生化检验体液葡萄糖检验

生化检验体液葡萄糖检验第1页/共47页本章内容概要：第二节体液葡萄糖测定第一节概述2第2页/共47页本章教学要求：1、掌握血糖、糖化血红蛋白、糖化血清蛋白测定的推荐方法及临床意义，口服葡萄糖耐量试验的程序和临床应用。2、熟悉糖尿病的实验室检测项目和诊断程序3、了解血糖浓度的调节机制、糖代谢紊乱。。3第3页/共47页1、氧化供能：分解代谢提供人体75%能量；

2、人体组成成分之一：糖占人体干重的2%;

合成糖原储存在肝脏与肌肉中；形成糖蛋白和蛋白多糖（激素、酶、受体等）、糖脂（神经组织和细胞膜重要组分）；3、转变：其它糖及糖衍生物（核糖、脱氧核糖、氨基多糖）；非糖物质（脂肪、氨基酸和核酸）。

糖的生理功能（能量资源和结构材料）糖代谢紊乱

一系列代谢变化4第4页/共47页体液糖的测定项目：①血糖浓度测定②口服糖耐量试验③糖化血红蛋白试验④糖化血清白蛋白测定⑤胰岛素测定⑥C-肽测定等5第5页/共47页第一节概述血糖及正常血糖水平:血糖：指血液中的葡萄糖.正常血糖浓度：

空腹波动在3.89～6.11mmol/L（70～110mg/dl）餐后2h内应≤7.8mmol/L（≤140mg/dl）。6第6页/共47页

7第7页/共47页（一）血糖的来源、去路和调节一、血糖的来源、去路和调节3.89～6.118第8页/共47页二、血糖浓度的调节1、肝脏调节作用:

双向调控功能：从器官水平通过神经-激素的作用，使肝细胞内各种糖代谢的酶活性改变。升糖调节1：具有活性很高的葡萄糖-6-磷酸酶，可促进肝糖原水解，补充和升高血糖。升糖调节2：肝脏具有活性高且易诱导的糖异生酶类，禁食或饥饿时能将非糖物质转化为糖（占55-90%）。降糖调节：促进组织摄取葡萄糖，促进肝糖原和脂肪合成、和抑制肝糖原分解、抑制糖异生。9第9页/共47页２、激素调节作用降低血糖浓度的激素

①胰岛素②胰岛素样生长因子

升高血糖浓度的激素①胰高血糖素②肾上腺素③生长激素④皮质醇

⑤甲状腺激素10第10页/共47页

胰岛素胰岛素结构胰岛素作用于靶细胞的机制影响胰岛素生物活性效应的因素胰岛素功能11第11页/共47页

胰岛β细胞（核糖体）

前胰岛素原（100个氨基酸残基）

胰岛素原（86个氨基酸）切掉4个氨基酸残基胰岛素（51个氨基酸）

C肽（31个氨基酸）

有活性

无活性胰岛素结构:51个氨基酸残基的蛋白类激素

等摩尔12第12页/共47页胰岛素作用于靶细胞的机制13第13页/共47页胰岛素的生物活性效应取决于：1、靶细胞上胰岛素受体的绝对或相对数量2、到达靶细胞的胰岛素浓度3、胰岛素与靶细胞受体的亲和力4、胰岛素与受体结合后的细胞内改变情况胰岛素降血糖机理:

1、加快葡萄糖转运速率2、促进糖原合成3、加速糖氧化分解4、促进糖转化为脂肪5、抑制糖异生14第14页/共47页

胰岛素样生长因子IGF与胰岛素结构类似与特异性蛋白质结合活性低检测机体营养状况15第15页/共47页

胰高血糖素与胰岛素作用相反促进肝糖原的分解和糖异生抑制葡萄糖分解与肾上腺素协同作用16第16页/共47页３、神经调节作用部位

1、下丘脑2、自主神经（交感和副交感神经）

方式：

1、直接作用于肝脏；

2、调节激素的分泌而影响血糖。内脏神经迷走神经17第17页/共47页糖代谢紊乱：高血糖症与糖尿病低血糖症酮症半乳糖血症二、

糖代谢紊乱18第18页/共47页(一)高血糖症与糖尿病１、高血糖症:空腹血浆血糖（FPG）＞6.11

mmol/L（130mg/dl）生理性：包括饮食性（高糖饮食）或情感性（情绪紧张，肾上腺分泌增加）病理性：见于糖尿病；内分泌腺（甲状腺、肾上腺皮质或髓质、胰岛细胞功能亢进）；颅内压升高刺激血糖中枢；呕吐、腹泻、高热等引起的脱水。尿糖：若血糖浓度高于肾糖阈值9.0mmol/L，出现尿糖。19第19页/共47页２、糖尿病（diabetesmellitus,DM）

