植物细胞悬浮培养技术

植物细胞悬浮培养技术第一页，共二十一页，2022年，8月28日切取形成层无菌接种诱导愈伤组织的形成试管苗的形成培养室移栽脱分化再分化第二页，共二十一页，2022年，8月28日12345再分化(愈伤组织)植物组织培养6脱分化第三页，共二十一页，2022年，8月28日脱分化就是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。脱分化的实质和结果分别是什么？实质是恢复细胞的全能性过程。结果是形成愈伤组织。第四页，共二十一页，2022年，8月28日愈伤组织原指植物体受伤时产生于伤口周围的组织。现多指切取植物体的一部分，置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养，诱导产生的无定形的组织团块。

愈伤组织的特点排列疏松、高度液泡化的无定形状态薄壁细胞团菠萝的愈伤组织脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化成根或芽等器官的过程。再分化：第五页，共二十一页，2022年，8月28日

当细胞分裂素和生长素共同使用时，能刺激愈伤组织的形成，而通过调节二者的浓度比，就可以调控植物细胞培养过程中芽和根的形成，称为“激素杠杆”。

生长素细胞分裂素根愈伤组织芽第六页，共二十一页，2022年，8月28日在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作？

植物组织培养中用到的培养基含有丰富的营养成分，有利于培养物的生长，然而各种杂菌同样也可以在上面迅速生长，所以植物组织培养过程中污染现象经常发生。培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和培养物争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有害的物质，导致培养物迅速死亡。

第七页，共二十一页，2022年，8月28日

植物细胞培养技术第八页，共二十一页，2022年，8月28日植物细胞培养的过程：愈伤组织悬浮培养或其它分散细胞悬浮细胞继代培养筛选

优良的细胞群体无性繁殖系扩大培养

细胞代谢产物

发酵技术

分离提纯单个细胞第九页，共二十一页，2022年，8月28日1、单细胞的分离由完整的植物器官分离单细胞由培养组织（如愈伤组织）中分离单细胞机械法(研或刮）酶解法叶片是分离单细胞的最好材料第十页，共二十一页，2022年，8月28日机械法和酶解法比较机械法酶解法细胞不受到酶的伤害；不用质壁分离；细胞产量低；细胞易破。细胞受到酶的伤害；要质壁分离；细胞产量高；细胞不易破。第十一页，共二十一页，2022年，8月28日2由培养组织（愈伤组织）分离单细胞材料：胡萝卜肉质根步骤：1诱导产生愈伤组织2愈伤组织反复继代，使组织不断增殖，提高愈伤组织的松散性；第十二页，共二十一页，2022年，8月28日摇床用于振荡继代悬浮3悬浮培养：将愈伤组织在液体培养基中培养，建立悬浮培养物优点：细胞团成小细胞团或单细胞；在培养基中均匀分布；有空气交流。第十三页，共二十一页，2022年，8月28日悬浮培养愈伤组织第十四页，共二十一页，2022年，8月28日4、悬浮继代培养分批培养连续培养第十五页，共二十一页，2022年，8月28日继代分批培养第十六页，共二十一页，2022年，8月28日连续培养加入培养基排出培养基及其培养物二者体积相等分：开放式连续培养封闭式连续培养第十七页，共二十一页，2022年，8月28日5、继代培养最佳继代时期：

选择指数生长期和直线生长期。第十八页，共二十一页，2022年，8月28日滞后期（微生物又叫适应期）

指数生长期（微生物又叫对数期）直线生长期减慢期静止期（微生物又叫稳定期）培养时间培养细胞数目1234512345细胞生长曲线：呈S形曲线第十九页，共二十一页，2022年，8月28日6、植物细胞培养的意义：1）不受地理、季节和气候条件的限制；2）节省土地，降低成本，生产周期短，可大大提高经济效益；不污染环境3）可代替整体植株在工厂内连续生产所需产物；4）可通过添加抑制剂等使生物合成按照人的意志进行；5）可通过诱变筛选，获得高产细胞株，并且可以进行特定的生物转化获得新的有用物质。第二