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文档简介
五味子鲜果多酚提取鉴定及其对受损HepG2细胞保护作用的研究共3篇五味子鲜果多酚提取鉴定及其对受损HepG2细胞保护作用的研究1五味子是一种被广泛使用的传统中药,也被认为有很多的药理作用。其中五味子鲜果多酚具有抗氧化、抗炎症、抗紫外线辐射等多种作用。本文旨在对五味子鲜果多酚进行提取和鉴定,并探究其对受损HepG2细胞的保护作用。
实验采用超声波辅助提取法提取五味子鲜果多酚,并使用高效液相色谱法(HPLC)对其进行鉴定。结果表明,经过提取和鉴定后,五味子鲜果多酚中最主要的成分是山奈酚、芦丁和槲皮素等。
接下来,我们使用CCK-8法对五味子鲜果多酚的细胞毒性进行研究,发现五味子鲜果多酚在一定浓度范围内对HepG2细胞没有明显的毒性作用。接着进行了H2O2诱导损伤模型的实验,DPPH自由基清除实验和MDA含量的检测,结果表明,五味子鲜果多酚能够有效地减轻H2O2诱导的氧化损伤,并提高HepG2细胞的抗氧化能力。
同时,我们还用光学显微镜对细胞的形态进行观察,发现五味子鲜果多酚处理后的HepG2细胞形态保持完好,且细胞数量有明显的增多。进一步用透射电镜观察细胞超微结构,结果表明五味子鲜果多酚可有效降低氧化应激对细胞的损伤。
综上所述,本研究成功提取和鉴定了五味子鲜果多酚的主要成分,证明了其对受损HepG2细胞的保护作用,表明五味子鲜果多酚可能成为一种有效的抗氧化剂,有望进一步开发成为用于维护和改善肝脏健康的保健品本研究证实了五味子鲜果多酚在一定浓度范围内对HepG2细胞没有明显的毒性作用,且其能够有效地减轻H2O2诱导的氧化损伤,提高HepG2细胞的抗氧化能力。此外,五味子鲜果多酚的处理还能维持HepG2细胞形态完好的同时促进细胞增殖。因此,五味子鲜果多酚可能为一种有效的抗氧化剂,具备用于维护和改善肝脏健康的潜力五味子鲜果多酚提取鉴定及其对受损HepG2细胞保护作用的研究2五味子鲜果多酚提取鉴定及其对受损HepG2细胞保护作用的研究
摘要:本研究旨在提取五味子鲜果多酚,通过鉴定其主要成分,探讨其对受损HepG2细胞的保护作用。利用超声波辅助酸水解提取法,得到五味子鲜果多酚提取物,利用高效液相色谱法对其成分进行鉴定。研究发现,五味子鲜果多酚中主要成分为五味子酸、五味子苷和五味子醇。通过对HepG2细胞进行H2O2诱导后加入五味子鲜果多酚提取物处理,测定细胞存活率和丙二醛含量,结果显示五味子鲜果多酚提取物可以显著提高受损HepG2细胞的存活率,减少丙二醛含量。因此,五味子鲜果多酚提取物具有保护HepG2细胞的作用。
关键词:五味子鲜果;多酚;鉴定;HepG2细胞;保护作用
引言
五味子是一种常见的中药材,具有清热、祛湿、安神等功效。五味子中含有多种活性成分,在抗氧化、抗肿瘤、降脂等方面具有一定的应用价值。其中,多酚是五味子中主要的活性成分之一,具有较强的抗氧化和抗肿瘤活性。近年来,越来越多的研究表明,五味子鲜果多酚具有保护肝脏的作用,能够减轻肝脏细胞受损的程度,但其作用机制尚不清楚。本研究旨在提取五味子鲜果多酚,分析其主要成分,并探讨其对受损HepG2细胞的保护作用,以期更好地发挥五味子鲜果多酚的保健作用。
材料与方法
1.实验材料
五味子鲜果,HepG2细胞,H2O2,α-硫辛酸,MTT,丙二醛检测试剂盒。
2.提取五味子鲜果多酚
将五味子鲜果洗净,切成小块。取100g鲜果加入1L乙醇,并进行超声波辅助酸水解提取法。具体步骤为:将鲜果与相应量的0.5mol/L盐酸混合,于60摄氏度下加热2h后放置冰箱冷却,水浴加热大约10分钟,过滤得到提取液。
3.高效液相色谱法鉴定多酚成分
采用AgilentXDB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm)进行分离,流动相为甲酸-乙腈双线性梯度洗脱。检测波长为280nm,流速为0.8mL/min。
4.评估五味子鲜果多酚对受损HepG2细胞的保护作用
将HepG2细胞接种于96孔板中,每孔含1×104个细胞。待细胞生长至80%的密度后,加入H2O2进行诱导,加入含有不同浓度的五味子鲜果多酚提取物后处理,分别培养12h。然后加入MTT检测溶液,孵育4h,取出培养液,加入150μLDMSO,振荡混合后测定OD值。最后利用丙二醛检测试剂盒测定丙二醛含量。
结果与分析
1.提取五味子鲜果多酚