定义：是一种慢性、复杂的代谢紊乱性疾病，系胰岛素相对或绝对不足，或利用缺陷引起。临床特征：血糖持续升高，甚至出现糖尿。长期患有糖尿病常有脂类、蛋白质代谢紊乱以及眼、肾的微血管病变及神经病变等并发症。严重者还可出现水、电解质紊乱及酸碱平衡紊乱，表现为高脂血症，酮症酸中毒等，重者可致死亡。20第20页/共47页21第21页/共47页发病机制：1、胰腺β细胞的自身免疫性损伤2、机体对胰岛素的作用产生抵抗DM的实验室检测项目：

血糖测定、尿糖测定、OGTT、血清糖化血红蛋白和糖化血清蛋白测定、胰岛素与胰岛素抗体测定、Ｃ肽测定、胰岛素释放试验以及相关代谢产物测定。

22第22页/共47页糖尿病的诊断标准：，不主张作第三次OGTT试验。23第23页/共47页（二）低血糖症

1、概念：低血糖症

是指血糖浓度低于3.89mmol/L（葡萄糖氧化酶法）时临床出现一系列因血糖浓度过低引起的症候群。发病原因：来源＜去路①激素效应：升血糖激素缺乏，降血糖激素过剩。②肝病变：肝功严重损伤致肝糖原减少和糖异生严重障碍。③长期饥饿或剧烈运动时代谢率增加，血糖消耗过多。24第24页/共47页分类：低血糖症空腹性低血糖刺激性低血糖反应性低血糖症外源性低血糖症酒精性低血糖症半乳糖性低血糖症餐后性低血糖症功能性低血糖症Ⅱ型糖尿病或糖耐量受损伴有的低血糖症营养性低血糖25第25页/共47页（三）酮症1、概念：酮体：乙酰乙酸、β-羟丁酸及丙酮三者统称为酮体20%78%2%酮血症：酮体形成过多引起血中含量增高，称为酮血症。酮体形成过多的原因糖尿病：糖摄取不足：脂肪动员糖原贮积病：脂肪动员碱中毒：代偿26第26页/共47页2、酮体的生成：糖代谢障碍脂肪酸分解3、酮体的测定及临床意义：（不能同时检测酮体三种成分）Gerhardt’s氧化铁试验乙酰乙酸硝普纳反应丙酮测定临床意义：1、如有酮体存在，需确定酮酸中毒状态

2、酮血症的诊断对指导胰岛素治疗最有价值。27第27页/共47页（四）半乳糖血症1、概念：

半乳糖血症是机体不能转化利用半乳糖及其中间代谢产物的一种常染色体隐性遗传病，主要特征为血和尿中半乳糖增高。2、生化缺陷：酶的缺陷半乳糖半乳糖-1-磷酸葡萄糖-1-磷酸UDPGUDP-半乳糖葡萄糖-6-磷酸半乳糖激酶半乳糖-1-磷酸尿苷转移酶（最常见）UDP-半乳糖-4-差向酶临床表现：酶缺乏导致半乳糖和半乳糖-1-磷酸沉积在肝脏、肾脑、眼晶状体和红细胞中，引起相应的病变。代谢过程：28第28页/共47页第二节体液葡萄糖测定一、血糖测定测定方法无机化学法有机化学法酶法29第29页/共47页（一）无机化学法：Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的还原性（二）有机化学法：邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等Cu2+OH-Cu+Glu磷钼酸显色邻甲苯胺+Glu葡萄糖基胺希夫氏碱蓝绿色化合物缩合脱水分子重排特异性差干扰因素多（三）酶法（1）己糖激酶法（HK）（2）葡萄糖氧化酶法（GOD法）30第30页/共47页

葡萄糖＋ATP

ＨＫ葡萄糖-６-磷酸＋ADP

葡萄糖-6-磷酸＋NADP＋G-6-PD６-磷酸葡萄糖内酯+NADPH

NADPH在340nm有吸收峰，其吸光度增加与标本中的葡萄糖浓度成正比。原理：评价：本法特异性高，灵敏度高，干扰因素少，适用于自动化分析，为葡萄糖测定的参考方法，但是试剂较贵。１、己糖激酶法（ＨＫ法）

31第31页/共47页

操作简单，特异性较高，是血糖测定的首选方法．但溶血、GSH、Vc、胆红素，GSH可引起测定结果负偏差。2、葡萄糖氧化酶法(GOD)原理：

葡萄糖＋O2+H2OGOD

葡萄糖酸内酯＋Ｈ2O2

2Ｈ2O2+4-氨基安替比林+酚POD

红色醌类化合物+Ｈ2O+O2

评价32第32页/共47页二、血糖测定的临床意义（一）生理性高血糖见于情绪激动时交感神经兴奋促使肾上腺素等分泌增加，也可见于一次性食入大量糖。（二）病理性高血糖1.糖尿病血糖测定是糖尿病最简单的筛查试验糖尿病治疗效果评价血糖水平监控有利于糖尿病患者调整饮食摄入量和胰岛素注射量，对降低其长期并发症有积极作用。2.内分泌腺功能障碍

