临床微生物课件寇晓霞-葡萄球菌

第七章：球菌

寇晓霞

kouxiaoxia163@163.com

广州医科大学金域检验学院2♦球菌（coccus）：

指个体形状呈球形或椭圆形的一大类细菌，临床上通常引起机体化脓性炎症，故又称化脓性球菌（pyogeniccoccus）

球菌

重点掌握内容1、临床常见化脓性球菌的种类，金葡菌的主要鉴定要点有哪些?2、金葡菌的主要致病物质和所致的疾病有哪些，什么是SPA?3、葡萄球菌的生物学特性和主要鉴定特征CNS致病条件和所致疾病主要包括哪些?4、什么是MRSA?4葡萄球菌属(Staphylococcus)链球菌属(Streptococcus)肠球菌属(Enterococcus)奈瑟菌属(Neisseria)革兰阳性球菌革兰阴性球菌常见球菌莫拉菌属(Moraxcella)第一节葡萄球菌属（Staphylococcus）

葡萄球菌属是一大类镜下多呈葡萄串样成堆不规则排列的革兰氏染色阳性球菌

概念海南岛，某部官兵准备在端午节作一次实弹演习。

为鼓舞士气，过好节日，炊事员在端午节前夜将面和好，盖上笼布。第二天早晨做成糖糕，上笼蒸了30min。官兵们吃完蒸熟的糖糕，列队出发，到靶场训练。

二个小时后，吃过糖糕的士兵出现呕吐，继之腹痛、腹泻，训练不得不终止。

病例分析●

化学性食物中毒●

生物性食物中毒●

细菌性食物中毒食物中毒

病例分析

病例分析1、神经型食物中毒（肉毒毒素）

临床表现以神经系统症状，如眼肌及咽肌瘫痪为主要特征。

潜伏期短，以急性胃肠炎为主要表现。常见致病菌有：沙门菌、副溶血弧菌、大肠埃希菌、蜡样芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌等。2、胃肠型食物中毒

病例分析（1）最有可能由什么细菌引起的食物中毒？为什么？（2）如何证实你的推测？（3）从此次事件中应吸取哪些教训？

问题

分类有39个种21个亚种引起人类疾病的3.腐生葡萄球菌（S.saprophyticus）1.金黄色葡萄球菌（S.aureus）2.表皮葡萄球菌（S.epidermidis）4.头状葡萄球菌（S.capitis）5.人葡萄球菌（S.hominis）

分类有39个种21个亚种凝固酶

凝固酶阳性菌株(coagulasepositivestaphylococcus)凝固酶阴性菌株(CNS)coagulasenegativestaphylococcus)

各种化脓性感染

食物中毒皮肤烫伤综合征毒性休克综合征

葡萄球菌引起的疾病凝固酶阳性菌：

以金葡菌为代表医院内感染的主要病原菌泌尿系感染细菌性心内膜炎菌血症术后及植入医用器械引起的感染

葡萄球菌引起的疾病凝固酶阴性菌：

以表皮葡萄球菌为代表

医学特性-致病物质凝固酶阳性菌凝固酶阴性菌各种侵袭性酶类多种毒素血浆凝固酶葡萄球菌溶素细菌胞壁外粘质耐热核酸酶肠毒素溶血素透明质酸酶毒性休克综合征毒素杀白细胞毒素表皮剥脱性毒素金黄色葡萄球菌表皮、腐生、人、头状等30余种鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标1）凝固酶(coagulase)：使血浆发生凝固。●结合型和游离型

●抵抗吞噬细胞吞噬●保护细菌不受血清中杀菌物质的破坏●易于局限化●易形成血栓1、主要致病物质—凝固酶

医学特性-致病性

金黄色葡萄球菌主要引起皮肤粘膜、多种组织器官的化脓性炎症（脓肿），是最常见的化脓性球菌。毛囊炎疖痈

医学特性-致病性

内脏器官感染：气管炎、肺炎、血源性肺脓肿、脓胸、中耳炎、脑膜炎等。蜂窝组织炎伤口化脓败血症：新生儿败血症最为常见

医学特性-致病性2、主要致病物质—表皮剥脱毒素●弥漫性红斑和水泡●表皮大片脱落●引起烫伤样皮肤综合征●多见于新生儿、幼儿和免

疫力低下的成人。●噬菌体Ⅱ型金葡菌产生。

医学特性-致病性治疗后治疗前金葡菌性烫伤样皮肤综合症

医学特性-致病性3、主要致病物质—肠毒素●

耐热：100℃30min不被破坏●抵抗胃和肠道内蛋白酶的水解●刺激呕吐中枢，引起以呕吐为主的食物中毒●产生条件：含淀粉及水份较多的食品，

温度在20℃以上，生长繁殖8～10h后

医学特性-致病性●

细胞毒素—破坏白细胞●攻击中性粒细胞和巨噬细胞●抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌侵袭力

医学特性-致病性4、主要致病物质—杀白细胞素●系噬菌体Ⅰ群金黄色葡萄球菌产生●可引起发热，增加对内毒素的敏感性●增强毛细血管通透性，致微循环紊乱而休克。●可引起多个器官系统的功能紊乱或毒性休克综合征（TSS）

