UPLC-QTOFMS在相关研究方向的应用课件

UPLC-QTOFMS在

相关研究方向的应用

报告人：印敏安捷伦1260液相色谱-G6530三级四极杆飞行时间质谱联用仪（UPLC-QTOF）

前言液相色谱用户现在又有了新的需求；首先是改进生产力的需求，因为大量的样品需要在很短的时间内完成，例如代谢组学分析；其次是在生化样品及天然产物样品的分析中，样品的复杂性对分离能力提出了更高的要求；第三是在与MS及MS/MS等检测技术联用时，对连接的质量提出了更高的要求。简而言之，我们需要“更快地得到更好的结果”

UPLC色谱柱粒度1.7μm，传统5μm粒度UPLC色谱柱长50mm，传统150-250mmUPLC最佳流量0.2-0.5ml/min，传统0.8-1ml/min与传统的高效液相色谱（HPLC）相比，UPLC具有以下优势：1.高分离度（ultraresolution）2.高速度（ultraspeed）3.灵敏度（sensitivity）UPLC的速度、灵敏度及分离度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍

使用更少的样品（更适合含量低的样品，如药物代谢，激素等）检测时间短（更适合易降解的样品,如农药残留）消耗更少的溶剂分离效果更好（更适合复杂体系）新的自动进样器适合微量多孔板（方便蛋白多肽分析）安捷伦1260UPLC的优势质谱的应用色谱-质谱联用仪已经成为有机化合物常规检测中的必备工具，广泛应用于环保领域的有机污染物检测药物研究生产质控的进出口环节法庭科学中对燃烧爆炸现场调查，残留物检验石油化工食品安全(添加剂、塑化剂、农药、抗生素）竞技体育中兴奋剂检测Agilent6500系列精确质量四极杆-飞行时间串联质谱(Q-TOF)系统提供了您所需要的轮廓谱分析、鉴定、表征，对定量低分子量化合物和生物分子更具信心。Q-TOF系统尤其擅长MS和MS/MS分析，对蛋白质、代谢物、杂质检测），不用牺牲图谱采集速率而获得高分辨率。飞行时间质谱技术（TOF-MS）是一种新型质谱技术,具有质量范围宽、分辨率和质量测量精度较高、灵敏度高、分析速度快的特点

（1）气化的离子，在电场的作用下经过传输毛细管（同时隔离外部常压与质谱内部高真空），进入skimmer，再到八极杆透镜（离子光学组件，聚焦作用，进一步去除溶剂和中性分子）。（2）然后到四级杆，质量过滤器，选择某些离子通过或全部通过。离子在碰撞池裂解，六级杆捕获碎片。随机运动离子经过beamshaper，再用pulsar形成脉冲离子流。（因为TOF是脉冲型的，而电喷雾的离子流是连续的，所以要给一个脉冲电压）（3）脉冲离子在飞行管内纵向飞行，经反射后到达多通道板检测器。板上，不同的位置接收不同m/z的离子（相同的电势能转化为动能，zV=1/2mv2，质量越大，速度越慢,强度与离子的浓度有关)。举例1，未知化合物的结构鉴定高分辨质谱给出精确分子量（小数点后4位）根据分子量自动计算分子式从数据库中搜索化合物名称和结构

举例2，中药指纹图谱中药复杂体系，多组分研究皂苷等类型无紫外吸收活性物质检测MS检测器灵敏度更高无标准品时，各组分的结构鉴定应用于药材的鉴别，中药提取物和有效部位质量控制，中药复方的质量控制等举例3，药物代谢研究由于血液样品试样提供量少，基质复杂，在此混合物中分析某种微量成分(通常为(g/mL或ng/mL水平)并加以鉴别，常常是对分析化学家的挑战样品药物代谢产物复杂人参皂苷的代谢物研究

举例5，植物生理中蛋白组学的研究

病原菌胁迫的植物蛋白质组学研究

Chen等进行了水稻悬浮细胞表达抗病基因Xa21质膜蛋白质组分析，以鉴定参与抗水稻白叶枯病(X.oryzaepv.Oryzae)早期防御反应的质膜蛋白成分。质谱鉴定了11个预测在植物防御中起作用的蛋白质，有9个推定的质膜相关蛋白质，H+-ATPase、蛋白质磷酸化酶、过敏反应诱导蛋白(OsHIR1)、prohibitin(OsPHB2)、锌指蛋白(zincfinger)和C2结构域蛋白、USP及热震惊蛋白。

液相色谱-串联质谱分析盐胁迫下植物激素的含量变化

举例7，植物检疫的应用轮枝菌是一类分布广,寄主范围宽,形态变异大,对作物产量可造成巨大损失的一类真菌建立了轮枝菌6个种19个菌株的TOFMS检测的蛋白指纹图谱数据库据此,成功地实施了对轮枝菌的TOFMS检测。该方法具有简便、快速(仅仅几分钟)、高通量、高灵敏等优点在植物检疫领域将具有很好的实用价值和十分诱人的发展前景。

举例10,花色素的测定花色素结构多样，易聚合，结构易受环境影响发生变化LC-MS方法是花色素定性和定量分析的主要手段

山东大学药学院季梅等，用LC-MS方法,检测大泽山玫瑰香红葡萄皮中主要花色苷有15种。山东农业大学食品科学与工程学院李伟等利用LC-MS方法从黒粒小麦麸皮中分离鉴定出9种不同的花色苷类化合物。徐州工程学院食品工程学院王卫东等，利用LC-MS方法从黑莓中分离鉴定出四种花色苷。质谱

应用质谱可以投稿的SCI期刊0.485Spectroscopy

0.604JournalofAnalyticalChemistry

1.340EuropeanJournalofMassSpectrometry

1.526AnalyticalSciences

2.061GeostandardsandGeoanalyticalResearch

2.117InternationalJournalofMassSpectrometry

2.289PureandAppliedChemistry

2.695RapidCommunicationsinMassSpectrometry

2.719Spectrochimica

ActaPartB-AtomicSpectroscopy3.272Analyst

3.290Talanta

3.391JournaloftheAmericanSocietyforMassSpectrometry

3.411JournalofMassSpectrometry

3.435JournalofAnalyticalAtomicSpectrometry

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Chimica

Acta

5.214AnalyticalChemistry

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10.623MassSpectrometryReviews

测试成本1、试剂费和处理样品耗材2、仪器耗材3、电费4、其他收费标准（1）直接进样高分辨扫描分子量：对内150元/进样，对外400元/进样。二级质谱各离子模式下每进样加收50元。（2）液质联用分析：运行时间20min以内，对内300元，对