吸附百日咳菌苗白喉破伤风类毒素混合制剂制造及检定规程

吸附百日咳菌苗白喉破伤风类毒素混合制剂制造及检定规程本品系由百日咳菌苗原液、精制白喉类毒素及精制破伤风类毒素用氢氧化铝吸附制成。供儿童预防百日咳、白喉及破伤风之用。1抗原要求1.1百日咳菌苗原液应符合附录1《百日咳菌苗原液制造及检定要求》中2.4项的规定。1.2精制白喉类毒素应符合《吸附精制白喉类毒素制造及检定规程》中4项的要求。1.3精制破伤风类毒素应符合《吸附精制破伤风类毒素制造及检定规程》中4项的要求。2制造2.1配方每ml制剂中各种抗原成份含量如下：百日咳菌45亿～90亿精制白喉类毒素20Lf精制破伤风类毒素5Lf2.2吸附剂配制，见《吸附精制破伤风类毒素制造及检定规程》5项。2.3氢氧化铝稀释以蒸馏水按吸附后之总量将氢氧化铝原液稀释成1.0～1.5mg/ml。硫柳汞含量不超过0.01%（g/ml），氯化钠含量补足至0.85%（g/ml），高压蒸汽灭菌。2.4吸附按计算量将精制白喉类毒素、精制破伤风类素及百日咳菌苗原液加入稀释好的吸附剂内。调节pH至5.8～7.2。2.5分批同批吸附剂同批配合的原液同次吸附的制品为1批。如用大罐吸附时，所用抗原和吸附剂可以多批混合（精制类毒素不超过3批），每罐为1批。3成品检定3.1物理化学检查3.1.1振摇后应呈均匀乳白色混悬液。不应有摇不散的凝块或异物。3.1.2pH值应为5.8～7.2。3.1.3氯化钠含量为0.75%～0.9%(g/ml)。3.1.4硫柳汞含量为1.0%～0.5%(mg/ml)。3.1.5硫柳汞含量不超过0.01%(g/ml)。3.2鉴别试验抽取样品，另枸橼酸钠或用其他适宜方法将吸附剂溶解后，离心沉淀百日咳菌体和残留的吸附剂，按《吸附精制白喉类毒素制造及检定规程》中7.6项、《吸附精制破伤风类毒素制造及检定规程》中7.6项和附录1《百日咳菌苗原液制造及检定要求》中2.4.3项进行鉴别试验。3.3无菌试验按《生物制品无菌试验规程》进行。3.4毒性试验应符合附录1《百日咳菌苗原液制造及检定要求》中2.4.5项的规定。3.5安全试验3.5.1小白鼠法用体重18～20g之健康小白鼠5只，每只皮下注射检品0.5ml观察7日，不得有局部脓肿或死亡。3.5.2豚鼠法用体得300～400g豚鼠，每批制品不少于4只，每只皮下注射2.5ml，分两侧，每侧1.25ml，应符合《吸附精制白喉类毒素制造及检定规程》中4.4项及《吸附精制破伤风类毒素制造及检定规程》中4.5项要求。3.6效力试验3.6.1百日咳菌苗免疫力试验每3批抽1批进行，应符合附录1《百日咳菌苗原液制造及检定要求》中1.2.5项的规定。3.6.2白喉及破伤风类毒素的效力试验每更换1批类毒素时进行。取体重300～400g豚鼠4只，每只皮下注射0.5ml，第30天采血，将分离的血清等量混合，进行白喉及破伤风抗毒素单位测定。3.6.2.1白喉抗毒素单位测定用Lr/300家兔皮内法，要求每ml血清达到0.25IU。3.6.2.2破伤风抗毒素单位测定用L+/100小白鼠皮下法，要求每ml血清达到0.5IU。3.6.2.3白喉类毒素的效力试验亦可采用攻毒法。取体重300～350g豚鼠5只以上，每只皮下注射0.5ml。第30天各皮下攻击白喉毒素200个MLD，观察7天，豚鼠死亡不得超过20%；同时另取体重240～270g豚鼠3只，各皮下注射1个MLD毒素作为对照，2只对照豚鼠应发病并于96小时内死亡，允许另1只较晚死亡或发病。3.6.2.4亦可按WHO推荐的效力检