攻毒第10周实验进课件

攻毒第10周实验进展汇报实验1《禽白血病病毒斑点杂交方法的建立与初步应用》的修改。该文已被中国预防兽医学报接收。实验2禽白血病A亚群（RAV-1)病毒攻毒实验第7-10周抗凝血淋巴细胞的分离和淋巴细胞RNA的提取。淋巴细胞RNA的反转录。1-10周淋巴细胞RNA和CDNA样品-80度保存。1-10周血清样品和红细胞的-80度保存。PCR检测结果1：心基因组；2:肝基因组；3：脾基因组；4：肾基因组；5：胸腺基因组；6：法氏囊基因组；7：心CDNA；8：肝CDNA；9：脾CDNA；10：肾CDNA；11:胸腺CDNA；12：法氏囊CDNA123456789101112阳水0961死亡鸡的PCR检测编号为0961（G5鸡群）的鸡于攻毒后第65天死亡，该鸡出现厌食、消瘦、虚弱、鸡冠发皱、贫血等临床症状。剖检病变为肝脏严重充血并肿大，腺胃肿大，胃壁变薄，十二指肠和胰腺有散在出血点。取该鸡的心、肝、脾、肾、胸腺、法氏囊提取基因组和总RNA，并进行PCR检测。0961鸡PCR检测结果

123456789101112阳水1：心基因组；2:肝基因组；3：脾基因组；4：肾基因组；5：胸腺基因组；6：法氏囊基因组；7：心CDNA；8：肝CDNA；9：脾CDNA；10：肾CDNA；11:胸腺CDNA；12：法氏囊CDNA0919死亡鸡的PCR检测编号为0919鸡（G88鸡群）与攻毒后第69天死亡，该鸡出现发育不良、精神沉郁、呕吐、羽毛竖立、贫血等临床症状。剖检病变为肝脏严重充血，肝表面出现血管瘤，心胞出血，脾脏轻微肿大，肾脏肿大并出血，肺脏和胰腺均出现严重的充血现象。取该鸡的心、肝、脾、肾、胸腺、法氏囊提取基因组和总RNA，并进行PCR检测。0919死亡鸡PCR检测结果

123456789101112阳水1：心基因组；2:肝基因组；3：脾基因组；4：肾基因组；5：胸腺基因组；6：法氏囊基因组；7：心CDNA；8：肝CDNA；9：脾CDNA；10：肾CDNA；11:胸腺CDNA；12：法氏囊CDNA0968死亡鸡的PCR检测结果编号为0968(G5鸡群)的鸡攻毒后第72天死亡，该鸡出现身体消瘦，精神沉郁，呕吐，羽毛粗乱，鸡冠泛白等临床症状。剖检病变为肝脏严重充血，肝小叶尖端出现深黄色区域，十二指肠严重充血并发黑，肾脏肿大。取该鸡的心、肝、脾、肾、胸腺、法氏囊提取基因组和总RNA，并进行PCR检测。0968死亡鸡PCR检测

123456789101112阳水1：肝基因组；2:心基因组；3：脾基因组；4：肾基因组；5：胸腺基因组；6：法氏囊基因组；7：肝CDNA；8：心CDNA；9：脾CDNA；10：肾CDNA；11:胸腺CDNA；12：法氏囊CDNA死亡鸡各组织中RAV-1的PCR统计表鸡群编号天数心肝脾肾胸腺法氏囊心CDNA肝CDNA脾CDNA肾CDNA胸腺CDNA法氏囊CDNAG2092518------++----G5097132-+-----+++-+G88091855-+---+++++-+G88091969++-+-+++++-+G5096165-+---+++++++G5096872++-+--++++++G88099540------------小结从上述PCR统计表可以看出，试验在RAV-1攻击后的第18天即可检测出病毒，直到攻毒后第72天。在对组织中病毒的检测发现，肝脏是病毒检出率最高的器官，其次是心脏和法氏囊，然后是肾脏，而在脾脏和胸腺中的检出率很低。实验6:RAV-1攻毒实验第1-9周各鸡群抗体的消长变化二重荧光定量PCR反应条件的优化及该检测方法的建立RAV-1攻毒后第1-4周淋巴细胞CDNA样品的荧光定量PCR检测RAV-1攻毒后第1-10周各鸡群死亡率的统计表鸡群个体总数死亡个体数死亡率%空白组6116.7