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文档简介

实验一母种培养基的制作一、本次实验的目的和要求学会母种培养基的配制方法,了解食用菌母种制作的工艺流程和制作母种的基本技能。二、实验内容或原理母种培养基配制。工艺流程:培养基配方培养基的配制分装试管理灭菌摆斜面三、需用的仪器或试剂等仪器:接种箱或超净工作台、高压灭菌锅、电炉、天平、试管、试管架、漏斗、漏斗架、橡皮管、玻璃管。试剂:、马铃薯、葡萄糖、琼脂等。四、实验步骤1.培养基配方以PDA培养基为例,马铃薯(去皮)200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml。为经强化营养或准备保藏菌种,可添加KH2PO43g、MgSO4.7H2O1.5g、VB110mg。2.培养基配制首先将马铃薯去皮、洗净、挖去芽眼、切成薄片,称取200g,放入铝锅中用1000ml清水加热煮沸,维持20min左右,煮至软而不烂为止。用双层湿沙布过滤,然后取滤液并补足蒸发损失的水分。再加入琼脂继续加热泪,待琼脂溶化后,添加葡萄糖及其它成分,搅拌均匀后准备装管。3.分装试管培养基配制后应趁热分装。装管时勿使管内外壁沾上溶液,以免浸湿棉塞,污染杂菌。装管后塞上棉塞。棉塞的大小、松紧度应适宜,以用手提棉塞、试管不脱落为准。然后每10支度试管扎成一捆,棉塞上方用牛皮纸包好,避免灭菌时被水蒸汽浸湿。4.灭菌灭菌前将水加至锅内水位标记高度。将试管放入锅内,盖上锅盖,对角旋紧锅上螺旋,并闭排气阀,开始加热,当锅内蒸汽大量排出时再继续排汽3-5min,关闭放气阀。当压力表指针指到0.15Kg/cm2时(灭菌所需压强)开始计时,继续维持该压强30min。灭菌结束持压力表指针自然回到”0”位时打开放汽阀,排出锅内剩余蒸汽后,打开锅盖。注意切忌在压力表未到”0”位时就放汽,以免试管内的培养基向上冲浸湿棉塞,5、摆斜面当培养基的温度降到60℃时,将试管斜面放在木棒上,使呈斜面,斜面的长度以占试管长度的1/2为宜。冷却后即成斜面培养基。五、教学方式以分组的形式进行实验、讨论六、考核要求掌握母种培养基的配制比例与高压灭菌方法。根据提交的实验报告、实验过程与结果,评分方式为优、良、中、及格、不及格。七、实验的报告要求要求有观察记载数据,完成实验报告与作业。果,评分方式为优、良、中、及格、不及格。七、实验的报告要求要求有观察记载数据,完成实验报告。实验三原种与栽培种制作一、本次实验的目的和要求学会原种与栽培种培养基的配制方法,掌握原种与栽培种的接种技术,了解食用菌原种与栽培种制作的工艺流程和制作的基本技能。二、实验内容或原理1.原种与栽培种培养基配制工艺流程:培养基配料→装瓶(或装袋)→灭菌→冷却→接种2.掌握原种与栽培种的接种操作技术接种箱消毒→器械消毒→无菌接种→菌丝培养三、需用的仪器或试剂等仪器:接种箱、高压灭菌锅、750毫升广口瓶、酒精灯、接种勾等。试剂:75%酒精、气雾消毒剂、棉籽壳、木屑、麸皮、石膏粉、棉花等。四、实验步骤1.配方本实验以棉籽壳为主料培养基为例。配方为:棉籽壳78%,麦麸或米糠20%,过磷酸钙1%,蔗糖1%。2.拌料先根据要做原种的数量,算出各种原料的用量,然后称量、混合,加水拌料。混给予时,先将棉籽壳和玫麸混合在一起,过磷酸钙和糖混溶在拌料用的水中。拌料时,边加水边搅拌,边测试含水量。3.含水量的测定拌好料后,用手抓一把培养料,捏在手中紧握,手指缝中有水印但以水不往下滴为适,此时含水量为62%-64%。