A基因工程复习题

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一、

单项选择题（每题1分，共40题，共40分）

1、基因工程诞生于年。A、1972B、1973C、1971D、1978

2、基因工程操作的三大基本元件是

I基因（供体）II受体III载体IV抗体V配体Ａ、I+II+IIIＢ、I+III+IVＣ、II+III+IVＤ、II+IV+V

3、第一个由重组大肠杆菌生产上市的人类蛋白（多肽）药物是A、生长激素（Growthhormone）B、胰岛素（Insulin）

C、干扰素（Interferon）D、白细胞间溶菌素（Interleukin）4、以下哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大

A、质粒B、黏粒C、酵母人工染色体D、λ噬菌体5、在含有烈性噬菌体的平板上涂布细菌，可在平板上形成菌落的细菌属于A、噬菌体抗性的B、噬菌体敏感的C、野生型的D、ABC都不对6、PCR反应中Taq酶常没有错配碱基纠错功能，由于它没有A、5’－3’聚合酶活性B、5’－3’外切酶活性C、3’－5’外切酶活性D、3’－5’聚合酶活性7、II型限制性核酸内切酶的切割位点一般是

A、识别序列内B、识别序列1000bp以外C、识别位点下游24－26bp处D、DNA分子任一位点

8、同一种限制性核酸内切酶分别切割目的基因DNA与载体DNA时，酶切片段不能相互连接的是

A、目的基因与目的基因之间B、载体DNA与载体DNA之间C、目的基因与载体DNA之间D、目的基因与mRNA之间9、常用的连接外源性DNA和载体DNA的酶是

A、DNA聚合酶ⅠB、T4DNA连接酶C、RNA聚合酶D、Taq酶10、T4DNA连接酶能催化以下哪种分子相邻的5'端磷酸基团与3'端羟基末端之间形成磷酸二酯键？

A、双链DNAB、单链DNAC、mRNAD、rRNA11、以mRNA为模板合成cDNA时，所用的工具酶是A、DNA聚合酶IB、DNA连接酶

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C、逆转录酶D、核酸酶12、pBR322是一种什么样的载体？A、粘粒B、质粒

C、噬菌体D、人工微小染色体13、II类限制性核酸内切酶

A、有内切酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列B、仅有内切酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供C、有外切酶和甲基化酶活性

D、仅有外切酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供14、黏粒（cosmid）质粒中，cos位点的功能是Ａ、复制起点Ｂ、限制酶切位点Ｃ、参与包装进入病毒外壳Ｄ、选择标记15、限制性核酸内切酶的星号活性是指

A、在十分规条件下，识别和切割序列均发生变化的活性B、活性大大提高C、切割速度大大加快识别序列和原来的完全不同

16、以下转化方法中，在大肠杆菌转化不常用的是A、热激法B、CaCl2溶液法C、电击法D、原生质体法

17、若某质粒带有lacZ基因，那么与之相匹配的筛选方法是在培养基中参与A、葡萄糖B、蔗糖

C、5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷（X-gal）D、乳糖

18、蓝白斑筛选方法中，重组子在平板上显现出的颜色为A、蓝色B、白色C、黑色D、红色

19、BamHI、XbaI、BglII的识别位点分别是G↓GATCC、T↓CTAGA、A↓GATCT，哪些酶切结果可以产生互补的末端

A、均可互补B、仅BamHI和XbaI可以C、仅BamHI和BglII可以D、仅BglII和XbaI可以20、关于穿梭质粒，下面哪一种说法最正确？A、在不同的宿主中具有不同的复制机制

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B、在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点C、在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶D、在不同的宿主细胞中使用不同的复制速率

21、mRNA分子中可用于PolyT亲和层析的结构是A、ployA尾巴B、5’端帽子结构C、发夹结构D、单链结构22、用Sanger双脱氧法进行DNA测序时，凝胶上读出的序列是A、模板链的B、模板链的互补链的C、mRNA的D、cDNA的23、识别10碱基序列的限制性核酸内切酶大约每隔个碱基进行一个切割A、410B、104C、210D、102

