医学微生物学实验

医学微生物学实验第1页/共32页1、细菌的人工培养（讲授）2、细菌的培养方法：

固体培养基接种法（自做）；半固体、液体培养基接种法（示教）3、葡萄球菌、链球菌培养及生化（示教）4、细菌的形态观察自阅片：甲型链球菌、结核杆菌示教片：淋球菌、肉毒杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌实验内容

牛牛文库文档分享第2页/共32页第四节细菌的人工培养p31一、培养基（culturemedium）：是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。

牛牛文库文档分享第3页/共32页常用培养基的种类

按营养组成和用途分厌氧培养基基础培养基增菌培养基选择培养基鉴别培养基

牛牛文库文档分享第4页/共32页二、细菌在培养基中的生长情况

据物理状态分1、液体培养基：均匀混浊、沉淀生长、表面生长（菌膜）；多用于增菌均匀混浊对照沉淀生长

牛牛文库文档分享第5页/共32页2、固体培养基：

含1.5%琼脂

用于分离培养菌落：单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细菌集团。纯培养：挑取一个菌落，移种到另一培养基中，生长出来的细菌均为纯种，称为纯培养。菌落特征－大小、形状、颜色、气味、透明度、光滑或粗糙、湿润或干燥、隆起或扁平、边缘整齐与否、是否溶血等→有助于细菌鉴定

牛牛文库文档分享第6页/共32页菌落（S型）菌苔菌落（R型）光滑型(S型)粗造型(R型)粘液型(M型)

牛牛文库文档分享第7页/共32页3、半固体培养基：含0.3%~0.5%琼脂

鞭毛菌—混浊生长（沿穿刺线呈云雾状/羽毛状）

无鞭毛菌—沿穿刺线呈线状生长用于检测细菌的动力和保存菌种

牛牛文库文档分享第8页/共32页斜面划线示意图4、斜面培养基接种法应用：短期保存菌种

牛牛文库文档分享第9页/共32页三、人工培养细菌的用途在医学中的应用

1.感染性疾病的病原学诊断：明确病因，指导用药

2.细菌学的研究：细菌遗传、变异、耐药性

3.生物制品的制备：疫苗、类毒素、抗毒素在工农业生产中的应用

（抗生素、维生素、酶制剂等）

在基因工程中的应用（

基因工程菌→乙肝疫苗）进入实验内容讲授

牛牛文库文档分享第10页/共32页1、固体培养基(平板)接种法分区划线法连续划线法

牛牛文库文档分享第11页/共32页第一区划线灭菌接种环第二区划线灭菌接种环第三区划线灭菌接种环灭菌接种环，取菌准备分区划线法原划线标本：混合菌液分组：1人一个固体平板

牛牛文库文档分享第12页/共32页连续划线法

牛牛文库文档分享第13页/共32页菌落示意图细菌在固体培养基中的生长现象

牛牛文库文档分享第14页/共32页细菌在固体培养基中的生长现象

菌落

★

菌落特征：大小、形状、颜色、气味、透明度、表面光滑或粗糙、湿润或干燥、边缘整齐与否、溶血性等。

★菌落类型：S型、R型、M型菌落。菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。

牛牛文库文档分享第15页/共32页菌落（S型）菌苔菌落（R型）光滑型(S型)粗造型(R型)粘液型(M型)

牛牛文库文档分享第16页/共32页注意事项1、无菌操作

2、密而不重叠

3、勿划破琼脂

4、做好标记，第二天观察结果

牛牛文库文档分享第17页/共32页2、葡萄球菌培养（示教）营养要求不高，普通培养基生长良好

菌落：S型菌落，金黄色、表皮、腐生葡萄球菌各自形成金黄色、白色、柠檬色-脂溶性色素

牛牛文库文档分享第18页/共32页血平板：

金黄色葡萄球菌形成的β-溶血环金黄色色素白色色素

牛牛文库文档分享第19页/共32页3、链球菌培养（示教）

血平板上的菌落：

甲型溶血性链球菌形成草绿色溶血现象，乙型溶血性链球菌形成透明的完全溶血现象，丙型链球菌无溶血现象。

牛牛文库文档分享第20页/共32页甲链α溶血草绿色溶血乙链β溶血丙链不溶血

牛牛文库文档分享第21页/共32页4、常见致病菌的形态与染色性

牛牛文库文档分享第22页/共32页甲型溶血性链球菌取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100自阅片之一

牛牛文库文档分享第23页/共32页结核分枝杆菌取材：痰涂片染色法：抗酸染色放大倍数：10X100自阅片之二菌体染成红色，细长略微弯曲杆菌，单个或分枝状排列；（非抗酸菌及细胞染成蓝色）

牛牛文库文档分享第24页/共32页淋病奈瑟菌示教片之一取材：泌尿道脓性分泌物染色法：革兰染色放大倍数：10X100淋病奈瑟菌中性粒细胞分叶核淋球菌染成红色/G-，肾形或豆形，成双排列

牛牛文库文档分享第25页/共32页肉毒梭菌示教片之二取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100G+粗短杆菌，芽胞呈椭圆形，比菌体粗，次极端，细菌呈汤匙状或网球拍状

牛牛文库文档分享第26页/共32页产气荚膜梭菌示教片之三取材：小鼠腹腔渗出液染色法：革兰染色放大倍数：10X100G+粗大杆菌，两端几乎平切，在被感染得人或动物体内形成明显的荚膜

牛牛文库文档分享第27页/共32页炭疽杆菌示教片之四取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100G+粗大杆菌，有氧条件下形成椭圆形芽胞，位于菌体中央

牛牛文库文档分享第28页/共32页白喉棒状杆菌取材：纯培养物染色法：美蓝染色放大倍数：10X100取材：纯培养物染色法：Neisser染色放大倍数：10X100示教片之五菌体细长弯曲的杆菌，粗细不一，常一端或两端膨大呈棒状；排列不规则，呈栅栏状、V字形或L字形。异染颗粒

牛牛文库文档分享第29页/共32页1、细菌的人工培养（讲授）2、细菌的培养方法：

固体培养基接种法（自做）；半固体、液体培养基接种法（示教）3、葡萄球菌、链球菌培养及生化（示教）4、细菌的形态观察自阅片：甲型链球菌、结核杆菌示教片：淋球菌、肉毒杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌第2页：

实验名称：细菌平板划线分离法

（记录实验结果－绘一简图并描述平板上的菌落特征）第3页：

实验名称：细菌的形态观察（绘图）甲型链球菌、结核杆菌、淋球菌、肉毒杆菌、产气荚膜杆菌、白喉杆菌、炭疽杆菌

实验内容第1页：

实验名称：细菌培养及形态观察

牛牛文库文档分享第30页/共32页甲型溶血性链球菌取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数：10X100结核分枝杆菌取材：痰涂片染色法：抗酸染色放大倍数：10X100

淋病奈瑟菌取材：泌尿道脓性分泌物染色法：革兰染色放大倍数：10X100肉毒梭菌取材：纯培养物染色法：革兰染