4.装瓶将拌好的培养料装入原种瓶或塑料袋中央,边装边压实(但不得过紧),一直装到瓶肩处为宜。5.擦瓶将瓶口和瓶外粘的培养料擦掉,以免接种后污染杂菌。6.封口用棉塞塞住瓶口或用透气膜包住瓶口,再包一层防潮纸(或牛皮纸),用线绳将瓶口扎好,准备灭菌。7、灭菌灭菌方法同母种的灭菌方法,压强为1.4-1.5Kg/cm2,1.5-2.0h8、接种挑取母种培养基一小块,置于原种或栽培种培养基中央孔边,随即按原样封口。9、菌丝培养接种后的原种,置于25℃的培养室培养。3-5天后菌丝即可恢复生长。5-7天菌丝开始伸入培养基内。当菌丝长满瓶后,即可直接分移栽培种,栽培种菌丝长满面瓶后,需要养菌1-2周,以增加菌丝量及增强菌丝活力后,再用于生产。10.观察记载观察原种菌丝的表面形态特征。五、教学方式以分组的形式进行实验、讨论六、考核要求掌握原种与栽培种培养基的料水比例与高压、常压蒸汽灭菌方法,要求原种与栽培种成功率在90%以上。根据提交的实验报告、实验过程与结果,评分方式为优、良、中、及格、不及格。七、实验的报告要求要求有观察记载数据,完成实验报告。实验四食用菌栽培技术一、本次实验的目的和要求学会平菇或金针菇栽培袋的的制作方法,掌握其出菇管理技术。二、实验内容或原理1.平菇或金针菇栽培袋制作工艺流程:栽培原料配制→装袋→灭菌→冷却→搬入接种室→接种室消毒→接种→适温培养菌丝2、出菇管理:控温→调温→通风→采收→补水三、需用的仪器或试剂等仪器与设备:接种箱、高压灭菌锅或常压灭菌灶、接种铲、酒精灯。试剂:75%酒精、气雾消毒剂、棉籽壳、木屑、麸皮、石膏粉等。四、实验步骤1.配方本实验以棉籽壳为主料培养基为例。配方为:棉籽壳78%,麦麸或米糠20%,过磷酸钙1%,蔗糖1%。2.拌料先根据要做原种的数量,算出各种原料的用量,然后称量、混合,加水拌料。混给予时,先将棉籽壳和玫麸混合在一起,过磷酸钙和糖混溶在拌料用的水中。拌料时,边加水边搅拌,边测试含水量。3.含水量的测定拌好料后,用手抓一把培养料,捏在手中紧握,手指缝中有水印但以水不往下滴为适,此时含水量为62%-64%。4.装袋将拌好的培养料装入塑料袋中央,边装边压实(但不得过紧),一直装到2/3长为宜。5.套环用双套环或纤维绳扎实袋口,准备灭菌。6.灭菌灭菌方法同原种栽培种的灭菌方法。7..接种挑取栽培种培养基一小块,置于栽培袋中,随即按原样封口。8.菌丝培养接种后的栽培袋,置于培养室培养。3-5天后菌丝即可恢复生长。5-7天菌丝开始伸入培养基内。当菌丝长满袋后,移入菇房。9.出菇管理控温、调温、通风、采收、补水五、教学方式以分组的形式进行实验、讨论六、考核要求掌握平菇或金针菇栽培袋的制作技术,要求制袋成功率在95%以上。根据提交的实验报告、实验过程与结果,评分方式为优、良、中、及格、不及格。六、实验的报告要求要求有观察记载数据,完成实验报告。实验五食用菌栽培与加工现场参观一、本次实验的目的和要求通过参观食用菌栽培与加工现场,增强食用菌规模化生产或工厂化生产与食用菌加工的感性认识。二、实验内容或原理参观金针菇、平菇、香菇等食用菌大型菇场或加工厂。三、需要的实验材料无四、实验步骤参观→收集资料→总结、归类→撰写实验报告→课堂讨论实验六食用菌电化教学一、目的要求通过观看食用菌生长发育和栽培新技术的录像片,让学生观看食用菌菌丝体及子实体生长

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