医学特性-致病性5、主要致病物质—毒性休克综合毒素Ⅰ●

致病性葡萄球菌产生●有α/β/γ/δ/ε五种●α溶素：致病，外毒素，抗原性好，脱毒可制成类毒素●损伤细胞膜：RBC，WBC,肝细胞，皮肤细胞等

医学特性-致病性6、主要致病物质—葡萄球菌溶血素

生物学特性生物学特性染色性：G+形态：球菌排列：呈葡萄串状特殊结构：无鞭毛，无芽胞1、形态与染色

生物学特性营养需求：营养要求不高（基础培养基）气体环境：需氧或兼性厌氧最适温度：35℃最适pH：7.4耐盐性：多数菌株耐高盐2、培养特性

生物学特性菌落：圆形，光滑，不透明色素：脂溶性色素（金黄色、白色、柠檬色）溶血环：大多具有致病性

金葡菌一般产生完全透明β溶血环2、培养特性29金葡菌透明溶血环

生物学特性3、生化反应多数葡萄球菌能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖产酸不产气致病性菌株能分解甘露醇耐高盐（10%--15%）触酶阳性（与链球菌区分标准）31金葡菌在高盐甘露醇平板菌落32(1)葡萄球菌A蛋白（SPA）

存在于细胞壁的蛋白质，完全抗原。

(2)荚膜多糖：

有利于细菌粘附

SPAcapsuleteichoicacidpeptidoglycan4、抗原结构(3)多糖抗原（磷壁酸）

生物学特性

生物学特性4、抗原结构1）葡萄球菌A蛋白（SPA）

化学成分：蛋白质

存在部位：细胞壁（90%的金葡菌表面）

完全抗原，具有属特异性

免疫学作用：与人及多种哺乳动物血清中的lgG的Fc段非特异结合，IgG的Fab段仍可与相应抗原结合（体外）

生物学特性

体内作用SPA与IgG结合后所形成的复合物具有抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物活性。SPAIgGFcreceptorPHAGOCYTEBACTERIUM

生物学特性

体外作用用于多种微生物抗原检测应用于免疫球蛋白制备和分析应用于免疫细胞化学

生物学特性4、抗原结构2）多糖抗原（磷壁酸）具有群特异性存在细胞壁3）荚膜多糖（多数金葡菌在体内可形成）

抗吞噬

利于细菌黏附

生物学特性为无芽胞菌中抵抗力最强者

1）耐热：加热60℃1h或80℃30min才可杀死

2）耐干燥：2-3个月

3）耐盐：10-15%NaCl培养基中可生长

4）对碱性染料敏感（龙胆紫）

5）耐药性强：尤其对青霉素，MRSA5、抵抗力

回顾病例

海南岛，某部官兵准备在端午节作一次实弹演习。

为鼓舞士气，过好节日，炊事员在端午节前夜就忙碌开了，先和面，然后做成糖糕，盖上笼布，第二天早晨将糖糕上笼蒸了30min。官兵们吃完蒸熟的糖糕，就列队出发，到靶场上训练。

二个小时过去了，突然，一个士兵开始出现呕吐，继之腹痛、腹泻，其他人也陆续出现同样症状，训练不得不终止。小猫试验标本脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等分离培养血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶直接涂片镜检G+葡萄球菌生长现象色素，溶血，生化反应肠毒素检查药敏实验

葡萄球菌检验程序

葡萄球菌检验程序脓汁、分泌物、尿、痰直接涂片血平板脑脊液、血粪便、呕吐物肉汤增菌高盐甘露醇革兰氏染色镜检初步报告可疑菌落药敏试验涂片、G+C,触酶（+）耐热核酸酶生化鉴定血浆凝固酶实验

金黄色葡萄球菌鉴定主要试验分离培养和鉴定●镜下形态●金黄色色素●

β溶血●凝固酶(结合型，游离型）●甘露醇发酵●耐热核酸酶●触酶试验●乳胶凝集试验42金葡萄DNA酶试验（+）葡萄球菌肠毒素检查—小猫实验

葡萄球菌检验44

触酶葡萄糖发酵动力对杆菌肽耐药对呋喃唑酮耐药

试验试验0.04U纸片100ug纸片葡萄球菌属++

-+-微球菌属+---+口腔球菌属V+--V游动球菌属+-+未定-触酶阳性革兰阳性球菌各属的主要鉴别点45葡萄球菌属内各菌种鉴定方法

三种葡萄球菌鉴别的主要性状菌落色素金黄色

白色白色或柠檬色

分解甘露醇

＋

－

－

血浆凝固酶＋

－

－

耐热核酸酶＋

－

－溶血性＋－

－SPA

＋－

－

致病性强

弱或无无

性状金葡菌表葡菌腐生葡萄球菌

生物学特性47抗生素的选择：A组（常规首选药物）：阿奇霉素、克林霉素、苯唑西林、青霉素、头孢西丁、复方磺胺甲噁唑B组（临床使用主要药物）：头孢洛林、多西环素、米诺环素、四环素、万古霉素、利福平C组（对A、B组耐受、过敏或无反应者）：环丙沙星、庆大霉素、氯霉素U组（尿道中分离的细菌）：诺氟沙星、呋喃妥因葡萄球菌抗生素敏感试验：2023/4/348何为MRS?？2023/4/349MRS：即对甲氧西林或苯唑西林或头孢西丁耐药的葡萄球菌。包括：MRSA（methicillinresistantstaphylococci)MRCNS(methcillinresistantcoagulasenegativestaphylococci)2023/4/350

特点：MRS对所有β-内酰胺类抗菌药物耐药，常表现为多重耐药。51

耐药机制：细菌携带ＭecA基因细菌细胞膜产生与β-内酰胺类抗生素亲合力低的PBP2a细菌对所有的β-内酰胺类抗生素耐药（青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类、单环β-内酰氨类抗素等）52防

注意消毒隔离注意个人卫生

防止医源性感染

防止耐药性产生治

抗菌药物药敏试验自身菌苗疗法

防治原则3、MRSA已成为医院感染最常见的致病菌，应根据药敏试验结果选择用药。1、皮肤有化脓性感染者，尤其是手部感染，未治愈前不宜从事食品制作或饮食服务行业。2、医务人员鼻咽部带菌率高达70%以上，防止医院感染。

防治原则