通过超声波辅助酸水解提取法,得到了五味子鲜果多酚提取物。提取物在紫外光谱下的典型特征是具有260和360nm波长的吸收峰,表示多酚成分已经完全提取出来。
2.高效液相色谱法鉴定多酚成分
采用高效液相色谱法对五味子鲜果多酚提取物进行分析,结果显示,其中含有大量的五味子酸、五味子苷和五味子醇等多酚成分。
3.评估保护作用
通过对不同浓度五味子鲜果多酚提取物处理受损HepG2细胞的实验发现,五味子鲜果多酚提取物可以显著提高细胞存活率,减少丙二醛含量,浓度越高,作用越显著。
结论
本研究通过提取五味子鲜果多酚和鉴定其主要成分,发现其主要成分为五味子酸、五味子苷和五味子醇等多酚成分。同时还发现五味子鲜果多酚提取物对受损HepG2细胞具有显著的保护作用,可以减轻氧化损伤引起的细胞死亡。因此,五味子鲜果综上所述,本研究阐明了五味子鲜果多酚的成分和其保护作用。这为深入研究五味子的生物活性成分、开发五味子鲜果多酚应用领域提供了理论依据。未来的研究可以进一步探讨五味子鲜果多酚的抗氧化机制及其对其他器官和疾病的保护作用,以推动其在医药保健领域的应用五味子鲜果多酚提取鉴定及其对受损HepG2细胞保护作用的研究3五味子鲜果多酚提取鉴定及其对受损HepG2细胞保护作用的研究
摘要:五味子是一种传统的中药材,在中医学中有广泛的应用。本文研究了五味子鲜果的多酚提取鉴定,并探讨了其对受损HepG2细胞的保护作用。研究结果表明,五味子鲜果中存在多种多酚类化合物,包括儿茶素、原花青素、花青素等。同时,五味子鲜果提取物能够显著提高HepG2细胞的存活率,减少受到H2O2诱导的细胞死亡。此外,五味子鲜果提取物还能够提高HepG2细胞的抗氧化能力,减少氧化应激引起的细胞受损。本研究表明,五味子鲜果中的多酚类化合物具有明显的保护作用,对于预防和治疗肝脏疾病有一定的意义。
关键词:五味子;多酚;HepG2细胞;保护作用
引言
五味子是一种传统的中药材,广泛应用于中医药学中。五味子具有滋肾益肝、润肺止咳、益精壮阳、镇静安神等多种功效,常用于治疗肝肾不足、咳嗽、遗精、失眠等病症(Liuetal.,2016)。其中,五味子中的多酚类化合物被认为是其主要有效成分之一。多酚类化合物具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂等多种生物活性,对于预防和治疗多种疾病具有潜在的疗效(Royetal.,2017)。因此,对于五味子中多酚类化合物的提取鉴定以及其生物学功能的研究具有一定的现实意义。
肝脏是人体重要的代谢器官,肝脏病是世界范围内影响人类健康的主要疾病之一。氧化应激是肝脏受损的重要机制之一,氧化应激会导致大量有害氧自由基的产生,进而引发细胞受损和生命周期的增加,最终导致肝细胞的凋亡和坏死。因此,研究如何减轻氧化应激对肝脏细胞的伤害,对于防治肝脏疾病具有重要的意义。
本研究旨在研究五味子鲜果中的多酚类成分及其对受损HepG2细胞的保护作用,为进一步的肝脏保健和治疗提供科学依据。
材料与方法
材料
五味子鲜果(Schisandrachinensis)采自河南省周口市,经初步干燥后使用。
化学试剂:H2O2,MTT,维生素C,DPPH。
HepG2细胞株,来源于中国科学院细胞生物学研究所。
方法
多酚类提取
将5g五味子鲜果粉末加入100mL乙醇中,温和搅拌30min后过滤,收集过滤液。重复此步骤,合并两次过滤液并蒸馏酒精浓缩至一定体积。使用色谱法对酒精浓缩物进行分离纯化,得到纯化的多酚提取物。
多酚类化合物鉴定
使用高效液相色谱法(HPLC)分析多酚提取物,选用C-18柱进行分离,流动相为乙腈-水-磷酸三元混合物(65:35:0.1V/V/V),检测波长为280nm。
HepG2细胞培养
HepG2细胞放于37°C,5%CO2的湿润培养箱中培养至生长至接近80%的密度,使用1mMH2O2复制氧化损伤模型,将细胞分为以下对照组和处理组:1)正常对照组;2)模型对照组;3)不同浓度的多酚提取物处理组;4)抗氧化剂对照组。
HepG2细胞存活率的检测
使用MTT法检测HepG2细胞的存活率,将细胞接种于96孔板中,不同剂量的多酚提取物处理后,酶促反应达到峰值可读取OD值。
抗氧化能力检测
使用DPPH法检测多酚提取物的抗氧化能力,将细胞接种于96孔板中,添加不同浓度的多酚提取物处理后,采取一定操作后,在560nm波长处检测OD值。
结果与讨论
多酚类化合物鉴定
使用HPLC分析五味子鲜果提取物,得到了多种多酚类化合
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