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文档简介
本文格式为Word版,下载可任意编辑——尿素氮(BUN)试剂盒说明书
货号:QS1812规格:50管/48样
尿素氮(BUN)试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预计定。
测定意义:
尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物,在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。
测定原理:
在碱性条件下,尿酶水解尿素产生氨,氨与次氯酸反应生成氯胺,再与酚衍生物作用生成绿色吲哚酚,在630nm处有特征吸收峰。
自备试验用品及仪器
天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。试剂组成和配制:
标准品:液体1mL×1支,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,4℃避光保存,临用前加10mL蒸馏水充分溶解。试剂二:液体20mL×1瓶,4℃避光保存。试剂三:液体20mL×1瓶,4℃避光保存。
样品处理:
1.组织:依照质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,参与1mL蒸
馏水)参与蒸馏水,匀浆后于25℃,10000g离心10min,取上清待测。2.细胞:依照细胞数量(104个):蒸馏水体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细
胞参与1mL蒸馏水),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。3.血清或其它液体:直接检测。测定操作:样品(μL)标准品(μL)H2O(μL)试剂一(μL)空白管标准管测定管100100100200200200充分混匀,于37℃反应10min试剂二(μL)350350350试剂三(μL)350350350充分混匀,于37℃显色10min,于1mL玻璃比色皿,双蒸水调零,测定630nm处吸光值,记为A空白管、A标准管和A测定管注意:空白管和标准管只需测定一次。计算公式:
1.按样本质量计算
第1页,共2页
尿素氮含量(mg/g鲜重)=
A测定管-A空白管×C标准品÷W
A标准管-A空白管A测定管-A空白管=0.005×÷W
A标准管-A空白管A测定管-A空白管×C标准品÷细胞数量
A标准管-A空白管A测定管-A空白管=0.005×÷细胞数量
A标准管-A空白管2.按细胞数量计算尿素氮含量(mg/104cell)=
3.按液体体积计算
A测定管-A空白管×C标准品
A标准管-A空白管A测定管-A空白管=5×
A标准管-A空白管C标准品:标准品浓度,5mg/L;W:样品质量,g
尿素氮含量(mg/L)=
本卷须知:
1.
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