浓缩（2）实验室：除上述方法外，对少量样品可用下列方法

1.用G-15或G-25浓缩

2.用聚乙二醇浓缩酶的结晶☆特征：有序性，对称排列，周期性的重复结构

——为空间结构研究提供x-衍射样品1.酶的结晶方法

缓慢改变酶蛋白的溶解度，使其略处于过饱和状态。（1）盐析法（2）有机溶剂沉淀法（3）复合结晶法（4）透析平衡法（5）等电点法既是纯化的结果又是纯化的手段2.结晶的条件选择酶的纯度酶的浓度金属离子pH温度、时间晶种超氧化物歧化酶

（Superoxidedismutase,SOD）结构特点：金属酶Fe-SOD:

Mw38000，2个亚基，每个亚基含1个Fe，存在于中

Cu、Zn-SOD:Mw32000，2个亚基，每个亚基含1个Cu，1个

Zn，存在于中Mn-SOD:原核细胞中，Mw40000,2个亚基，每个亚基1个Mn

真核细胞中，Mw80000，4个亚基，每个亚基1个Mn真核细胞原核细胞酶的性质稳定性对热稳定：天然牛血SOD可75℃加热数分钟，对热稳定性与溶液离子强度有关对pH的稳定性：一般pH5.3~9.5较稳定，猪血SOD在

pH7.6～9较稳定金属辅基与酶活性关系Cu、Zn-SOD：Zn与分子结构有关，与催化活性无关Cu与活性有关，对酶活力是必需的

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