甲状腺功能、肾上腺皮质及髓质功能亢进等引起的升高血糖的激素分泌过多出现高血糖。3.颅内压增高:4.脱水引起的高血糖呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。33第33页/共47页

葡萄糖耐量试验概念适应证操作方法葡萄糖耐量曲线临床意义第三节糖耐量试验34第34页/共47页一、糖耐量和葡萄糖耐量试验（一）糖耐量

正常人由于体内有一套完善的调节血糖浓度的机制，即使一次摄入大量的葡萄糖，血糖浓度也仅暂时升高，不出现糖尿，且于2h内恢复到正常血糖水平，此即为耐糖现象。若调节功能失调，口服或静脉注射一定量的葡萄糖后，血糖急剧升高，在一定时限内不能恢复到原有水平，此种现象称为糖耐量降低。反之给予大量葡萄糖后，血糖升高不明显，或缓慢地轻度上升，称糖耐量增加。35第35页/共47页口服葡萄糖耐量试验（OGTT）静脉葡萄糖耐量试（IGTT）（二）葡萄糖耐量试验葡萄糖耐量试验是指口服或注射一定量葡萄糖后，每间隔一定时间测定血糖水平进行分析。临床常用OGTT，静脉葡萄糖耐量试验是测定糖尿病患者胰岛素分泌的反应性和能力的试验，但不适用于临床常规诊断。36第36页/共47页1、空腹血糖水平在临界值（6～7mmol/L)而又疑为糖尿病患者；2、空腹或餐后血糖浓度正常，但有发展为糖尿病可能的人群；3、以前糖耐量异常的危险人群；4、妊娠性糖尿病的诊断；5、临床上出现肾病、神经病变和视网膜病而又无法做出合理解释者；6、作为流行病学研究的手段。OGTT试验适应证：二、口服葡萄糖耐量试验37第37页/共47页

试验前三天，受试者每日食物中糖含量不应低于150g，且维持正常活动．影响试验的药物应在三天前停用，受试前应空腹10～16h.

坐位取血后5分钟内饮入250ml含75g无水葡萄糖的糖水，妊娠妇女用量为100g，儿童按1.75g/kg体重给予，不超75g。糖后每隔30分钟取血1次，共4次。必要时可延长时间，可长达服糖后６小时。于采血同时，每隔1小时留取尿液作尿糖试验。整个过程不可吸烟、和咖啡、喝茶或进食。OGGT方法：ＷHＯ标准化曲线绘制：

一般应有5次测定结果。以测定血糖的时间为横坐标（空腹时为0h），血糖浓度为纵坐标，绘制曲线。38第38页/共47页参考范围：

空腹血糖＜6.1mmol／Ｌ；服糖后30～60分钟血糖升高达峰值，一般＜10mmol／Ｌ；服糖后２小时内恢复至空腹血糖水平。同时测定上述各时间的尿糖均为阴性。临床意义：糖尿病性糖耐量糖耐量受损

空腹血糖浓度≥7.0mmol/L，服糖后30～60min血糖急剧升高，峰值超过10mmol/L，并出现尿糖；随后血糖浓度恢复缓慢，2h后仍高于空腹水平。

空腹血糖浓度＜7.0mmol/L，但2h血糖≥7.8mmol/L，＜11.1mmol/L为糖耐量减退（IGT）；空腹血糖浓度≥6.1mmol/L，但＜7.0mmol/L，2h血糖＜7.8mmol/L为空服血糖损害（IFG）。

39第39页/共47页三、妊娠期糖尿病诊断方法：

在孕24～28周内，口服50g葡萄糖后，测定1小时血糖浓度,若在7.8mmol/L以上者，则提示妊娠性糖尿病的可能性，应作OGTT：测定空腹血糖浓度，糖负荷量100g，然后每小时检测一次血糖浓度，连续3小时。诊断标准：空腹＞5.8mmol/L、1h＞10.5mmol/L、2h＞9.2mmol/L、3h＞8.0mmol/L，2个结果超过以上检测值，方可诊断为妊娠性糖尿病。40第40页/共47页四、糖尿病诊断程序7.87.87.841第41页/共47页

血清糖化血红蛋白（ＧHb)的检测*临床意义：GHb可反应测定前较长时间（6～8周）的血糖水平

1.在糖尿病门诊,常用GHb评价糖尿病患者血糖控制水平，当糖尿病控制不佳时GHb