24、PCR法扩增DNA的过程主要可以概括为三个步骤，以下哪个步骤不属于PCR扩增DNA的过程

A、变性B、退火C、延伸D、链同源交换

25、PCR法扩增目的DNA片段时，常需要在中引入核酸内切酶识别位点，以便克隆目的DNA：

A、引物B、模板C、dNTPD、Taq酶26、关于逆转录病毒，以下哪个说法是错误的A、是一种整合型的单链RNA病毒

B、在受体细胞中不能持久性地表达外源蛋白C、只感染分裂细胞

D、感染后，外源基因以低拷贝形式特异性地整合到受体细胞的染色体上27、大肠杆菌系统表达载体中负责基因转录的元件是A、密码子B、复制子

C、启动子D、核糖体结合位点（RBS）28、下述常用启动子中，属于温控型的启动子是

A、PR/PL启动子B、Tac启动子C、T7启动子D、Trp启动子

29、采用绿色荧光蛋白（GFP）报告基因检测外源基因在哺乳动物细胞中表达时，载体上需增加的一个元件是

Ａ、启动子Ｂ、复制起始区Ｃ、加强子Ｄ、核糖体进入位点（IRES）30、在抗生素生产中具有重要意义的原核基因工程系统是A、芽孢杆菌系统B、梭状杆菌系统C、棒状杆菌系统D、链霉菌系统31、大肠杆菌系统重组质粒的不稳定性表现在

IDNA片段缺失或重排II外源基因整合入受体细胞染色体DNA上III重组质粒丢失

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A、IB、I+IIC、I+IIID、I+II+III

32、大肠杆菌工程菌传代过程中重组质粒“逃逸〞的主要原因是A、质粒分派不均B、质粒整合到宿主菌基因组C、质粒渗漏D、质粒被宿主菌DNA酶降解

33、如若对某种工业用酶的某个特定氨基酸残基进行突变以提高其热稳定性，最为简单、直接的操作策略是

A、PCR引物突变法B、易错PCR法C、局部随机掺入法D、紫外诱变法

34、对代谢途径中关键酶的基因进行基因操作，以提高特定代谢产物产量的技术属于A、P元件的转座能力只发生在生殖细胞中B、P元件的66kD蛋白质具有转座酶活性C、P型雌果蝇与P型雄果蝇交配产生的子代不育

D、P元件的87kD蛋白质是P元件转座活性的阻碍物36、下面哪个不是杆状病毒作为载体的特性A、病毒基因组较大,可以插入相当大的外源DNA片段

B、在多角体蛋白基因启动子（polh-P）介导下，外源基因能获得高效表达C、病毒对脊椎动物细胞有致病性

D、表达产物的修饰加工系统接近于哺乳动物

37、基因治疗的载体采用以下哪种载体比较适合？A、逆转录病毒B、Ti质粒C、噬菌体D、质粒pBR32238、以下哪点不是SV40DNA载体的特性A、基因表达好，外源基因能高效表达

B、基因重排高，病毒基因组和重组分子常发生重排和缺失现象C、宿主范围窄，只能转染猴细胞D、装载量较大

39、不属于CHO表达系统优点的是A、具有确凿的翻译后修饰功能B、具有产物胞外分泌功能

C、很少分泌自身的内源蛋白,利于外源蛋白的后分开D、大规模培养的成本低

】

40、重组构建的Ti质粒中能插入到植物基因组中的DNA区段是A、复制原点区B、毒素蛋白区C、T-DNA区D、冠婴碱代谢区

二、名词解释（每题3分，共5题,共15分）41、穿梭载体42、多克隆位点：43、质粒宏观逃逸率44、动物生物反应器45、T-DNA

三、简答题（每题10分，共3题,共30分）

46、简要说明大肠杆菌表达系统包涵体形成的原因及包涵体形式表达的优点与缺点

47、下图为毕赤酵母（Pichiapastoris）表达系统模式表达载体，试述该表达载体主要元件（S、TT、HIS4、SnaB1-Not1、Kanamycin、pBR322、Ampicillin）的名称，并指出分别采用何种限制内切酶对该载体进行线性化，以实现目的基因与酵母染色体的同源插入和同源置换。

48、目的基因导入